Скачать 159.04 Kb.
|
УДК 637.146 Исследование свойств молочного белка с целью формирования белковых имитаторов жира И.А. Смирнова – доктор технических наук, профессор, В.К. Штригуль – соискатель, Д.А. Смирнов - аспирант ФГБОУ ВПО «Кемеровский технологический институт пищевой промышленности», г. Кемерово Наиболее отчетливо в последние годы проявился дефицит белка, а вместе с ним незаменимых аминокислот. Существует и другая сторона дефицита потребления протеинов: острая ограниченность ресурсов пищевого белка, особенно животного происхождения. Так, например, потребности человечества в молочном белке во много раз превосходят не только действительные объемы переработки молока, но и то количество, которое потенциально способно дать мировое молочное животноводство. Наряду с данной проблемой, всё острее встает вопрос избыточного потребления животных насыщенных жиров, что уже привело к широкому распространению алиментарных заболеваний, в том числе, развивающихся на фоне избыточной массы тела и ожирения – в первую очередь различным нарушениям сердечно-сосудистой деятельности [1]. Снижение калорийности молочных продуктов на 25-50 % (за счет исключения из их состава молочного жира) дает значительный вклад в профилактику ожирения и других алиментарных болезней. При этом все остальные компоненты (белок, витамины, минеральные вещества и микроэлементы) в низкокалорийных молочных продуктах должны быть сохранены. А, следовательно, сохранена, пищевая ценность этих продуктов и их польза для здоровья. Развитые страны мира давно перешли на преимущественное производство низкокалорийных молочных продуктов, которые составляют свыше 90 % от всей продукции. Современным подходом к снижению калорийности продуктов является использование белковых имитаторов жира. Для создания имитатора жира высокого качества необходимо, чтобы размеры его частиц были в интервале 0,5-2,0 мкм и имели сферическую или близкую к ней форму, именно в этих пределах микрочастицы придают продукту «маслянистую» консистенцию [2]. Критериями выбора белка для формирования имитаторов жира являются физико-химические характеристики, биологическая ценность и стоимость. Наиболее важными физико-химическими характеристиками белка являются: растворимость, вязкость, эмульсионные свойства и диспергируемость. В представленной работе мы подробнее рассмотрим основной белок молока - казеин. Казеин является главным белком молока, его содержание колеблется от 2,3 до 2,9%. Элементарный состав казеина (в %) следующий: углерод 53,1; водород 7,1; азот 15,6; кислород 22,6; сера 0,8; фосфор 0,8. Аминокислотный состав казеина представлен в таблице 1. Таблица 1 - Аминокислотный состав белков [4]
Казеин в молоке содержится в виде мономеров (так называемый растворимый казеин) и в форме полимеров (субмицеллерный и мицеллерный казеин). Мицеллы казеина обладают свойствами гидрофильного золя, который при определенных условиях может перейти в гель. Только под действием сычужного фермента золь казеина переходит в гель необратимо, т. е. казеин проявляет свойства, присущие гидрофобным коллоидам (рис. 1). Рисунок 1 – Реоморфная структура мицелл казеина [4] Мицеллы казеина имеют почти сферическую форму, средний диаметр от 40 до 300 нм, молекулярная масса от 26·107 до 5·109. Они состоят из нескольких сотен субмицелл диаметром 10-15 нм и молекулярной массой 250.000-300.000. Субмицеллы представляют собой агрегат из 10-12 субединиц — основных фракций казеина (таблица 2), соединенных между собой гидрофобными, электростатическими и водородными связями и кальциевыми мостиками. Соотношения между фракциями могут быть различными (3:2:1; 2:2:1). Полипентидные цепи фракций казеина свертываются в субмицелле таким образом, что большинство гидрофобных групп составляют основное ядро, а гидрофильные располагаются на поверхности субмицелл. Гидрофильная часть (оболочка) мицеллы содержит отрицательно заряженные кислотные группы глютаминовой, аспарагиновой и фосфорной кислот. Усиливают гидрофильные свойства субмицелл и мицелл, ориентированные наружу гликомакропептиды казеина, которые располагаются на поверхности субмицелл. Известно, что пептидная часть гликомакропептидов содержит большое количество оксиаминокислот (серина и треонина), глютаминовой и аспарагиновой кислот, а углеводная — свободные карбоксильные группы сиаловой кислоты. Таблица 2 - Основные характеристики белков молока [4]
s1-казеин – основная фракция s-казеинов. Молекулы s1-казеина состоят из простой номенклатурной цепи, содержащей 199 аминокислотных остатков, не содержит цистеин. s2-казеин – фракция s-казеинов. Молекулы s2-казеина состоят из простой полипептидной цепи, содержащей 207 аминокислотных остатков, содержит два остатка цистеина. -казеин, молекулы его состоят из простой полипептидной цепи, содержат 209 аминокислотных остатков, 4 остатков фосфорной кислоты, не имеет в своем составе цистеина. Эта фракция наиболее гидрофобная благодаря высокому содержанию пролина. Группа -казеинов являются фрагментами -казеина, образовавшиеся путем протеолиза -казеина ферментами молока. х-Казеин является фосфогликопротеидом, так как в своем составе содержит углеводы (трисахарид, состоящий из галактозамина, галактозы и сиаловой кислоты). Углеводная часть присоединена к определенному участку полипептидной цепи, который носит название макропептида, или гликомакропептида. Гликомакропептиды молекул х-казеина имеют молекулярную массу 6000–8000, обладают сильными гидрофильными свойствами и высоким отрицаиельным зарядом. х-Казеин не осаждается ионами кальция и в казеиновой мицелле, располагаясь на поверхности, выполняет защитную роль по отношению к чувствительным as- и β-казеину. Под действием сычужного фермента молекула х-казеина распадается на две части: пара-х-казеин и макропептид. При этом х-казеин теряет свои защитные свойства и фракции казеина коагулируют (у-казеин под действием сычужного фермента не коагулирует и остается в сыворотке) [3]. Соединения субмицелл в устойчивые мицеллы происходит с помощью гидрофильного коллоидного фосфата кальция, и возможно за счет цитрата кальция и гидрофобных взаимодействий. Схематично это представлено на рисунке 2 Рисунок 2 - Субмицеллярная модель мицеллы казеина Казеин принадлежит к фосфоропротеидам – в своем составе содержит Н3РО4 (органический фосфор), присоединенную моноэфирной связью к остаткам серина. Состав коллоидного фосфата кальция, присутствующий в частицах казеина и характер его связи до сих пор неизвестны. Это могут быть гидрофосфат или фосфат кальция, их смесь, а также кальций фосфатцитратный комплекс и другое. Фосфор коллоидного фосфата кальция в отличие от фосфора органического, входящего в состав казеина, называют неорганическим. Фосфат кальция, по-видимому, может взаимодействовать с серинофосфатными группами казеина соединяя его молекулы между собой наподобие кальциевых мостиков [3]. Выяснено, что удаление коллоидного фосфата кальция из молока вызывает нарушение структуру мицеллы, что сопровождается увеличением в молоке свободных казеинов, которые чувствительны к ионам кальция. Пористая структура мицелл позволяет проникать Н2О, ферментам внутрь мицелл. Мицеллерный казеин сильно гидратирован – содержит 2-3,7 г и более воды на 1 г белка, и поэтому вода не только окружает мицеллу казеина в виде гидратной оболочки, но и заполняет большую часть ее объема, т. е. иммобилизуется мицеллой. Способность казеина связывать воду характеризует его гидрофильные свойства. От гидрофильных свойств казеина зависит устойчивость казеиновых мицелл в молоке. Сильными гидрофильными свойствами обладают гликомакропептиды х-казеина казеиновых мицелл. Поэтому при их отщеплении под действием сычужного фермента (или высоких температур) нарушается гидратная оболочка и уменьшается стабильность казеиновых частиц. Гидрофильные свойства казеина зависят от структуры, величины заряда белковой молекулы, рН среды, концентрации солей и других факторов. Они имеют большое практическое значение. Устойчивость и коагуляция коллоидных растворов зависит от соотношения молекулярных сил, притяжения и электростатических сил отталкивает между коллоидными частицами. В свежем молоке последние силы превалируют над силами молекул притяжения, и коллоидная система находится в устойчивом состоянии. И для того, чтобы вызвать соединение и коагуляцию мицелл казеина, необходимо снизить отрицательный заряд, т. е. перевести мицеллы в изоэлектрическое состояние, или близкое к нему, и разрушить гидратные оболочки. Коагуляция – это хлопьеобразование, оно происходит в результате дестабилизации коллоидных частиц в изоэлектрической точке, когда снижается количество поверхностных зарядов и снижается потенциал отталкивания, и гидратная оболочка ослабевает [3]. Устойчивость коллоидных частиц казеина в молоке обусловлена электрическим зарядом и гидрофильностью. Казеиновые мицеллы на своей поверхности имеют положительно и отрицательно заряженные группы. Положительные заряды несут аминные группы основных аминокислот (лизина, аргинина), отрицательные - карбоксильные группы кислых аминокислот (глутаминовой и аспарагиновой) и гидроксильные группы остатков фосфорной кислоты. Суммарный электрический заряд казеиновых мицелл отрицательный. Между заряженными коллоидными частицами действуют силы взаимного притяжения и отталкивания. Устойчивость коллоидной системы зависит от соотношения этих сил. Если между частицами преобладают силы отталкивания, система в целом устойчива. При ослабевании сил отталкивания и усилении сил притяжения устойчивость системы нарушается. Коллоидные частицы при сближении слипаются, агрегируют (укрупняются) и коагулируют. Минимальные силы отталкивания наблюдаются у белков в изоэлектрическом состоянии (или близком к нему). В свежем молоке силы отталкивания между казеиновыми мицеллами превалируют над силами притяжения и коллоидная система молока находится в устойчивом состоянии. Коагуляцию белков (с разрушением коллоидной системы молока) можно вызвать различными способами, но любой из них должен сопровождаться снижением отрицательного заряда казеина и переводом его в изоэлектрическое состояние. Дополнительное дестабилизирующее действие на казеин оказывают факторы, уменьшающие степень его гидратации [3]. Глобулярные белки, как правило, за счет преобладания в них остатков кислых аминокислот приобретают в растворах избыток отрицательных зарядов. Только при определенном рН наблюдается равенство отрицательных и положительных зарядов, т. е. электрический заряд белков в целом будет равен нулю. При этих условиях белок находится в изоэлектрической состоянии и белковая молекула не перемещается в электрическом поле. Величина рН раствора, при которой белок находится в изоэлектрической состоянии, называется изоэлектрической точкой. Изоэлектрическая точка большинства глобулярных белков находится в слабокислой среде (рН 4,5—6,5). В изоэлектрической точке силы электрического отталкивания между белковыми глобулами минимальные. Это приводит к тому, что белки в изоэлектрической точке легко агрегируют (укрупняются) и коагулируют. При рН ниже изоэлектрической точки наступает перезарядка белковых частиц — они приобретают противоположный заряд и вновь становятся устойчивыми в растворе. Все процессы денатурации казеина, кроме высаливания считаются необратимыми, но это верно только в том случае, если под обратимостью процессов понимается восстановление нативных третичной и вторичной структур белков молока. Сычужное свертывание в любом случае представляет собой необратимую денатурацию, так как при этом расщепляются главные валентные связи. На практике коагуляцию казеина осуществляют снижая Рh молока, добавляя кислоты (кислотная коагуляция), внося хлорид кальция (термокальциевая коагуляция), сычужный фермент (сычужная коагуляция). Согласно проведённому анализу и исследованию было установлено, что наиболее рациональным способом коагуляции для формирования частиц требуемых размеров и форм является сычужная коагуляция. Для формирования частиц требуемых размеров и форм предлагается остановка коагуляции в тот момент, когда белковые частицы уже увеличились в размере, но ещё не сформировали сгусток. При этом необходимо, чтобы образовалась устойчивая система. На рисунке 3 представлена схема процесса сычужной коагуляции и её прерывания. Рисунок 3 - Схема процесса сычужной коагуляции казеина и её прерывания Средний размер нативных мицелл казеина около 40-300 нм. При создании оптимальных условий под действием сычужного фермента (температуры, солей Са, рН) происходит отщепление гликомакропептида с поверхности мицелл и формирование гидрофобных участков. В результате чего мицеллы начинают слипаться. Для прерывания процесса использовали нейтрализацию среды до рН 7,00 путём внесения щелочных растворов, разрешённых в пищевой промышленности. В результате происходило замедление действия молокосвёртывающего фермента. После жёсткой термической обработки (96°С) окончательно инактивируется фермент и на поверхности сформированных микропартикулятов осаждаются денатурированные сывороточные белки, придающие микрочастице устойчивость к седиментации и слипанию за счёт повышения отрицательного заряда на поверхности частиц. Таким образом, получаются частицы нужного размера. Литература:
Реферат УДК 637.146 Исследование свойств молочного белка с целью формирования белковых имитаторов жира И.А. Смирнова – доктор технических наук, профессор, В.К. Штригуль – соискатель, Д.А. Смирнов - аспирант ФГБОУ ВПО «Кемеровский технологический институт пищевой промышленности», г. Кемерово В предложенной работе проведен обобщающий анализ основного белка молока – казеина, представлен его химический и аминокислотный составы, показана реоморфная структура и субмицеллярная модель мицеллы казеина, позволяющие объяснить процесс сычужной коагуляции казеин и показать возможности его прерывания. Прерывание процесса коагуляции казеина позволит сформировать частицы требуемых размеров и форм. |
Министерство Российской Федерации по делам гражданской обороны, чрезвычайным... Ран; Милованов В. И. — доктор исторических наук; Мистюков Н. А.; Молодых И. И. — доктор геолого-минералогических наук, профессор;... | Внеклассная работа как средство повышения компетентности учащихся. Монография Рецензенты: доктор технических наук, профессор Копыльцов А. В.(зав кафедрой информатики ргпу им. А. И. Герцена), доктор педагогических... | ||
«утверждено» Проректор по высшему профессиональному образованию,... Ректор Московской Академии рынка труда и информационных технологий, доктор технических наук профессор, Заслуженный деятель науки... | Программа по предмету «История и культура Башкортостана» Составители: Доктор филологических наук, профессор С. А. Галин, кандидат филологических наук, доцент Г. С. Галина, доктор филологических... | ||
Темы рефератов по истории технических, социологических и экономических... Автор: Васильева В. Н., доктор социологических наук, доцент, проф кафедры «Социальных наук» | Мероприятия ... | ||
Учебное пособие содержит: тексты из оригинальной литературы, посвященные... Соколов С. В., доктор технических наук, профессор, действительный член Академии образования и Академии Военных наук | Учебное пособие содержит: тексты из оригинальной литературы, посвященные... Соколов С. В., доктор технических наук, профессор, действительный член Академии образования и Академии Военных наук | ||
Программа обязательного междисциплинарного учебного курса для специальности «Юриспруденция» Авторы: доктор юридических наук, профессор И. Ю. Богдановская, доктор юридических наук, профессор Л. Р. Сюкияйенен | «История политических и правовых учений» для студентов специальности 030501 «Юриспруденция» Марченко М. Н, доктор юридических наук, профессор; Кожевников С. Н. доктор юридических наук, профессор | ||
Учебно-методический комплекс Для студентов, обучающихся по специальности... Рецензенты: Морозов В. Ю., доктор экономических наук, Профессор, Николаев О. В., доктор экономических наук, профессор | Темы курсовых работ по дисциплине: «теория государства и права» Марченко М. Н, доктор юридических наук, профессор; Кожевников С. Н. доктор юридических наук, профессор | ||
Вопросы к вступительным испытаниям по Теории и истории государства и права Марченко М. Н, доктор юридических наук, профессор; Кожевников С. Н. доктор юридических наук, профессор | Методические рекомендации по курсу историография истории россии для... Рецензенты: доктор исторических наук, профессор Н. М. Ушаков, доктор исторических наук, профессор Е. Г. Тимофеева | ||
Пояснительная записка Курс имеет целью познакомить студентов с концепцией... Рецензенты: Вагинова Л. С., доктор культурологии, профессор кафедры Кимктяиж мггу; Ворожбитова А. А., доктор филологических наук,... | Республики Беларусь «24» В. В. Баранов – профессор кафедры электронной техники и технологий Белорусского государственного университета информатики и радиоэлектроники,... |