Научно – производственное объединение «пульс»
Скачать 1.69 Mb.
|
НАУЧНО – ПРОИЗВОДСТВЕННОЕ ОБЪЕДИНЕНИЕ «ПУЛЬС»НА ПРАВАХ РУКОПИСИБабина Елена ИвановнаРазработка основных биотехнологических процессов производства и системы управления качеством липидных косметических препаратов (на примере тоников для проблемной кожи) 03.00.23 – биотехнология ДИССЕРТАЦИЯна соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: Кузякова Л.М. доктор фармацевтических наук, профессор Ставрополь – 2004СОДЕРЖАНИЕ
ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ БАВ - биологически активные вещества ЖЭ - жировая эмульсия ЖК - жирные кислоты ФК - фитокомпозиция ФЛВ - фосфолипидные везикулы КМАФАнМ - количество мезофильных анаэробных и факультативно- анаэробных микробов ЛРС - лекарственное растительное сырье МИК - минимальная ингибирующая концентрация НД - нормативная документация ОБТК - отдел биологического и технического контроля ОЛ - общие липиды ПОЛ - перекисное окисление липидов ПНЖК - жирные полиненасыщенные кислоты СМК - система менеджмента качества ТБ - техника безопасности ТСХ - тонкослойная хроматография ЦД - циклодекстрины ВВЕДЕНИЕ Актуальность исследования. В последнее время во многих исследовательских центрах развернут широкий фронт работ фундаментального и прикладного характера, направленный на всестороннее изучение обширной группы природных биологически активных соединений, объединяемых общим классификационным названием «липиды». Современные представления, основанные на результатах глубоких структурно-функциональных исследованиях (Швец В.И., 2001, Ефременко В.И., 2003), отводят липидам и их над молекулярным клеточным образованием – биологическим мембранам – важнейшую роль в функционировании основных биохимических механизмов в коже. Данные механизмы определяют и регулируют физическое состояние клетки, ее взаимодействие, как с соседними клетками, так и с факторами окружающей внешней среды (Бергельсон Л.Д., 1987). Возрастающие потребности фармацевтической и косметической отраслей промышленности делают актуальной задачу подбора доступных сырьевых ресурсов и разработку оптимальных биотехнологических процессов производства природных липидных препаратов для ухода за кожей лица. Препараты природного происхождения отличаются от синтезированных химических соединений совершенной формулой, включающей оптимальное соотношение микро- и макроэлементов, витаминов и незаменимых жирных кислот. В течение всей своей жизни человек активно пользуется тем или иным видом парфюмерно-косметической продукции (мыло, шампунь, зубные пасты, кремы и т.д.). В связи с возможностью проникновения данных средств через кожный барьер и слизистую оболочку с последующим влиянием на отдельные органы человека, разработка методов стандартизации и сертификации, обеспечивающие безопасность данной продукции, приобретают особое значение. За последние 4 года в России было забраковано 12% косметической продукции, представленной в органы стандартизации и сертификации (Вилкова С.А., 2003). Особенно тревожит тот факт, что токсичными свойствами обладали 13,6% продукции, а 22,7% их средств имели микробиологическую загрязненность, то есть напрямую угрожали здоровью потребителей. Одновременно качество продукции является результатом рыночной политики самого предприятия и залогом успешных продаж производимого им товара. Наличие сертификата системы менеджмента качества, отвечающих требованиям ИСО 9000 - это гарантия безопасности здоровья населения и прямые конкурентные преимущества предприятия - производителя на рынке. Цель и задачи исследования. Целью данного исследования является разработка биотехнологических процессов конструирования липидных тоников для ухода за воспаленной кожей и системы управления качеством их производства. Для достижения поставленной цели следовало решить следующие задачи: 1.На основе биомоделирования разработать рецептуру липидных тоников для ухода за кожей в домашних и профессиональных условиях;
Научная новизна. Разработаны рецептуры тоников для ухода за проблемной кожей лица в домашних и профессиональных условиях. С помощью биологической модели Staphylococcus aureus доказана целесообразность введения в рецептуру противовоспалительной композиции, содержащей следующее соотношение лекарственного растительного сырья: по 4 части шалфея и календулы и по 1 части ромашки, крапивы и зверобоя. Дополнительно в состав тоников введена родниковая слабоминерализованная вода, содержащая макро- и микроэлементы, участвующие в ранозаживляющих и регенерационных процессах кожного покрова. Разработаны основные биотехнологические процессы конструирования липидных тоников для очищения проблемной кожи. Определены параметры технологических операций. Оригинальность разработок доказывают положительные решения о выдаче двух патентов на изобретение РФ (№2003104254\15 от 27.04.2004 и №2003104255\15 от 19.05.2004). Разработана система комплексного мониторинга и подобраны методы контроля качества на всех этапах технологического процесса, а также впервые предложены для определения качества сырья, полупродуктов и готовой продукции методы, отсутствующие в нормативной документации на косметические средства. Так, доказана необходимость проверки жирно-кислотного состава растительных масел в процессе выбора эффективного сырья для производства липидных препаратов. Срок хранения липидных препаратов предложено определять с помощью микробиологического анализа, показателей перекисного числа и органолептических свойств. Впервые для производства липидных косметических препаратов составлены Положение и алгоритм управления качеством, позволяющие оптимизировать научно-методические основы мониторинга косметической продукции в соответствии с требованиями международного стандарта ИСО 9000. Внедрение данной системы в производство имеет социальный и экономический аспекты, так как обеспечивает выпуск безопасной высококачественной продукции и увеличивает конкурентоспособность предприятия. Практическая значимость и результаты внедрения. Работа выполнялась по заказу НПО «Пульс», которое производит липидные косметические препараты. Тоники прошли производственную апробацию, имеют санитарно-эпидемиологическое заключение и сертификат соответствия и в настоящем времени выпускаются в промышленном объеме (акт от 19.05.2004). Результаты экспериментальных исследований комплексного использования для воспаленной кожи тоников и липосомального крема внедрены в работу Центра красоты и здоровья «Альпика» г. Ставрополя (акты №№ 7,8 от 25.03.2004). Испытание эффективности применения тоника серии «Profi Line» совместно с кремом для проблемной кожи проводил врач-дерматолог поликлиники № 9 в г. Ставрополе и подтвердил усиление планируемого терапевтического эффекта. Разработаны и утверждены НД на липосомальные тоники для проблемной кожи, в т.ч. опытно-промышленный регламент (№05 от 2004 г.), ТУ 9152-018-10280704-04, Положение по управлению качеством производства трансдермальных липидных косметических препаратов (акт от 27.05.04). Данные документы внедрены в работу НПО «Пульс» (акт от 17.04.04). Разработана и внедрена в учебный процесс кафедры анатомии, физиологии и гигиены человека Ставропольского Госуниверситета программа учебной практики по дисциплине специализации «Физиология человека и животных". Основные положения, выносимые на защиту. 1. Результаты использования Staphylococcus aureus в качестве биологической модели для определения эффективности действия лекарственных трав позволяют разработать рецептуру препарата с заданными свойствами. 2. Результаты введение в состав тоников для проблемной кожи фитокомпозиции и родниковой воды, богатой макро- и микроэлементами, позволяют повысить их биологическую активность. 3. Тоники для ухода за проблемной кожей лица в косметологических кабинетах содержат повышенное количество биологически активных веществ. 4. Комплексное использование липидных тоников и липосомальных кремов повышают противовоспалительное и ранозаживляющее действие препаратов. 5. Итоги внедрение системы управления качеством на производстве имеют важный социальный и экономический аспекты, так как увеличивают выпуск безопасной высококачественной продукции и повышают конкурентоспособность предприятия.
Апробация работы и публикации. Основные положения диссертации доложены на Международной научно-практической конференции «Биоресурсы, биотехнологии, инновации юга России» (Пятигорск, 2003); IV Международной научно-практической конференции «Здоровье и образование в ХХI веке» (Москва, 2003); 58-й и 59-й Межрегиональных конференциях по фармации и фармакологии «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск, 2003, 2004); Международной конференции «Современные достижения фундаментальных наук в решении актуальных проблем медицины» (Астрахань, 2004); Межрегиональной конференции «Здоровый город: план действий сегодня. Партнерство бизнеса, личности и власти» (Ставрополь, 2004). Материалы диссертационной работы представлены в 8 публикациях. Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, глав обзора литературы, методов и материалов исследования, двух глав собственных исследований, заключения, общих выводов, списка использованной литературы. Общий объем диссертации – 144 машинописных страниц. Список литературы включает 133 наименования, в том числе 61 источник иностранных авторов. Работа содержит 19 таблиц и 19 рисунков.ГЛАВа 1. Современное состояние и ТЕНДЕНЦИИ РАЗВИТИЯ БИОТЕХНОЛОГИИ И МЕТОДОВ СТАНДАРТИЗАЦИИ ЛИПИДНЫХ КОСМЕТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ПРОБЛЕМНОЙ КОЖИ (обзор литературы) 1.1. Роль липидных косметических препаратов для ухода за проблемным типом кожи Кожа (cutis) образует внешний покров организма, площадь которого у взрослого человека достигает до 2 м2. Из производных кожи у человека имеются сальные и потовые железы, волосы и ногти. В коже человека выделяют эпидермис, дерму и подкожно-жировую клетчатку (гиподерму). В свою очередь эпидермис состоит из пяти слоев: базального, шиповатого, зернистого, блестящего и рогового (Чернух А.М., 1982). Каждый из вышеперечисленных элементов кожи играет свою роль в организме. Так, в базальном слое (stratum bazale) располагаются клетки, способные вырабатывать меланин – меланоциты. Присутствие в клетках зернистого слоя (stratum grantlosum) комплекса кератогиалина с тонофибриллами указывает на то, что в них начинаются процессы ороговения, так как кератогиалин является предшественником рогового вещества – кератина. Другой предшественник кератина – эледин, располагается в блестящем слое (stratum lucidum). Роговой слой (stratum corneum) обладает большой упругостью и плохой теплопроводимостью. Он содержит кератин (белок, содержащий до 5 % серы), который устойчив к действию кислот и щелочей. Нейтральные жиры составляют основную массу подкожно-жировой клетчатки. Клетчатка содержит до 70 % триоленов, являющихся легкоплавкими триглицеридами. Другие липиды (стерины, стероиды, фосфолипиды) содержатся в клетках эпидермиса и соединительной ткани, в стенках сосудов и в секрете сальных желез (Калантаевская К.А., 1972). Роль липидов в коже складывается из трех составляющих: формирование эпидермального барьера, участие в метаболизме биологически активных молекул и повышение проницаемости рогового слоя для других активных компонентов (Hexsel D.M., 2000). При нанесении на кожу, липиды жиров и масел восстанавливаются в межклеточные липидные пласты, меняя их свойства. Если в масляной фазе преобладают ненасыщенные липиды, то липидная прослойка между корнеоцитами становится подвижной и лучше пропускает водорастворимые вещества (Кучеренко Н.Е., 1985). Нарушение липидного обмена является причиной ряда воспалительных заболеваний, большинство из которых являются болезнями накопления, так как в результате недостаточности определенного фермента, участвующего в обмене липидов, в клетках обнаруживают аномально большие количества нерасщепленного субстрата соответствующего фермента. К таким заболеваниям относят фурункулез, пиодермию, себорею, а также угревую сыпь. Фурункулез – хроническая рецидивирующая стафилодермия, характеризуется появлением фурункулов. При этом наблюдается острое гнойно-некротическое воспаление волосяного фолликула и окружающей соединительной ткани. Этот процесс сопровождается изменением рН кожи в щелочную сторону и уменьшением ее самостерилизующих свойств. Фурункулез обусловлен внедрением в организм патогенных микроорганизмов, чаще всего стафилококков ( Aekermann, H.-W., 1987). Пиодермия – группа острых и хронических воспалительных процессов, вызываемых стафилококками, стрептококками, реже синегнойной и кишечной палочками. Недостаток в коже витамина А играет определенную роль в развитии себореи – нарушении функции сальных желез. В основе заболевания лежит дисфункция в системе гипофиз – половые железы. Переутомление, стресс, органические заболевания способствуют патологическому процессу (Бутова О.А., Кузякова Л.М., Андреева И.Н., 2003). Угревая сыпь наносит значительный ущерб внешности, хотя и не представляет опасности для жизни людей и не влияет на их работоспособность. Угри обыкновенные – эта распространенное заболевание кожи, которое поражает людей обычно в пору полового созревания. Кроме обыкновенных существует много разновидностей угрей, однако патогенез и основные принципы лечения их схожи (Марголина, 2003). В патогенезе угревой сыпи участвуют: гиперкератоз протоков сальной железы, закупорка их отмершими клетками и кожным салом, повышение секреции кожного сала в ответ на андрогенную стимуляцию, колонизация сальной железы бактериями Propionibacterium acnes, а затем и другими микроорганизмами (Allenby, A.C , 1969, Aekermann, H.-W, 1987 ). Основной причиной патогенеза угревой сыпи является избыточная секреция сальных желез (Blank, I. H., 1964, Spruit D., 1966, Spruit D., 1969). Существуют две основные причины повышенной жирности кожи: генетическая предрасположенность (наличие на коже большого количества крупных сальных желез, активно секретирующих кожное сало) и гормональные факторы (андрогены стимулируют секрецию кожного сала, влияют на деление клеток сальных желез) ( (Shaw J. C., 2002). Одним из популярных методов при лечении акне - использование антибиотиков, влияющих на штаммы микроорганизмов, находящихся на коже. Однако, в 1998 году A. J. Cooper сделал вывод о связи между неудачами в лечении акне и колонизацией на коже антибиотико-устойчивых бактерий. Общий процент случаев устойчивости к антибиотикам возрос с 20 % в 1978 году до 62 % в 1996 году. Чаще всего устойчивость отмечалась к эритромицину, тетрациклину, доксициклину ( Марголина А., 2003). Исследования, проведенные английскими учеными в городе Лидсе (Coates P., Vyakrnam S., Eady E. A.,2002), позволили установить, что количество пациентов, имеющих устойчивые штаммы бактерий к одному или более антибиотикам, используемым при лечении угревой сыпи, возросло от 34, 5 % в 1991 году, до 55,5 % в 1997 году, затем оно упало до 50 % в 1998 году и снова возросло до 55,5 % в 2000 году. Колонизация антибиотико-устойчивых бактерий на коже сейчас встречается горазда чаще, чем 10 лет назад, что сильно усложняет антибиотикотерапию при акне, а также заставляет применять альтернативные средства при лечении угрей. Установлено, что при акне необходимо максимально щадящее очищение. Вместо агрессивных очищающих составов и спиртовых растворов лучше применять специальные мягкие очищающие средства, которые не повреждают кожу, а также тоники с низким содержанием спирта и антисептическими растительными экстрактами (Корсун В.Ф., 1995). Практически все средства, применение которых при воспалительных процессах обосновано патогенетически, а эффективность подтверждена клиническими исследованиями, в той или иной степени раздражают кожу. Это связано с тем, что помимо удаления кожного сала, в них растворяется и часть эпидермальных липидов (Shaw, J.C, 2002). Так, например, салициловая кислота, которая является одной из наиболее часто применяемых активных добавок в препараты, применяемые для борьбы с акне, обладает отшелушивающим и противовоспалительным эффектом. Но, подобно всем средствам от угрей, она раздражает и сушит кожу (Gibson J. R, 1996). В настоящее время достаточно широко применяется средство для профилактики угревой сыпи, которое в качестве активного начала включает спиртовой экстракт пресноводной губки бодяги. Недостатком данного косметического средства является усиленная эксфолиация ороговевших клеток эпителия, которая в некоторых случаях может катализировать воспалительные процессы. Отмечено также отсутствие регенерирующего и витаминизирующего воздействия на кожу. Существует биологически активная добавка для косметических изделий, представляющая собой липидный комплекс, полученный путем спиртовой экстракции сенны и содержащая углеводы, стеарины, каротиноиды, производные хлорофилла, белки, токоферол, жирные кислоты, минеральные вещества. ( Пат.РФ №2053763, А61 К7/48). Добавка включается в различные косметические средства, например, в лосьоны для ухода за кожей лица и оказывает активное биологическое воздействие на липидный обмен. Косметологи отмечают, что из-за высокого содержания спирта данный препарат вызывает чувство жжения и аллергическую реакцию. В разработке тоников для проблемной кожи компании «Academie» (Франция) применяют такие растительные экстракты как ромашка, календула, береза, чистотел, крапива, зверобой и т.д., а также некоторые эфирные масла. Растительные экстракты действуют не так быстро и эффективно как антибиотики, но они более безопасны, и ими можно пользоваться длительное время, к тому же, они содержат помимо липидного комплекса, витамины, природные антиоксиданты и многие другие биологически активные вещества, полезные для кожи. ( Mantle D., 2002). Научно-исследовательский центр Швейцарской фирмы Mila d , Opiz включил в состав многих средств профессиональной косметики для проблемной кожи экстракты растительных трав. Известные французские косметические компании, такие как «Кристиан Диор» и «Л, Ореаль», использовали для технологии производства тоников для очистки проблемной кожи спиртовые экстракты фитосборов. В ходе изучения литературных данных (Гончарова Т.П., 1998) установлено, что каротиноиды и флавоноиды, обладают антиоксидантными свойствами, ингибируя избыточное количество перекисных соединений, которые разрушают мембраны клеток кожи. Кроме того, каротиноиды и флавоноиды обладают противовоспалительным, капилляроукрепляющим действием, регулируют жировой, минеральный и водный обмены, процессы регенерации эпидермиса, обладают бактерицидными и фунгицидными свойствами (Петрухина А. Т., 2003 ). Органические кислоты (муравьиная, аскорбиновая, яблочная, щавелевая и другие) способствуют очищению пор кожи, обуславливая лучшее усвоение питательных и лечебных соединений (Burch, G.E., 1946, Tregear R.T., 1966 Igarashi O., 1991). Сапонины, стероиды и алкалоиды оказывают тонизирующее действие, повышая функциональную активность нервных окончаний, способствуя более быстрому обновлению кожных тканей (Корсун В.Ф., 1995). В настоящее время, в связи с разработкой и активным внедрением в экспериментальную медицину биофизических и биохимических методов исследования, произошли значительные изменения во взглядах на кожный барьер. Усовершенствование техники экспериментальной микроскопии позволило не только определить точный состав липидов рогового слоя, но и «увидеть» их. Сформулированы основные понятия современной теории эпидермального барьера (Э. Эрнанденс, 2001): - основной барьерной структурой эпидермиса, от которой зависит его проницаемость, является роговой слой; -имеется два основных пути проникновения веществ через кожу – трансэпидермальный (через роговой слой) и трансфолликулярный (через сальные железы и волосяные фолликулы, связанные с сальными железами); -межклеточные промежутки рогового слоя заполнены липидами (именно этим объясняется факт прохождения через роговой слой жирорастворимых веществ); - липиды рогового слоя организованы и формируют двухслойные пласты; - на барьерную функцию эпидермиса влияет не только расположение липидов, но и их количественный и качественный состав. Абсорбция веществ, нанесенных на кожу – процесс пассивный, и во многом определяется физико-химическими свойствами самого вещества (Arct, 2001), такими как :липофильность, размер молекулы (частица, размером более чем 3 кДа не проходит через роговой слой), заряд (роговой слой неполярен, поэтому заряженным веществам через него трудно проходить), связывание со структурными компонентами кожи. Кроме того, на пенетрацию могут влиять и такие внешние факторы как толщина рогового слоя, возраст, кровоснабжение, метаболизм, температура, время контакта, климат. Важную роль играет основа, в которой находится вещество (ее физико-химические свойства, поверхностная активность, рН). В косметической рецептуре биологически активные вещества комбинируются с различными соединениями, которые придают продукту определенные свойства и могут влиять на поведение активных компонентов в коже.
Поиск и создание новых классов косметических средств с улучшенными фармакологическими свойствами составляют одно из актуальных направлений медико-биологической науки. В последнее время во многих исследовательских центрах развернут широкий фронт работ фундаментального и поискового характера, направленный на всестороннее изучение обширной группы природных биологически активных соединений, объединяемых общим классификационным названием «липиды». 1.2.1. Проблемы и перспективы использования липидов в производстве косметических и медицинских препаратов Отдельные типы природных липидных веществ, их биологически активные молекулярные фрагменты и модифицированные синтетические аналоги привлекают большое внимание исследователей как перспективный источник для конструирования лекарственных и диагностических препаратов нового поколения (Элькина Б.И., 1986). Среди огромного множества природных липидов наиболее биологически значимыми являются фосфо- и гликофосфолипиды (Bangham, A.D., 1964). Фосфолипиды, хотя и в относительно небольших количествах, повсеместно распространены в клетках органов и тканей всех типов живых организмов, причем повышенные концентрации этих природных веществ наблюдаются в таких важных органах, как головной и спинной мозг, сердечная мышца, печень, легкие и др. (Petkau A. , 1967). В мембранах имеются фосфолипиды двух типов - глицерофосфолипиды и сфингофосфолипиды (Николаев А.Я., 2001). Глицерофосфолипиды являются производными фосфатидной кислоты (диацилглицеринфосфата). Глицерофосфолипиды, представляют собой сложные эфиры глицерина, высших жирных кислот и фосфорной кислоты. К основным глицерофосфолипидам относятся: фосфатидилхолин (Х= - CH2CH2N(CH3)3); фосфатидилэтаноламин (Х= - CH2CH2NH2); фосфатидилсерин (Х= - CH2CH(NH2)COOH); фосфатидилтреонин (Х= - CH(CH3)CH(NH2)COOH); фосфатидилглицерин (Х= - СН2СН(ОН)СН2(ОН)); дифосфатидилглицерин (кардиолипин) ( Х = - CH2CH(OH)CH2OPO2OCH2CH(OCOR)CH2OCOR); ф    осфатидилинозитОН Н Н ОН ( Х = - О Н Н ОН ОН ОН В группу сфингофосфолипидов (сфингомиелинов) входят липиды, со- держащие аминоспирт-сфингозин. Построены сфингофосфолипиды идентично с глицерофосфолипидами. В них водород гидроксильной группы у первого углеродного атома церамида замещен на фосфохолин, фосфоэтаноламин или фосфосерин (Николаев А.Я., 2001).  НО-СН2 ОCH-NH-C-R  HO - CH - CH = CH - (CH2)12 - CH3 церамид здесь R - углеводородный радикал жирной кислоты, которая связана с аминогруппой сфингозина амидной связью. Основная роль фосфолипидов в клетке - быть структурными компо- нентами мембран (Крейтис М., 1975). По своему химическому строению они относятся к группе так называемых амфифильных соединений, молекулы которых состоят из двух частей, радикальным образом различающихся по своему отношению к водному окружению (Bangham, A.D., 1964). Полярные головы молекул фосфолипидов - гидрофильные, а их неполярные хвосты – гидрофобные (Антонов В.Ф., 1999). Уникальное строение природных фосфолипидов, в молекулах которых одновременно находятся гидрофобные и гидрофильные фрагменты, предопределяет их незаменимую роль во многих важнейших биологических процессах (Маркин В.С., 1983). В качестве компонентов клеточных мембран фосфолипиды распространены во всех типах живых организмов (Barsukov, L. I. , 1977, Cevc G, 1996). В фундаментальных и прикладных научных исследованиях используют липидные монослойные, бислойные («черные») мембраны, липосомы. (Fountain, M.W., 1982). Основные направления работ в этой области - изучение динамики и подвижности молекул липидов, липид-белковых взаимодействий, фазовых переходов, межмембранных взаимодействий (Крепс Е.М., 1981). Широкое использование липидов в медицине и косметологии основано на их высокой физиологической активности, малой токсичности, биосовместимости и биодеградируемости ( Степанов А.Е., 1991 ; Дудниченко А.С., Краснопольский Ю.М., Швец В.И., 2001). Благодаря своим особым свойствам, фосфолипиды в организме могут выполнять следующие функции. Транспортные: фосфолипидные агрегаты с инкапсулированными лекарственными веществами, а также биологически активными веществами могут целенаправленно транспортировать их к нужным органам и тканям. Фосфолипидные везикулы также способны удалять определенные компоненты из клеточных мембран, что позволяет корректировать течение метаболических процессов в организме. Регуляторные: отдельные типы фосфолипидов и их метаболиты активно участвуют в процессах клеточной регуляции (Fountain, M.W., 1982). Так, например, фосфатидилинозиты определяют функционирование биологического цикла, отвечающего за формирование информационно-регуляторных потоков клетки в ответ на воздействие экзогенных факторов (Швец В.И., 1987). Иммунологическая активность: фосфолипиды проявляют адьювантные свойства и поэтому способны влиять на иммунный статус организма. Антигенные свойства (высокая иммуногенность) липидов вызывают, в ряде случаев, формирование в организме специфических антилипидных иммуноглобулинов. Выявление таких иммуноглобулинов в стандартных иммунологических тестах может быть использовано для диагностики некоторых распространенных заболеваний (Иванова Н.Н., 1990; Краснопольский Ю.М., 1999). Эмульгирующая способность: данное свойство определяется амфифильной природой фосфолипидных молекул и широко используется для создания биологически активных эмульсий, в которых липиды являются главным стабилизирующим фактором. Создание медицинских и косметических препаратов на основе липидов основано на использовании этих функций. При этом необходимы индивидуальные фосфолипиды, либо их смеси контролируемого состава, обладающие комплексом определенных свойств. В производстве липидных косметических средств используют способность фосфолипидов стабилизировать жировые эмульсии и формировать липосомы (Власов Г.С., Салов В.Ф., Торчилин В.П., 1982). В липосомальных кремах, которые в последнее время получили широкое распространение, липиды выступают и как одно из активных действующих начал композиции (Каган В.Е., Скрыпин В.И., Сербинова Е.А., 1986). Значительные объемы производства, высокие требования к жирно-кислотному составу фосфолипидов делают актуальной проблему доступности сырьевых источников. В настоящее время основными методами производства фосфолипидов являются химический или ферментативный синтез и выделение фосфолипидов из природных источников. При получении изотопно -, флуоресцентно - и спин - меченных фосфолипидов для научных исследований наиболее часто используется полусинтетический подход, сочетающий химический и ферментативный методы (Швец В.И., 1997). Для фармакологических целей и косметологии обычно используются природные фосфолипиды. Значительные объемы производства, высокие требования к жирно-кислотному составу фосфолипидов делают актуальной проблему доступности сырьевых источников. Производятся фосфолипиды в основном из желтков куриных яиц или соевых бобов, в небольших количествах используется также другое растительное сырье и ткани животных. Для контроля отдельных стадий в производстве фосфолипидов наиболее часто используют два метода: хроматографию (ТСХ, ВЭЖХ) для определения качественного состава липидов и анализа продуктов перекисного окисления (Лопатин П.В., 1983). Перекисное окисление липидов – это окисление жирных ненасыщенных кислот молекулярным кислородом (Кучеренко Н.Е, Васильев А.Н., 1985). Этот показатель является одним из основных факторов, вызывающих повреждение биологических мембран и может быть инициировано целым рядом факторов, в том числе и УФ – облучением (Владимиров Ю.А., Арчаков А.И., 1972 , Poste G., 1976, Poste G., 1978). Основными стадиями этого процесса являются: образование гидроперекисей, циклизация и последующее расщепление углеводородных цепей с образованием малонового диальдегида, альдегидов и кислот (Владимиров Ю.А., 1989). В процессах перекисного окисления липидов активатором молекулярного кислорода являются ионы Fе2+ . Комплекс Fе2+ - аскорбиновая кислота активирует перекисное окисление липидов во всех типах биологических мембран (Мельянцева Л.П., 1995). Инициировать этот процесс могут также и другие металлы переменной валентности – Cu, Mn, Co, а также соединения, способные образовывать свободные радикалы (Кучеренко Н.Е., Васильев А.Н., 1985). Свободным радикалом называют часть молекулы, имеющую на внешнем уровне неспаренный электрон. Для устойчивого состояния молекула должна содержать на внешней орбитали два электрона, поэтому свободные радикалы активно стремятся отнять недостающий электрон у других молекул. (Удянская И.Л., 2001). Основной целью нападения свободных радикалов являются фосфолипиды, в состав которых входят жирные ненасыщенные кислоты. При взаимодействии свободных радикалов с молекулой ненасыщенного липида (RН) происходит образование липидных радикалов (R*), которые практически мгновенно реагируют с находящимся в среде окисления кислородом, образуя активные гидроперекисные радикалы (RО2) (Gains N., 1977). Эти радикалы окисляют новые молекулы липидов с образованием липидных гидропероксидов (RООН) и липидных радикалов. Гидропероксиды являются крайне нестойкими соединениями и разлагаются с образованием радикалов RО* (Николаев А.Я, 2001). Процесс разложения гидропероксидов может происходить как спонтанно, так и с участием ионов железа и меди. Эти радикалы , в свою очередь, окисляют следующую молекулу липида. В результате количество свободных радикалов растет лавинообразно ( Удянская И.Л., 2001): RН + НО* Н2 О + R* R* + О2® RО2* RО2* + RН® RООН + R* RООН ® НО* + RО* RО*+ RН ® RОН + R* Мембраны живых клеток подвергаются окислительному повреждению в результате радикальной атаки. Перекисное окисление липидов – физиологический процесс, а пероксиды – продукты обмена живых клеток, образующиеся на определенном стационарном уровне (Алавердиева С., 1999).Стационарность обеспечивается за счет физико-химической регуляции окислительных реакций, параметрами которой является атиокислительная активность и состав липидов (Senda, ML, 1979). При этом необходимо учитывать, что невозможно изменить какой либо из параметров системы, не затронув остальные (Аристархов С.А., 1976). В последнее время большое внимание уделяется поиску различных антиоксидантов, особенно из природного сырья, поскольку такие соединения более легко выводятся из организма и являются экологически чистыми (Круглякова К.Е, Шишкина Л.Н., 1992). Внутриклеточная антиоксидантная защита дополняется действием внеклеточных антиоксидантов, которые отвечают за очистку от свободных радикалов, в первую очередь, внеклеточного пространства. Наиболее важными внеклеточными оксидантами является глутатион, витамины Е, А, С, глутатион пероксидаза, супероксоддисмутаза и каталаза ( Хертель Б., 2000). Таким образом, перекисное окисление липидов – важный показатель, определяющий качество липидных препаратов, и оптимизация методов определения данного показателя одна из актуальных задач. |
Добавить документ в свой блог или на сайт
Похожие:
 | Научно-исследовательская работа отчет о научно-технической продукции... Ооо «Научно-производственное объединение «Центр благоустройства и обращения с отходами» |  | Патентам и товарным знакам (19) Открытое акционерное общество "Научно-производственное объединение "Центральный научно-исследовательский институт технологии машиностроения"... |
| Открытое акционерное общество Научно-производственное объединение "Наука" Федеральное государственное бюджетное учреждение науки институт космических исследований российской академии наук | | Реест р памятников, над которыми установлен общественный патронат Академик, основал научно-производственное объединение автоматики и приборостроения. Дважды Герой Социалистического Труда, лауреат... |
| Открытое акционерное общество научно-производственное предприятие... Рабочая программа составлена на основании гос впо направления 030600. 62 – «журналистика» (квалификация бакалавр) | | Открытое акционерное общество научно-производственное предприятие... Рабочая программа составлена на основании гос впо специальности (направления) 030600. 62 «Журналистика» и учебного плана, утвержденного... |
| Фгунпп «Росгеолфонд» Московский филиал фгунпп «Росгеолфонд» «Научный центр виэмс» Федеральное государственное унитарное научно-производственное предприятие «Российский федеральный геологический фонд» | | Фгунпп «Росгеолфонд» Московский филиал фгунпп «Росгеолфонд» «Научный центр виэмс» Федеральное государственное унитарное научно-производственное предприятие «Российский федеральный геологический фонд» |
| Фгунпп «Росгеолфонд» Московский филиал фгунпп «Росгеолфонд» «Научный центр виэмс» Федеральное государственное унитарное научно-производственное предприятие «Российский федеральный геологический фонд» | | Расчет и проектирование конструкций в среде scad office Первое сообщение... Некоммерческого партнерства специализированных организаций нефтехимической и нефтегазовой промышленности |
| Мясоедов: объединение миэм и вшэ это союз экономики и математики С одной стороны, объединение вузов общемировой тренд, с другой это, казалось бы, совершенно разные университеты. Объединение в интервью... | | Расчет и проектирование конструкций в среде scad office Первое сообщение... Участник (фамилия имя отчество на русском языке и фамилия имя на иностранном языке как в загранпаспорте) |
| Анализ методической работы мкоу сош с. Елабуги Хабаровского муниципального... Педагоги входили в методические объединения по циклам: методическое объединение учителей гуманитарного цикла- 6 человек/ 40%; методическое... | | Методическое объединение учителей эстетического воспитания Научно-методическая тема Научно-методическая тема: «Профессиональная компетентность учителей эстетического воспитания как условие качественного обновления... |
| Анализ научно-методической работы за 2012-2013 учебный год Метод объединение учителей географии, биологии, химии, физической культуры и обж. (председатель Зырянова С. В.) 12 | | Программа по формированию навыков безопасного поведения на дорогах... Методическое объединение координирует научно-методическую и организационную работу классных руководителей |
