Рефераты по апертуре микроскопа, иммерсионной масле, по микроскопии
Скачать 131.12 Kb.
|
| Изучение микропрепаратов под иммерсионным объективом является обязательным этапом оптической микроскопии клеток и тканей. Будучи кристаллами или будучи связанными, с биокристаллами, цитологические красители и фиксаторы так же обладают способностью к преломлению среды. Микроскоп состоит из механической части, осветительной части, оптической части. Полезное разрешение микроскопа определяется апертурой его оптической и осветительной части. Так как числовая А. пропорциональна преломлению среды, которая рассматривается под микроскопом, то для её увеличения рассматриваемые предметы часто помещают в жидкость с большим показателем преломления (в т. н. иммерсионную жидкость). В случае гистологического исследования клетки и ткани окрашены цитологическими красителями, которые поглощая свет, участвуют в формировании изображения микрообъектов. Оптическая система, которая участвуют в формировании изображения состоит из осветителя, Конденсора, Предметного стекла, микроскопического объекта, покровного стекла и объектива, а так же иммерсионного масла, и так же среды для заключения биологических микроскопических объектов под покровное стекло (о последнем забывают указать в ряде руководств по биофизике и оптике), все это рассматривается под лупой-окуляром. При введении понятия «среда для заключения биомикроскопических объектов клетки-ткани органов следует учитывать следующее. Биологические микроскопические объекты состоят из сложной системы белков, липидов, углеводов, нуклеиновых кислот. При этом они окрашены цитологическими красителями, которые поглощая свет, участвуют в формировании изображения микрообъектов. Будучи кристаллами или будучи связанными с биокристаллами образующих клетку, цитологические, так же обладают способностью к преломлению среды. Изменение светопреломляющих свойств клетки обусловленных изменением содержания белков и нуклеиновых кислот регистрируется с помощью интерференционного микроскопа. По этому, выбор иммерсионной жидкости для микроскопии и заключения тканей, клеток под покровное стекло препарата имеет принципиальное значение для микрофотосъемки. Сейчас, предложен целый ряд видов иммерсионных жидкостей. В частности в случае световой микроскопии для заключения срезов тканей органов и клеток под покровное стекло микроскопического препарата дают хорошие результаты эпоксидные смолы –аралдиты, что ранее использовалось в случае просвечивающей электронной микроскопии (см. профессор д.м.н. Целуйко С.С. (диплом ВАК)1985…….-2012 г.). Рефераты по апертуре микроскопа, иммерсионной масле, по микроскопии. Апертура (от лат. apertura — отверстие), действующее отверстие оптической системы, определяемое размерами линз или диафрагмами. Угловая А. — угол a между крайними лучами конического светового пучка, входящего в оптическую систему (см. рис.). Числовая А. равна nsina/2, где n — показатель преломления среды, в которой находится предмет. Освещённость изображения пропорциональна квадрату числовой А. Разрешающая способность прибора (минимальное расстояние между 2 близлежащими точками, при котором они всё ещё видны отдельно) пропорциональна А., Так как числовая А. пропорциональна n, то для её увеличения рассматриваемые предметы часто помещают в жидкость с большим показателем преломления (в т. н. иммерсионную жидкость). Яндекс.Словари › БСЭ, 1969-1978 ИММЕРСИОННЫЕ ЖИДКОСТИ (от позднелат. immersio - погружение), служат для определения показателей преломления пкристаллич. и аморфных в-в. Частицы (100-500 мкм) исследуемого в-ва помещают в И. ж. с известными пи наблюдают под микроскопом. При равенстве исследуемого в-ва и И. ж. фазовые границы невидимы, при разных пна границе двух фаз появляется тонкая светлая полоска (полоска Бекке). Используя набор И. ж. с известными п, определяют твердого в-ва. Кроме п (преломление) с помощью И. ж. можно определять также угол между оптич. осями, число оптич. осей и нек-рые др. кристаллооптич. характеристики. Стандартный набор И. ж. (п 1,408-1,780) включает изоамиловый спирт, легкие погоны нефти и фракцию керосина с т. кип. 220-240 °С, a-хлорнафталин, СН 2I2, насыщ. р-р S в СН 2I2 и др. И. ж. с промежут. пполучают смешением неск. жидкостей. И. ж. с п >1,700 - р-ры S и As2S3 в АrВr3, As2S3, AsI3 и S в CH2I2, Se и As2S3 в AsBr3. И. ж. с п <1,408 - смеси легких фракций нефти и смеси глицерина и спирта с водой и др. Л. В. Данюшевский. Химическая энциклопедия. — М.: Советская энциклопедия. Под ред. И. Л. Кнунянца. 1988. иммерсионная системаИММЕРСИОННАЯ СИСТЕМА - объектив микроскопа, у к-рого пространство между объективом (или покровным стеклом) и наружной поверхностью фронтальной (первой) линзы заполнено прозрачной, т. н. иммерсионной жидкостью, показатель преломления к-рой n>1. Использование иммерсионной жидкости повышает числовую апертуру объектива и как следствие - разрешающую способность микроскопа. Числовая апертура А=пsinи, где п - показатель преломления среды между покровным стеклом и наружной поверхностью линзы, и - половина угла между крайними лучами, входящими в объектив. У "сухой" системы средой между покровным стеклом п наружной поверхностью линзы является воздух (n=1), поэтому A[1. Использование иммерсионной жидкости в И. с. позволяет повышать А до 1,6. В совр. объективах микроскопа в качестве иммерсионной жидкости используются вода, спец. иммерсионное масло (масляная иммерсия), водный раствор глицерина (при работе в УФ-области спектра), иодметилен (для петрографии). Каждый объектив рассчитывается на применение одной определ. иммерсионной жидкости, замена её приводит к существенному ухудшению качества изображения. Кроме повышения апертуры использование И. с. уменьшает засветку изображения, вызываемую светом, отражённым от наружной поверхности фронтальной линзы объектива или от поверхности прозрачной плёнки, покрывающей изучаемый объект при наблюдении в отражённом свете. Лит. см. при ст. Микроскоп. А. П. Грамматик. Межотраслевая Интернет-система поиска и синтеза физических принципов действия преобразователей энергии http://gubkin.ru/ Иммерсионный метод (от лат. immersio – погружение) – метод определения показателя преломления n мелких зёрен (несколько мкм) твёрдых тел под микроскопом. Зёрна исследуемого вещества погружают в нанесённые на предметное стекло капли различных жидкостей с известным n. Наблюдая под микроскопом эти препараты, подбирают жидкость, наиболее близкую по n к данному веществу. Для сравнения n твердого вещества и жидкости пользуются методом Бекке, косым освещением или методом двойного диафрагмирования. В последнем методе в световой пучок вводят два экрана с прямолинейным краем (диафрагмы); один из экранов помещается под препаратом, другой – над объективом микроскопа. При этом видимые в микроскоп осколки твёрдого вещества кажутся как бы односторонне освещёнными; положение их светлых и тёмных краёв зависит от соотношения n твёрдого вещества и жидкости. Необходимое для измерений равенство этих n достигается применением монохроматического света с различными длинами волн и отмечается по исчезновению одностороннего освещения или полоски Бекке. Использование одной только диафрагмы (верхней или нижней) даёт косое освещение, вызывающее такой же эффект, как диафрагмирование, но не во всём поло зрения одновременно. Иммерсионная система – объектив микроскопа, у которого пространство между объективом (или покровным стеклом) и наружной поверхностью фронтальной (первой) линзы заполнено прозрачной, т. н. иммерсионной жидкостью, показатель преломления которой n>1. В качестве иммерсионных жидкостей применяют кедровое или минеральное масло (показатель преломления 1,515); водный раствор глицерина (1,434); воду (1,333): монобромнафталин (1,656); вазелиновое масло (1,503); йодистый метилен (1,741). Оптические характеристики иммерсионной жидкости (показатель преломления и дисперсия) входят в расчёт иммерсионных систем, поэтому иммерсионные системы можно применять только с той жидкостью, на которую система рассчитана. В противном случае резко ухудшится качество изображения. Использование иммерсионной жидкости повышает числовую апертуру объектива и как следствие – разрешающую способность микроскопа. Числовая апертура А = n·sinu, где n – показатель преломления среды между покровным стеклом и наружной поверхностью линзы, u – половина угла между крайними лучами, входящими в объектив. У «сухой» системы средой между покровным стеклом и наружной поверхностью линзы имеется воздух (n=1), поэтому A ≤ i. "Сухая" система не может иметь A>1, у масляных иммерсионных систем А достигает 1,3 у монобромнафталиновой – 1,6. В иммерсионных системах уменьшается рассеяние света и тем самым увеличивается контраст изображения. Это особенно важно при исследовании слабо отражающих объектов. Кроме повышения апертуры использование иммерсионных систем уменьшает засветку изображения, вызываемую светом, отражённым от наружной поверхности фронтальной линзы объектива или от поверхности прозрачной пленки, покрывающей изучаемый объект при наблюдении в отражённом свете. Иммерсионные системы позволяют исследовать объекты, находящиеся на разной глубине в иммерсионной жидкости, путём погружения в неё объектива. Например, с объективом, рассчитанным на водную иммерсию, можно наблюдать микроорганизмы в воде. Иммерсионные системы применяются в медицине. Поиск альтернативных методов коррекции отёчного синдрома и гиповолемии при преэклампсии привел к разработке метода водно-иммерсионной компрессии. Принципы иммерсионных систем положены в основу метода иммерсионной фотолитографии. Основным отличием технологии является тот факт, что между проекционной системой и кремниевой пластиной помещается слой жидкости с коэффициентом преломления большим, нежели у газовой смеси. Зачастую для этих целей используется обыкновенная очищенная вода. На экспериментальной установке иммерсионной фотолитографии с традиционным лазером с длиной волны 193 нм им впервые удалось изготовить на кремниевом чипе высококачественную решетку из линий с шагом всего 29,9 нм. Это значение всего на семь процентов меньше, чем считавшиеся ранее предельными 32 нм. Но оно способно дать полупроводниковой индустрии по крайней мере семь лет "передышки", прежде чем потребуются радикальные изменения в технологии производства чипов. Физическая энциклопедия / гл.ред. Прохоров А.М. - М.: Большая российская энциклопедия. 1994.  2. Федин Л. А., Микроскопы, принадлежности к ним и лупы, М., 1961. 3. Микроскопы, под ред. Н. И. Полякова, М., 1969.Оптическая система глаза – система иммерсионная: свет, пройдя через роговицу и хрусталик, строит изображение в среде с показателем преломления n', отличающимся от единицы. Поэтому для глаза переднее фокусное расстояние f отличается от заднего f ' не только по знаку, но и по абсолютному значению, вследствие формулы ƒ`/ƒ = –n/n (1), где n = 1, n' = 1,336. В глазу несколько преломляющих поверхностей, форма каждой из них отличается от сферической, а центры их не лежат на одной прямой (система нецентрирована). Все это чрезвычайно затрудняет изучение и описание глаза. Однако для практических расчетов вполне пригодно приближенное описание, в котором поверхности приняты за сферические, а некоторая линия выбрана так, что центры всех сфер лежат на ней, и эту линию принимаем за оптическую ось. Линия, проведенная от фиксируемой глазом точки в центр фовеолы, называется зрительной линией. С оптической осью глаза она составляет угол примерно от 4° до 8° в норме. На основании измерения параметров многих реальных глаз и вычисления их средних значений можно составить представление о некотором «среднем» глазе. Упрощенная модель оптической системы глаза, представляющая собой центрированную оптическую систему и соответствующая средним, найденным опытным путем значениям, называется схематическим глазом. Хотя схема глаза по Гульстранду построена приближенно, с ее помощью можно производить расчеты с точностью, вполне достаточной для практических целей. В качестве примера рассмотрим построение изображения предмета на сетчатке и рассчитаем его размеры. Пусть предмет, высота которого у, находится на расстоянии l от глаза (Рисунок 1). Будем считать, что по абсолютному значению l >> f и что, следовательно, при покое аккомодации изображение предмета будет сфокусировано на сетчатке. Построение изображения в схематическом глазу  Рис.1 Построение изображения предмета на сетчатке глаза производится по правилам геометрической оптики: луч света от точки В, направленный через переднюю узловую точку глаза N, пройдет через заднюю узловую точку N' параллельно первоначальному направлению. Точка же предмета А изобразится на сетчатке в точке А'. Размер изображения у' = –αl', а отрезок l' находится как разность между длиной глаза dSQ и расстоянием от вершины роговицы до задней узловой точки (соответственно равными, по Гульстранду, 24 мм и 7,332 мм): l` = 24 – 7,332 = 16,668 (2) Линейное увеличение β, равное отношению у' к у, принимает вид: β = y/y` = αl`/ αl = l`/ l (3) Линейное увеличение отрицательно, т.е. на сетчатке глаза получается обратное уменьшенное изображение предметов. Неудобство построений и расчетов, аналогичных тем, которые приведены выше, связано с наличием двух узловых точек в схеме Гульстранда, расстояние между которыми очень мало: всего 0,254 мм. В целях дальнейшего упрощения расчетов была предложена еще более простая модель глаза, так называемый приведенный, редуцированный глаз. Водно-иммерсионная компрессия отёчных тканей приводит к увеличению гидростатического давления в интерстиции. Даже при выраженных отёках у беременных гидростатическое давление во внесосудистом пространстве составляет всего 0,7 мм рт.ст. Следовательно, для того, чтобы создать обратный градиент, способный вытолкнуть жидкость из внесосудистого пространства, уже достаточно водного столба высотой, превышающей 1 см (10 мм вод.ст. со ответствует 0,735 мм рт.ст.). В этих условиях создавшийся градиент приводит к увеличению резорбционных сил Старлинга в венозной части капилляра и аутотрансфузии жидкости из внесосудистого пространства в сосудистое русло. Увеличение объёма циркулирующей крови сопровождается аутогемодилюцией и происходит за счет притока жидкости, ранее секвестрированной во внесосудистом пространстве. Вероятно, аутогемодилюция, связанная с ВИК, сопровождается обратным поступлением белков, секвестрированных в интерстициальном пространстве. Дегидратационному эффекту подвергается не только интерстициальное пространство, но и сами клетки периферических тканей. Механизм клеточной дегидратации до конца не ясен, но он достаточно точно подтверждается при исследовании влияния погружения в воду на ионный состав внутри- и внеклеточной жидкости. http://yandex.ru/clck/redir/AiuY0DBWFJ4ePaEse6rgeAjgs2pI3DW99KUdgowt9XvfZiOgLIyKZVzQtsLDxQNt4FnxmrTpwrM1RziAn8kOdBJjngTGPO_d8XocC8a1jbhlzLFh1xZ-h5LT3lkXy2QFukd9CWNvLHs7eOp6oigWjG-HpWYwlAh96wqiFRFjp_EqdKkBx3E3msK_lXQP2mWO?data=UlNrNmk5WktYejR0eWJFYk1LdmtxcW9WN21LcDF6QmRIMFlLQnRmM3plcWw5Y3h2Y05vMG5pcmVySERaU2tHeWpocHcyT2kwOUd2RGFQT3VTQlZKMlo4Tm80TDRNRTNyM3BOVkYyZnZZejZfUmJaa1doS2hvc2t1MFJqOG8yYU00Tk1pUzBjN3otQQ&b64e=2&sign=30c051e7cacc38f45af3d6cabbd66c4e&keyno=8&l10n=ru&i=9 ГОСТ 19927-74 Пластмассы. Методы определения показателя преломления Первый зам. генерального директора Сажин Б.И. Руководители темы: Сульженко Л.Л., Анисимов Е.А. Исполнители: Шалаева Л.Ф., Михайлова В.В. ИММЕРСИОННО-МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ МЕТОД3.1. Аппаратура и материалы Микроскоп МБР или любой другой, имеющий увеличение 200  .Натриевая лампа. Набор иммерсионных жидкостей с известным показателем преломления. 3.2. Подготовка к испытанию 3.2.1. Размеры частиц порошка, бисера или гранул испытуемого полимерного материала должны быть меньше, чем поле зрения объектива микроскопа. 3.2.2. Перед испытанием к испытуемому полимерному материалу подбирают иммерсионные жидкости. Показатели преломления иммерсионных жидкостей должны быть близки к показателю преломления испытуемого материала. Если приблизительный показатель преломления испытуемого материала неизвестен, то рекомендуется применять иммерсионную жидкость с показателем преломления 1,56. Для химически чистых иммерсионных жидкостей показатели преломления приведены в табл.2 приложения. Иммерсионные жидкости используют отдельно или в смесях. Смеси двух иммерсионных жидкостей приготавливают для того, чтобы получить жидкость с показателем преломления, близким к показателю преломления испытуемого полимерного материала. Разница в показателях преломления между иммерсионной жидкостью или их смесями и испытуемым материалом должна быть 0,001 или 0,0001. Показатели преломления смесей иммерсионных жидкостей измеряют с помощью рефрактометра. Иммерсионные жидкости или их смеси не должны вызывать набухания или растворения полимерного материала и не должны быть агрессивными по отношению к испытуемому материалу. 3.3. Проведение испытания 3.3.1. Показатель преломления определяют при 20±0,5 °С. 3.3.2. Схема микроскопа и вид поля зрения (I, II) приведены на черт.2. 1, 2 - покровное и предметное стекла; 3 - иммерсионная жидкость с частицами испытуемого материала; - луч света; 4 - зрительная труба микроскопа; I, II - поле зрения микроскопа при несовпадении и совпадении показателей преломления испытуемого материала и иммерсионной жидкости соответственно. Черт.2 3.3.3. На предметное стекло наносят несколько капель иммерсионной жидкости с известным показателем преломления и немного порошка бисера или гранул испытуемого материала. Накрывают препарат покровным стеклом и помещают под микроскоп. Распределение частиц испытуемого материала в иммерсионной жидкости должно быть таким, чтобы можно было одновременно наблюдать примерно равные площади частиц и окружающего их поля. 3.3.4. В поле зрения микроскопа наблюдают узкие светлые круги (полосы Бекке), окаймляющие частицы материала. Нарушая фокусировку микроскопа наблюдают перемещение полос Бекке. При удалении препарата от тубуса микроскопа полосы смещаются в сторону среды с большим показателем преломления, при приближении препарата к тубусу микроскопа полосы смещаются в сторону среды с меньшим показателем преломления. Если полосы отсутствуют, то показатель преломления иммерсионной жидкости и испытуемого материала совпадают. Частицы испытуемого материала становятся практически невидимыми в жидкости. Наблюдения проводят с различными иммерсионными жидкостями, добиваясь совпадения показателей преломления испытуемого полимерного материала и иммерсионной жидкости. За показатель преломления полимерного материала принимают показатель преломления этой иммерсионной жидкости. Иммерсионная система (от позднелат. immersio — погружение), оптическая система, в которой пространство между предметом и первой линзой заполнено иммерсионной жидкостью (рис.). И. с. применяются в микроскопах. В качестве иммерсионных жидкостей применяют кедровое или минеральное масло (показатель преломления 1,515); водный раствор глицерина (1,434); воду (1,333); монобромнафталин (1,656); вазелиновое масло (1,503); йодистый метилен (1,741). Оптические характеристики иммерсионной жидкости (показатель преломления и дисперсия) входят в расчёт И. с., поэтому И. с. можно применять только с той жидкостью, на которую система рассчитана. В противном случае резко ухудшится качество изображения. Включение объектива в состав И. с. даёт возможность повысить его апертуру А, а следовательно, и разрешающую способность микроскопа. "Сухая" система не может иметь А > 1, у масляных И. с. А достигает 1,3, у монобромнафталиновой — 1,6. В И. с. уменьшается рассеяние света и тем самым увеличивается контраст изображения. Это особенно важно при исследовании слабо отражающих объектов. И. с. позволяют исследовать объекты, находящиеся на разной глубине в иммерсионной жидкости, путём погружения в неё объектива. Например, с объективом, рассчитанным на водную иммерсию, можно наблюдать микроорганизмы в воде. Лит. см. при ст. Микроскоп. Л. А. Федин. Яндекс.Словари › БСЭ, 1969-1978 К.м.н. (диплом ВАК) С.В. Зиновьев |
Добавить документ в свой блог или на сайт
Похожие:
 | Урок Тема урока: «Прибор, открывающий «невидимое» Обучающие: познакомить учащихся со строением микроскопа и назначением его частей; обучить практическим навыкам работы с микроскопом;... |  | Образование и поведение пузырьков в трансформаторном масле при вибрации Целью данной работы является исследование возможности газообразования в модельных экспериментах, применительно к промышленным маслонаполненным... |
| Реализация высокопроизводительного алгоритма параллельного исполнения... | | Системы управления качеством Не принимаются к рассмотрению рефераты, сохранённые в формате docx или выполненные не в ms office. Не принимаются рефераты, имеющие... |
| Рефераты: Зав. Благовещенского фап казбулатовой Р. Т. по теме «Лихорадка Западного Нила» В мбуз «Тюльганская цпб» прошло районное совещание медработников фап, врачебных амбулаторий, участковой больницы на котором были... | | Многоуровневые системы распознавания объектов в сканирующей зондовой микроскопии Правления ксарс – А. Лесникова, Ю. Белозерова, Т. Громова, Н. Камильери, А. Курышев, М. Ломакина, И. Ляхтейнен, И. Маликова |
| Рабочая программа дисциплины дисциплина дв методы световой микроскопии Федеральным государственным образовательным стандартом высшего профессионального образования по укрупненной группе 020000 – Естественные... | | Лабораторная работа «Устройство микроскопа, приёмы пользования им.... Строение растительной клетки. Лабораторная работа «Устройство микроскопа, приёмы пользования им. Клеточное строение растений» |
| Методы магнитной микроскопии и их применение в экспериментальной физике Работа выполнена в Отделении физики токамаков реакторов Государственного научного центра Российской Федерации Троицкого института... | | Темы курсовых работ на кафедре физики Земли для студентов 2 курса Применение магнитосиловой микроскопии для исследования структуры ферримагнитных зерен горных пород |
| Самостоятельная работа студента по дисциплине Охрана труда Направление... В качестве отчета предоставляют доклады, рефераты, презентации. Студенты готовят доклады на 5-10 минут выступлений, рефераты на 10-15... | | Рефераты на 1 семенар. Тема Система, функции и принципы социального менеджмента Тема Становление социального менеджмента, его место в системе социальных и управленческих наук (рефераты на 1 семенар) |
| Программа спецкурса «Изучение поэзии на уроках в 5-7 кл.» Раздел... Преподавание литературы в школе: научно- методические статьи, рефераты, уроки, программы /Сост. Комарова Н. А., Малярова С. Г | | Контрольная работа для магистров заочной формы обучения Контрольная... Студенты, чья фамилия начинается с буквы а по к выбирают рефераты по темам 1-20 из предложенных. Студенты, чья фамилия начинается... |
| Программа по формированию навыков безопасного поведения на дорогах... «Возможности цифрового микроскопа в обучении школьников способам обработки визуальной информации» | | Реферат Тема: применение электронной микроскопии в микробиологии... Электронная микроскопия – метод морфологического исследования объектов с помощью потока электронов, позволяющих изучить структуру... |
