Эффективность гипербарической оксигенации в комплексной терапии гемолитической болезни, сочетанной с гипоксическим поражением цнс новорожденных





НазваниеЭффективность гипербарической оксигенации в комплексной терапии гемолитической болезни, сочетанной с гипоксическим поражением цнс новорожденных
страница2/4
Дата публикации13.12.2014
Размер0.6 Mb.
ТипАвтореферат
100-bal.ru > География > Автореферат
1   2   3   4

Методы иммунологического и иммуноморфологического анализа.


Определяли концентрацию IgM и IgG в сыворотке крови по Манчини (G. Mancini, 1970). Оценивали общую комплементарную активность – гемолитическим методом (100% гемолиз). С помощью реагентов (R) – определяли содержание пяти ранних фракций компонентов комплемента: С1 – С5 в соответствии с Инструкцией по применению реагентов для определения активности компонентов комплемента (регистрационный номер: №: Р№ 001453/01 – 2002, Москва, 2002).

В целях выявления фиксации IgM и IgG и комплемента (С) в мембранах эритроцитов ребенка на высушенных и фиксированных в холодном ацетоне (4,0°С) в течение 15 мин. мазках крови ставили реакции иммунофлюоресценции по A. Coons (1956) и R. Goldwasser, C. Shepard (1958). Препараты изучали в люминесцентном микроскопе «ЛЮМАМ – И». В качестве индикатора интенсивности свечения использовали цифровой вольтметр.

Статистическую обработку результатов исследования проводили при помощи ПЭВМ IBM – 486 SX/33 MHz использовали стандартный пакет программ «Stistica for Windows Release 6,0». Полученные данные обрабатывались вариационно-статистическим методом с применением критерия Стьюдента-Фишера. Связи между показателями выявлялись корреляционным анализом.

Методики лечения.

  1. Плазмаферез в количестве от 3-х до 5-и сеансов производили методом непрерывной сепарации крови через плазмофильтры (ПФ – 800). Замена плазмы осуществлялась в пределах 1 – 1,5 объемов циркулирующей плазмы ребенка (Михельсон В.А., 2003).

  2. ГБО в режиме 1,5 ата – 60 мин. в количестве трех сеансов проводили в барокамере БЛКС – 3 – 01 объемом 630 л. Абсолютная влажность в барокамере поддерживалась в интервале 55-75%, температура 24 – 26°С, концентрация СО2 не превышала 0,33%. Компрессию и декомпрессию осуществляли в течение 10 мин. со скоростью 5,1 кПа/мин.

Результаты исследования и их обсуждение.

Комплексный анализ полученных данных, отражающих кинетику формирования ГБН по АВО-несовместимости и Rh-конфликту, протекающей на фоне первичного гипоксического поражения ЦНС позволил установить общие патогенетические закономерности становления изучаемой патологии, в основе которых реакции «антиген-антитело-комплемент» – иммунный конфликт как единый базисный механизм. Вместе с тем выявлены и определенные различия в конкретике элементов иммунной системы матери и ребенка, а также последовательность их участия в реализации иммунопатологических реакций при ГБН по АВО и Rh (+).

Динамика изменения патоиммунных показателей свидетельствует о том, что начало формирования патологического процесса у новорожденных двух клинических вариантов ГБН связана с антителами фиксированными на мембранах эритроцитов (Эр) ребенка, что клинически проявляется в обоих случаях гемолизом и гиперретикулоцитозом.

Так методом иммунофлюоресцентной микроскопии обнаружено, что при ГБН по АВО-несовместимости на территории мембран Эр регистрируется интенсивное свечение IgG. При этом их концентрация в крови новорожденных сохраняется на уровне нормальных значений (табл. 1)

Таблица 1

Иммунологические и иммуноморфологические показатели у детей при ГБН по АВО-несовместимости (стадия до лечения – 1-е сут.).


Среда

Показатели (n = 20)

IgM

г/л

IgG

г/л

C

гем. ед.

C1

гем. ед.

C3

гем. ед.

C5

гем. ед.

Сыворотка крови


К


0,23±0,03


4,24±0,31


54,75±0,6


32,5±0,91


34,6±1,85


33,6±0,81


П


0,25±0,03


4,31±0,24


48,35±0,54*


25,4±0,82*


26,2±0,72*


24,5±0,9*


Среда

Показатели (n = 20)

IgM

г/л

IgG

г/л

C

гем. ед.

C1

гем. ед.

C3

гем. ед.

C5

гем. ед.

Мембраны эритроцитов


К


0


0


0


-


-


-


П


0


0,1195±0,002*


0,1090±0,002*


-


-


-


Примечание: К – контроль (норма); П – патология (ГБН – АВО); *) - р<0,05

Иные характеристики показателей выявлены при иммунологических и иммуноморфологических исследованиях у детей с ГБН связанной с Rh-конфликтом. Если также как при ГБН по АВО-несовместимости уровень IgG в крови детей с этой формой гемолитической болезни соответствует параметрам нормы, то концентрация IgM возрастает на 28%, а на территории мембран Эр выявляется интенсивное свечение IgM. И при АВО-несовместимости, и при Rh-конфликте единственный класс антител способный проникать трансплацентарно в организм плода и фиксироваться на его эритроцитах – IgG имеющие М.М. 100000 (Федорова М.В., Калашникова Е.П., 1986; Торубарова Н.А. и соавт., 1993). Учитывая данное положение и принимая во внимание то обстоятельство, что антиэритроцитарные антитела в период новорожденности образуются редко (Ludvigsen C. et al., 1987) можно с наибольшей вероятностью полагать, что обнаруженные нами у детей с ГБН по АВО-несовместимости на территории мембран эритроцитов флюоресцеинмеченный материал IgG имеет материнское происхождение, тогда как при ГБН связанной с Rh-конфликтом, аналогичной локализации материал IgM является антителами ребенка.

Установлено, что прогрессирование клинической симптоматики ГБН (АВО) не сопровождается сколь-либо значимыми отклонениями от нормальных показателей IgM и IgG. Вместе с тем в мембранах Эр обнаруживается увеличение на 4,5% количества люминесцирующего материала IgG, что подтверждает суждение об участии в патоиммунном конфликте при групповой несовместимости IgG матери.

Формирование патоиммунных механизмов при ГБН (АВО) осуществляется через материнские IgG1 и IgG3. Являясь комплементсвязывающими антителами они в состоянии напрямую привлекать компоненты комплементарной системы, повышающей активность к раннему неонатальному периоду (Стефани Д.В., Вельтищев Ю.Е., 1977; Пол У., 1987).

Убедительные доказательства определяющей роли IgM ребенка как изначального, а затем и инициирующего активацию иммунопатогенетических механизмов эритроцитолизиса при резус-конфликте, получены нами при изучении кинетики изменения величин его содержания в жидкой и клеточной (эритроцитарной) части крови (табл. 2).

Таблица 2

Иммунологические и иммуноморфологические показатели у детей с ГБН при Rh-конфликте (стадия до лечения – 1-е сут.).


Среда

Показатели (n = 20)

IgM

г/л

IgG

г/л

C

гем. ед.

C1

гем. ед.

C3

гем. ед.

C5

гем. ед.

Сыворотка крови


К


0,23±0,03


4,24±0,31


54,75±0,6


32,5±0,91


34,6±1,85


33,6±0,81


П


0,32±0,03*


4,28±0,40


51,25±0,6*


24,1±0,79*


26,3±0,72*


23,8±0,92*


Среда

Показатели (n = 20)

IgM

г/л

IgG

г/л

C

гем. ед.

C1

гем. ед.

C3

гем. ед.

C5

гем. ед.

Мембраны эритроцитов


К


0


0


0


-


-


-


П


0,1038±0,002*


0


0,1156±0,002*


-


-


-


Примечание: К – контроль (норма); П – патология (ГБН – Rh(+)); *) - р<0,05

Так по мере прогрессирования клиники ГБН Rh (+) наблюдается увеличение на 11% концентрации IgM в плазме и параллельное повышение на 13% интенсивности свечения IgM в мембранах Эр по сравнению с исходными значениями, что в свою очередь свидетельствует о повышении возможностей иммунной системы новорожденных в раннем неонатальном периоде продуцировать полноценные иммунопротеины и на этой основе обеспечивать аутоиммунные реакции. Процесс инкорпорации IgM в структуры Эр сопровождается существенным ростом их разрушения и уменьшением их количества в циркуляции на 42%.

Одним из важнейших свойств IgM и IgG связанных со структурой Fc-фрагмента – способность фиксировать комплемент (Пол У., 1987). Комплементсвязывающие реакции играют исключительную роль как в защите организма от инфекций, так и при аутоиммунных процессах (Stanworth D.K., Pardoe G., 1977). Прогрессирование патологического процесса у новорожденных обеих форм ГБН, сопровождается последовательным падением уровней общей комплементарной активности сыворотки крови с 6,5% в дебюте заболевания до 25% в его разгаре. При этом на территории мембран Эр, в участках фиксации IgG (при ГБН по АВО) и IgM (при ГБН Rh(+)) определяется свечение комплемента. По мере прогрессирования патологического процесса увеличение флюоресцеинмеченного материала IgG и IgM сопровождается параллельным ростом интенсивности свечения комплемента, что свидетельствует об активном формировании иммунных комплексов способных, как известно, проявить альтеративное действие на ткани-мишени (Серов В.В. и соавт., 1970; Gurevich H. et al., 1997). Участие комплемента в качестве составляющей иммунных комплексов опосредуется путем связывания с эффекторными центрами Fc-фрагмента молекул IgM и IgG и последующей активацией комплементарной системы по классическому пути с образованием цитолитических комплексов (Кульберг А.Я., 1986) повреждающих Эр. Процесс эритроцитолитических реакций сопровождается активным потреблением комплемента и его компонентов и приводит к уменьшению их концентрации в центральном русле крови. Причем если при групповой несовместимости дефицит составляет 11,5% в дебюте заболевания и 20% в его разгаре, то при резус-конфликте – 6,4% и 26,4% соответственно.

Таким образом, для формирования и завершения иммунопатогенетических механизмов ГБН по АВО-несовместимости и Rh-конфликту необходим адекватный уровень реагирования иммунной системы ребенка. По мере взросления иммунной системы плода, способности продуцировать полноценные иммуноглобулины, обладающие комплементсвязывающей активностью (IgM и IgG), повышением концентрации комплемента в крови, возможна клиническая реализация ГБН, что наиболее часто и происходит при физиологическом течении беременности к моменту родов и первые сутки жизни новорожденного.

Иммунопатогенетическое разрушение Эр при ГБН приводит к высвобождению в кровеносное русло гемоглобина (Hb), который в свою очередь являясь основным продуцентом билирубина (Бн) опосредует накопление его токсичной свободной фракции (СБн). Подтверждением этому факту служат результаты корреляционного анализа установившего прочную обратную зависимость между показателями Hb и Бн (r= -0,74) при обеих формах гемолитической болезни.

Три сеанса плазмафереза обеспечивают последовательное снижение излишка токсичного свободного билирубина (СБн) на 19,5% при ГБН (АВО) и 9,5% ГБН (Rh (+)) – (табл. 3).

Таблица 3

Динамика показателей билирубинового обмена (M±m)

Группа

К-во случаев

Сроки исслед.

Билирубин общий мкМоль/л

Билирубин свободный мкМоль/л

Билирубин связанный мкМоль/л

I – Норма


30


2-е сут.


32,60±1,42


24,53±1,37



7,27±0,39

II – ГБН по АВО+ 5ПФ

30

1-е сут.

297,6±17,0***

286,4±16,24***

11,2±1,04**

30

3-е сут.

242,2±14,4***

230,9±14,38***

11,0±1,15**

30

5-е сут.

245,4±10,66***

231,0±9,83***

13,8±1,31***

30

7-е сут.

234,1±13,08***

224,3±11,95***

9,8±2,59

III – ГБН при

Rh+ 5ПФ

30

1-е сут.

312,6±11,67***

302,4±11,35***

10,2±2,47

30

3-е сут.

286,0±9,51***

273,9±8,90***

12,1±2,25*

30

5-е сут.

285,4±11,28***

271,3±9,94***

14,0±2,08***

30

7-е сут.

275,8±11,68***

262,1±11,20***

13,7±2,50*


Примечание: *) ** – р<0,01; *** – р<0,001 по отношению к норме.
Доказано, что детоксикационный эффект при поазмаферезе определяется количеством удаленной плазмы, содержащей токсические вещества, как правило крупно- и среднемолекулярные соединения. СБн – низкомолекулярное соединение, но, являясь главным лигандом для человеческого сывороточного альбумина (ЧСА), фиксируется гидрофобными связями его молекулы и образует глобулу, которая по своей молекулярной массе может быть выведен из крови путем ПФ (Чегер С.И., 1975).

Таким образом, наряду с позитивным действием, ПФ имеет и негативные последствия – удаления из циркуляции с каждым его сеансом некоторого количества плазменных белков. Убедительным подтверждением этому служат показатели ЧСА и его составляющих (рис.1). Так уже после первого сеанса ПФ ОКА снизилась (при АВО – на 11%, при Rh (+) – на 14,5%). Параллельно с этим уменьшилась и ЭКА, причем величина и последовательность убыли и при групповой несовместимости, и при резус-конфликте были аналогичными, что свидетельствует об идентичности элиминирующих свойств ПФ и их независимости от формы ГБН.

Известно, что ЧСА синтезируется в печени и является универсальным транспортным средством для многочисленных лигандов. По мере их присоединения, связывающая способность Al уменьшается. В условиях патологии эти функции могут быть существенно угнетены, что в значительной мере лимитирует элиминационные возможности ПФ в отношении билирубина. Считается, что Al утрачивает связывающую для лигандов способность при РСА менее 10 г/л (Н.М.Федоровский и др., 1998). Данное положение находит подтверждение в результатах наших исследований, согласно которым в сроки завершения 3-х ПФ у всех новорожденных с ГБН резерв связывания альбумина падал до 7,7±0,61 г/л и сохранялся на этом уровне на протяжении 4-го и 5-го сеансов ПФ.

Таким образом, проводя сеансы ПФ при ГБН и определяя РСА можно установить объем этого резерва, а следовательно и решить вопрос о целесообразности применения очередной процедуры плазмообмена.

Особенностью клинического течения изучаемых форм ГБН является реализация эритроцитолитических реакций на фоне первичного гипоксического поражения ЦНС.
1   2   3   4

Похожие:

Эффективность гипербарической оксигенации в комплексной терапии гемолитической болезни, сочетанной с гипоксическим поражением цнс новорожденных iconРеферат Тема: «Легионеллёз»
Легионеллёз – это группа заболеваний бактериальной этиологии, клинически проявляющаяся литоксикацией, респираторным синдромом, поражением...
Эффективность гипербарической оксигенации в комплексной терапии гемолитической болезни, сочетанной с гипоксическим поражением цнс новорожденных iconМетодические указания для обучающихся для специальности Педиатрия...
Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Красноярский государственный медицинский...
Эффективность гипербарической оксигенации в комплексной терапии гемолитической болезни, сочетанной с гипоксическим поражением цнс новорожденных iconПолигиповитаминоз (А,С,Е) новорожденных телят: этиология, гематологические...
Работа выполнена на кафедре диагностики болезней, терапии, акушерства и хирургии фгоу впо «Белгородская государственная сельскохозяйственная...
Эффективность гипербарической оксигенации в комплексной терапии гемолитической болезни, сочетанной с гипоксическим поражением цнс новорожденных iconПоложение об организации деятельности отделения реанимации и интенсивной...
Показатели внутриглазного давления новорождённого ребёнка, обусловленные морфологическими особенностями дренажной системы глаза в...
Эффективность гипербарической оксигенации в комплексной терапии гемолитической болезни, сочетанной с гипоксическим поражением цнс новорожденных iconПрограмма вступительных испытаний в аспирантуру по специальности...
Орит. Особенности ведения истории болезни в орит. Приоритеты в интенсивной терапии критического больного или травмированного. Принципы...
Эффективность гипербарической оксигенации в комплексной терапии гемолитической болезни, сочетанной с гипоксическим поражением цнс новорожденных iconРабочая учебная программа по дисциплине Хирургия новорожденных
Задачи изучения хирургии новорожденных на педиатрическом факультете заключаются в выработке у обучающихся умения
Эффективность гипербарической оксигенации в комплексной терапии гемолитической болезни, сочетанной с гипоксическим поражением цнс новорожденных iconВнутренние болезни
Преподаваемой на кафедре факультетской терапии с курсами эндокринологии и гематологии
Эффективность гипербарической оксигенации в комплексной терапии гемолитической болезни, сочетанной с гипоксическим поражением цнс новорожденных iconПримерная программа наименование дисциплины «Внутренние незаразные болезни»
Внутренние незаразные болезни состоит в том, чтобы дать сту­дентам теоретические и практические знания по общей профилактике и терапии,...
Эффективность гипербарической оксигенации в комплексной терапии гемолитической болезни, сочетанной с гипоксическим поражением цнс новорожденных icon«Внутренние болезни, общая физиотерапия, эндокринология»
Авторы-составители: Миролюбова О. А., профессор, д м н., зав кафедрой факультетской терапии
Эффективность гипербарической оксигенации в комплексной терапии гемолитической болезни, сочетанной с гипоксическим поражением цнс новорожденных iconЭффективность слезозаместительной терапии при нарушении базальной секреции слезы
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования
Эффективность гипербарической оксигенации в комплексной терапии гемолитической болезни, сочетанной с гипоксическим поражением цнс новорожденных iconМетодическая разработка к практическому занятию для студентов по...
Тема №2 «Экзантемы у новорожденных, детей грудного, младшего и старшего возраста. Дифференциальная диагностика аллергических и инфекционных...
Эффективность гипербарической оксигенации в комплексной терапии гемолитической болезни, сочетанной с гипоксическим поражением цнс новорожденных iconВнутрибольничная инфекция в родильных домах
Проблема инфекций у новорожденных включает такие аспекты, как иммунитет у новорожденных, особенности эпидемиологии инфекционных болезней...
Эффективность гипербарической оксигенации в комплексной терапии гемолитической болезни, сочетанной с гипоксическим поражением цнс новорожденных icon«Неотложная и отдаленная эффективность комбинированной терапии среднетяжелой...
Работа выполнена в гбоу впо первый Московский государственный медицинский университет имени И. М. Сеченова
Эффективность гипербарической оксигенации в комплексной терапии гемолитической болезни, сочетанной с гипоксическим поражением цнс новорожденных icon430005, Республика Мордовия, г. Саранск, ул. Большевистская, 68,...
Подсеваткин в. Г. и др. Опыт применения мексидолав комплексной терапии конверсионного расстройства. // Журнал Неврологии и Психиатрии,...
Эффективность гипербарической оксигенации в комплексной терапии гемолитической болезни, сочетанной с гипоксическим поражением цнс новорожденных icon«Реваскуляризация миокарда при ишемической болезни сердца: методы,...
Цикл общего усовершенствования «Новые технологии диагностики и лечения терапевтических больных»
Эффективность гипербарической оксигенации в комплексной терапии гемолитической болезни, сочетанной с гипоксическим поражением цнс новорожденных iconКандидозный стоматит у новорожденных. Новые подходы к лечению
Г. А. Самсыгина, 1996г.). Наиболее часто у детей раннего возраста, в том числе и новорожденных диагностируется поверхностный кандидоз...


Школьные материалы


При копировании материала укажите ссылку © 2013
контакты
100-bal.ru
Поиск