А. В. Семенов1, П. Г. Плешанов3 влияние возраста и облучения на частоту транслокаций и дицентриков, определяемых методом fish, в лимфоцитах человека
Скачать 224.91 Kb.
|
И. Е. Воробцова1, Дж. Д. Такер2, Н. М. Тимофеева1, А. Н. Богомазова1, А.В. Семенов1, П. Г. Плешанов3 ВЛИЯНИЕ ВОЗРАСТА И ОБЛУЧЕНИЯ НА ЧАСТОТУ ТРАНСЛОКАЦИЙ И ДИЦЕНТРИКОВ, ОПРЕДЕЛЯЕМЫХ МЕТОДОМ FISH, В ЛИМФОЦИТАХ ЧЕЛОВЕКА На выборке из 115 контрольных доноров и из 273 человек, подвергшихся неконтролируемому лучевому воздействию в малых дозах (Чернобыль, Семипалатинск, Челябинск), исследовано влияние возраста и облучения на частоту транслокаций и дицентриков, определяемых методом “chromosome painting”. Возраст обследуемых колебался от 3 до 85 лет, время прошедшее после облучения - от 1 до 40 лет. Возрастная зависимость обоих типов хромосомных обменов соответствовала квадратичной функции в обеих группах обследованных лиц. Частота транслокаций нарастала с возрастом значительно быстрее, чем частота дицентриков. Уровень стабильных обменов в экспонированной группе был достоверно выше, чем в соответствующем возрастном контроле. Стабильные, нестабильные хромосомные обмены, лимфоциты человека, FISH, возраст, облучение. На протяжении последних десятилетий концентрация вредных факторов в окружающей среде непрерывно увеличивается, что является одной из причин ухудшения здоровья людей. К таким факторам относится ионизирующая радиация, которая воздействует на человека не только вследствие ее применения в медицине и промышленности, но и из-за испытаний ядерного оружия (Семипалатинск), аварий на атомных производствах (Чернобыль, Челябинск), халатного отношения к радиоактивным источникам (Эстония). Для количественной оценки вероятности развития патологических процессов как стохастических (рак), так и нестохастических (неспецифическая отдаленная лучевая патология), в эпидемиологии принято опираться на величину поглощенной дозы ионизирующего излучения. Однако, в упомянутых выше ситуациях неконтролируемого облучения людей физические дозы, как правило, неизвестны. В связи с этим возникла проблема биологической дозиметрии и поиска тех показателей, которые могли бы объективно отражать поглощенную дозу. С 60-х годов в качестве такого показателя используются обменные хромосомные аберрации (дицентрические и кольцевые хромосомы), определяемые в метафазах культивируемых лимфоцитов [1]. Этот метод, однако, будучи пригодным для определения доз в ближайшие сроки после лучевого воздействия, не может использоваться в целях ретроспективной биодозиметрии, так как частота этих аберраций со временем уменьшается из-за их постепенной элиминации при делении предшественников лимфоцитов. В отличие от дицентриков и колец, реципрокные транслокации и инсерции относятся к классу стабильных хромосомных обменов, так как не приводят к генетическому дисбалансу и сохраняются в ряду клеточных поколений. Развитие молекулярного метода флуоресцентной in situ гибридизации (FISH) [2] и основанной на нем техники «раскрашивания хромосом» существенно расширило возможности цитогенетики в биодозиметрии. Появилось много работ, в которых на основании учета стабильных хромосомных аберраций у облученных людей были получены достаточно точные оценки поглощенных доз [3, 4]. Со временем выяснилось, что и этот тип аберраций, по-видимому, не может рассматриваться в качестве абсолютно точного биодозиметра. Оказалось, что на частоту стабильных хромосомных аберраций влияют такие факторы, как возраст и курение [5], что после облучения в относительно больших дозах их количество сначала падает и лишь затем устанавливается на неизменном уровне [6]. Предполагаемая пропорциональность вероятности участия разных хромосом в обменах количеству содержащейся в них ДНК [7] не подтвердилась в ряде исследований [8, 9]. Существование клоновых транслокаций может приводить к завышению оценки поглощенных доз ионизирующей радиации [5, 10]. В настоящей работе методом FISH окрашивания мы исследовали обменные хромосомные аберрации (транслокации и дицентрики) в лимфоцитах контрольных доноров, лиц, пострадавших в результате аварии на ЧАЭС и людей, подвергшихся неконтролируемому облучению в других ситуациях (Семипалатинск, Маяк), так называемых ветеранов подразделения особого риска, оценивая влияние возраста и облучения на выход этих аберраций. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДИКА Контрольная группа состояла из 115 человек в возрасте от 3-х до 85 лет, согласившихся сдать кровь для цитогенетического анализа. Детей обследовали с согласия родителей, присоединяясь к плановому забору крови в лечебных учреждениях. Группа лиц, подвергшихся неконтролируемому облучению (экспонированная группа) включала 221 ликвидатора последствий аварии на ЧАЭС, преимущественно 1986-1987 годов, 26 эвакуированных из радиоактивно загрязненных районов, 26 человек, работавших на Челябинском предприятии «Маяк» или участвовавших в испытаниях атомного оружия на Семипалатинском полигоне. Возраст обследованных колебался от 8 до 76 лет. Время, между облучением и обследованием, варьировало от 1 года до 40 лет. На каждого человека заполняли анкету, включавшую данные о возрасте, вредных привычках (курение, алкоголь), а также болезнях, приеме лекарств, рентгенодиагностических процедурах в течение полугода до цитогенетического анализа. Часть образцов крови для анализа пересылали в США, в Ливерморскую Национальную Лабораторию им. Лоуренса (ЛЛНЛ), другую часть - исследовали в лаборатории радиационной генетики (ЛРГ) ЦНИРРИ МЗ РФ (Санкт-Петербург). Некоторые образцы крови анализировали параллельно в обеих лабораториях. Кровь забирали из локтевой вены в стерильные вакутейнеры с антикоагулянтом и культивировали в среде RPMI-1640 с 15% эмбриональной сывороткой, 2,5% ФГА, L-глутамином, антибиотиками при температуре 370С в течение 48-52 часов, последние 3 часа - в присутствии колцемида (0,1 мкг/мл) для накопления лимфоцитов на стадии метафазы. Для каждого человека ставили несколько параллельных культур. Препараты метафазных лимфоцитов готовили общепринятым способом, используя для гипотонической обработки клеточной суспензии 0,55% раствор KСl (14 мин, 370С), для фиксации - смесь метанола с ледяной уксусной кислотой в объемном соотношении 31. Для выявления хромосомных аберраций как стабильного, так и нестабильного типов применяли FISH метафазных хромосом с ДНК-зондами специфическими к цельным хромосомам человека и к их центромерным районам. В ЛРГ использовали меченные биотином ДНК-зонды к 1, 4 и 12 хромосомам, которые были получены нами (И.Е.Воробцова, А.Н.Богомазова) с помощью ник-трансляции и полимеразной цепной реакции (ПЦР) человеческой ДНК, выделенной из плазмидных библиотек (pBS, Нind III), любезно предоставленных профессором J.W.Gray (Сан-Францисский Университет). Панцентромерную пробу получали и метили дигоксигенином в реакции ПЦР по описанному методу [11]. Гибридизацию препаратов и постгибридизационные отмывки проводили в соответствии с протоколом, описанным в работе [12]. Связанные с хромосомами ДНК-зонды выявляли путем последовательных обработок препаратов FITC-стрептавидином и биотинилированным антистрептавидином. Для визуализации центромерных районов использовали антитела, меченные AMCA. Для контрастного окрашивания остальных хромосом применяли PI в растворе, предотвращающем быстрое выцветание флуорохромов (FITC и AMCA) в ультрафиолетовом свете. Препараты анализировали под ультрафиолетовым микроскопом «Axioplan» (Carl Zeiss) при увеличении х 1000, используя набор фильтров для визуализации FITC (желтый), PI (красный) и AMCA (голубой) флуорохромов. В ЛЛНЛ препараты метафазных лимфоцитов большинства доноров гибридизировали со специфичными к 1, 2 и 4 хромосомам коммерческими ДНК-зондами, прямо меченными флуорохромом Spectrum Orange. Для части доноров использовали комбинацию «полу-прямо» меченных ДНК-зондов к 1, 2 и 4 хромосомам (Spectrum Orange и biotin) и к 3, 5, 6 хромосомам (FITC и digoxigenin). DAPI использовали для контрастного окрашивания остальных хромосом. Препараты микроскопировали, используя набор фильтров, позволяющий одновременно видеть меченные хромосомы-мишени, остальные хромосомы окрашенные DAPI (лиловые) и центромерные участки (синие) всех хромосом. Обмены участками между по-разному окрашенными хромосомами приводили к появлению двуцветных хромосом, которые легко идентифицировались как транслокации (реципрокные, терминальные) или дицентрики по количеству центромер. Бесцентромерные структуры (одноцветные или двуцветные) регистрировали как ацентрические фрагменты. Поскольку при FISH анализе учитываются только обмены между разноцветными хромосомами, для расчета общегеномной частоты событий количество аберраций с участием хромосом-мишеней относили к числу клеточных эквивалентов [7], рассчитанному из общего числа проанализированных клеток, с учетом доли генома, которую покрывает ДНК окрашенных хромосом [13]. Для хромосом 1, 4, 12 эта доля составляет 0,19; для хромосом 1, 2, 4 - 0,22; для хромосом с 1 по 6 - 0,56. На каждого человека анализировали не менее 1000 клеток. Компьютерную обработку данных производили, используя программу «Statistica», путем регрессионного анализа, подбирая методом наименьших квадратов наиболее подходящую модель зависимости частоты транслокаций и дицентриков от возраста. Вероятность отличий оценивали с помощью t-критерия Стъюдена и дисперсионного анализа. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ Данные о геномной частоте стабильных и нестабильных хромосомных обменов представлены в таблице 1. У всех групп лиц, испытавших лучевое воздействие, частота транслокаций достоверно повышена по сравнению с людьми соответствующих контрольных выборок, наиболее значительно - в группе ветеранов. Частота дицентриков превышает контрольный уровень только у ликвидаторов и ветеранов. В таблице 2 сопоставлены частоты этих аберраций в контрольной и экспонированной выборках, сгруппированных в 6 возрастных категорий с 10-летним интервалом. Видно, что и при таком сравнении облученные лица, независимо от сценария имевшего место лучевого воздействия, отличаются в большинстве случаев достоверно более высоким уровенем стабильных аберраций. По нестабильным обменам наблюдаются аналогичные различия, однако, недостоверные. В обеих группах имеет место увеличение с возрастом количества обменов, при этом частота стабильных аберраций во всех возрастных категориях значительно выше, чем частота нестабильных. Как показал регрессионный анализ, зависимости количества транслокаций и дицентриков от возраста удовлетворительно описываются квадратичной функцией. Коэффициенты соответствующих уравнений, рассчитанных как по данным каждой лаборатории, так и по объединенным результатам представлены в таблице 3. Для транслокаций выбранная модель достоверна как в контрольной, так и в экспонированной группах, для дицентриков - только в контрольной. Как видно из таблицы 3, уравнения, рассчитанные по результатам разных лабораторий аналогичны: коэффициенты «» и «» для транслокаций в экспонированной выборке выше, чем в контрольной, хотя не во всех случаях достоверно. В то же время величины этих коэффициентов, рассчитанные по данным ЛРГ выше, чем - по данным ЛЛНЛ, для «» коэффициента контрольной группы - достоверно. Сравнение геномных частот транслокаций у людей, проанализированых параллельно в обеих лабораториях (12 человек), также показало статистически значимые межлабораторные различия (р0,05, t-критерий Стьюдента). Интересно в связи с этим отметить, что при сравнении частот транслокаций у людей (6 человек), проанализированных в ЛЛНЛ при использовании трех или шести хромосом-мишеней, также выявлены достоверные различия. Сопоставление с помощью однофакторного дисперсионного анализа результатов по всей выборке ЛРГ (84 человек) с результатами той выборки ЛЛНЛ (236 человек), где использовали только три хромосомы-мишени, не выявило значимых межлабораторных различий. В связи с этим мы сочли возможным объединить эти результаты для построения суммарных кривых возрастной зависимости выхода транслокаций (рис.1). По дицентрикам результаты выглядят иначе: коэффициенты ““ выше в экспонированной группе, коэффициенты ““ - практически одинаковы, отсутствуют какие-либо систематические межлабораторные различия. Однако, сама квадратичная зависимость возраст-эффект для этого типа аберраций достоверна лишь для контрольной группы. Как следует из представленных данных, в контрольной популяции количество обменных аберраций хромосом в лимфоцитах увеличивается с возрастом. При этом частота стабильных обменов во всех возрастных группах значительно выше, чем частота нестабильных (табл. 2). В возрастном интервале 20-49 лет средний уровень транслокаций колеблется от 0,4 до 0,8 на 100 клеток, что соответствует приводимым в литературе значениям для лиц этого возраста, который наиболее часто используется в качестве контроля [5, 12]. Установленная в настоящей работе квадратичная зависимость частоты стабильных обменов от возраста согласуется с имеющимися литературными данными [14], хотя в другой работе этих же авторов кубическая модель оказалась более адекватной [5]. Четыре человека из 95 в исследованной контрольной выборке характеризовались чрезмерно высокими для своего возраста частотами транслокаций. С помощью “критерия выпада” было показано, что эти люди не могут быть отнесены к генеральной контрольной совокупности, и поэтому при построении кривой возраст-эффект результаты по ним не использовались. Один из обследованных, как выяснилось ретроспективно, несколько лет назад получал локальное облучение на область головы в связи с опухолью гипофиза. Двое других принадлежали к одной семье (отец и дочь). По-видимому, необходимо проводить более тщательное анкетирование людей с высокими частотами транслокаций. Аналогичные аутсайдеры были описаны и в работе [15], у них были обнаружены клоновые транслокации. Средняя частота дицентрических хромосом в контроле, опредленная в настоящем исследовании методом FISH окрашивания, не выходит за рамки общеизвестных пределов встречаемости этих аберраций при их регистрации рутинным способом [16]. Их частота также увеличивается с возрастом донора, хотя в меньшей степени, чем частота транслокаций (табл. 3). Хотя теоретически эти два типа хромосомных обменов возникают с одинаковой частой, их дальнейшая судьба в клеточных популяциях различна. Дицентрические хромосомы, вызывая генетический дисбаланс в клетках, постоянно элиминируют, тогда как транслокации, в основном, сохраняются в процессе пролиферации предшественников лимфоцитов. Низкая частота дицентриков является, по-видимому, причиной того, что данные об их возрастной динамике, полученные рутинным методом, при котором обычно анализируется 100-200 клеток противоречивы [17, 18] В то же время в работах [5, 14], где использовали FISH метод и оценивали порядка 2000 метафаз, что соответствовало 700 клеточным эквивалентам, показана четкая зависимость частоты дицентриков от возраста донора, которая удовлетворительно описывалась как линейной, так и квадратичной функцией. Квадратичный характер возрастной зависимости числа транслокаций свидетельствует о том, что при старении происходит не просто их накопление в силу того, что организм дольше подвергается действию генотоксических факторов. По-видимому, с возрастом ухудшаются процесcы репарации ДНК [19] или/и увеличивается ее повреждаемость [20]. Возрастное увеличение частоты дицентриков, которые, не могут накапливаться в делящихся клетках, также указывает на развивающуюся по мере старения нестабильность хромосом и, как следствие, их большую чувствительность к геноксичным воздействиям. Это было показано в работе Кулешова Н.П., где сравнивалась устойчивость к цитозинарабинозиду лимфоцитов пожилых и молодых доноров [21]. Анализ данных, полученных по экспонированным группам показал, что у них частота обоих типов обменных аберраций повышена по сравнению с одновозрастным контролем независимо от того, каковы были условия облучения и срок, прошедший после лучевого воздействия. Наиболее заметно повышен уровень транслокаций в группе ветеранов, что могло быть связано с более пожилым возрастом этих людей. Однако, при сравнении с соответствующей по возрасту контрольной группой из 20 человек (средний возраст 56,01,6 лет, частота транслокаций 1,20,2) различия между группами ВТ и ВК сохраняются. Возрастная зависимость частоты транслокаций в экспонированной группе также соответствует квадратичной модели. По дицентрикам, однако, модель достоверна лишь на 10% уровне значимости, что повидимому, связано с отсутствием роста частоты этих аберраций в интервале от 40 до 76 лет (табл. 2). Возможно, отсутствие достоверной возрастной зависимости по дицентрикам в группе облученных лиц связано с их более интенсивной по сравнению с контролем элиминацией. Некоторые литературные данные подтверждают это предположение. Так, при изучении в течение 6 лет цитогенетических последствий радиационной аварии в Гойане было показано, что скорость элиминации клеток с ассимметричными обменами увеличивается с величиной поглощенной дозы [22]. К такому же выводу пришли в своём исследовании ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС Н.Мазник и В.Винников, которые обнаружили, что скорость элиминации дицентриков и колец выше у тех, кто был облучен в дозах, превышающих 25 сГр, по сравнению с теми, кто получил более низкие дозы [23]. Сравнение кривых, представленных на рис. 1 показывает, что кривая возраст-эффект для транслокаций в экспонированной группе проходит выше и под большим углом наклона к оси абцисс, чем в контрольной, хотя различия между соответствующими коэффициентами в сравнимаемых выборках достоверны только в трех случаях (табл. 3). Большая величина коэффициента «» свидетельствует о более интенсивном возрастном накоплении транслокаций в группе, испытавших лучевое воздействие людей. Это может быть следствием индуцированой облучением нестабильности генома, показанной многими авторами [24, 25, 26, 27, 28]. Как видно, из таблицы 3 величины коэффициентов («» и «») в ЛРГ выше, чем ЛЛНЛ. Возможно, это связано с использованием разных наборов хромосом-мишеней, что подтверждается и различиями коэффициентов уравнений, рассчитанных по результатам, одной и той же лаборатории (ЛЛНЛ), но при использовании разных хромосомных коктейлей. Ряд авторов, изучавших вовлеченнность разных хромосом в аберрации, приводят данные о непропорциональной количеству ДНК вероятности участия хромосом в обменах, хотя имеются и противоположные результаты [29]. В основном этот вопрос изучался на лимфоцитах облученных in vitro. В то же время в работе [30] показано, что в лимфоцитах ликвидаторов последствий аварий на ЧАЭС наблюдается не случайное вовлечение хромосом в обмены. Увеличивающаяся генотоксичность окружающей среды все настоятельнее ставит задачу изучения возможных негативных последствий этого процесса для здоровья людей и роли генетических повреждений в этом эффекте. Исследование возрастной динамики стабильных хромосомных аберраций может помочь пониманию механизмов старения и канцерогенеза. Структурные хромосомные аберрации рассматриваются как наиболее вероятные события, связанные с малигнизацией. Действительно, они инициируются теми же воздействиями, что и рак, встречаются в большинстве опухолей, а иногда и определяют их клинический прогноз. Мутации в генах, ответственных за репарацию ДНК, за супрессию онкогенов, за контроль клеточного цикла, увеличивают как частоту опухолей, так и частоту хромосомных поломок. Недавнее исследование группы скандинавских авторов, обследовавших несколько тысяч людей и показавших, что риск возникновения рака возрастает у лиц с повышенным спонтанным уровнем хромосомных нарушений, можно расценивать как эпидемиологическое доказательство роли хромосомных аберраций в канцерогенезе [31]. Некоторые авторы [32] предлагают использовать хромосмоные аберрации в качестве доклинического маркера опухоли в расчетах онкологического риска. Это особенно важно для экстраполяции кривой доза-эффект по выходу опухолей в область малых уровней воздействий, когда их встречаемость низка и для регистрации новообразований необходимы колоссальные эпидемиологические исследования. Исследование возрастной динамики стабильных хромосомных аберраций имеет и ряд практических аспектов. Имея достоверную (то есть полученную на большом статистическом материале) калибровочную кривую возраст-эффект, можно определять «биологический возраст» человека, и, следовательно, реальный, а не календарный риск развития у него той или иной патологии; выявлять «аутсайдеров», то есть лиц с достоверно более высокими частотами хромосомных аберраций по сравнению с нормой для данного возраста, чтобы затем обследовать их более детально на наличие клонов аберрантных клеток; проводить более корректную биодозиметрию ионизирующих излучений и других генотоксикантов по частоте стабильных хромосомных аберраций с учетом их возрастного накопления. И. Е. Воробцова - адресат для корркспонденции: 189646, С-Петербург, Песочный-2, ул. Ленинградская, 70/4, ЦНИРРИ МЗ РФ; тел. (812) 596-87-79; E-mail: radgen@gate.la.spb.ru СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1.Gooch P. C., Bender M. A., Randolph M. L in Biological Effects of Neutron and Proton Irradiations. Vienna.: International Atomic Energy Agency, 1964. V. I. P. 325-342. 2. Pinkel D., Straume T., Gray J.W.//Proc. Natl. Sci. USA. 1986. V. 83. P. 2934-2938. 3. Lindholm C., Salomaa S. et al.//Int. J. Radiat. Biol. 1996. V. 70. ¹ 6. P. 647-656. 4. Snigiryova G., Brasselman H. et al.//Int. J. Radiat. Biol. 1997. V. 71. P. 119-127. 5. Ramsey M. J., Moore II D. H., Briner J. F. et al.//Mutat. Res. 1995. V. 338. P. 95-106. 6. Matsumoto K., Ramsey M. J., Nelson D., Tucker J. D.//Radiat. Res. 1998. V. 149. P. 602-613. 7. Lucas, J. N., Awa, A., Straume, T. et al.//Int. J. Radiat. Biolo. 1992. V. 62. P. 53-63. 8. Knehr S., Zitzelsberger H., Braselmann H., Nahrstedt U., Bauchinger M.//Int. J. Radiat. Biol. 1996. V. 70. ¹ 4. P. 385-92. 9. Boei J. J. W. A., Vermeulen S., Natarajan A. T.//Int. J. Radiat. Biol. 1997. V. 72. ¹ 2. P. 139-145. 10. Salassidis K., Georgiadou-Shumacher V. et al.//Int. J. Radiat. Biol. 1995. V. 68. ¹ 3. P. 257-262. 11. Weier H. U., Lucas J. N., Poggensee M. et al.//Chromosoma. 1991. V. 100. P. 371-376. 12. Bauchinger M., Schmid E., Zitzelberger H. et al.//Int. J. Radiat. Biol. 1993. V. 62. P. 673-678. 13. Mendelsohn M. L., Mayall B. H., Bogart E. et al.//Science. 1973. V. 179. P. 1126-1129. 14. Tucker J. D., Lee D. A., Ramsey M. J. et al.//Mutat. Res. 1994. V. 313. P. 193-202. 15. Johnson K. L., Tucker J. D., Nath J.//Mutagenesis. 1998. V. 13. № 3. P. 217-227. 16. Lloyd D. C. in Biological Dosimetry Eds. W.G. Eisert, M. L. Mendelson. Berlin.: Springer, 1984. P. 3-17. Anderson D., Jenkinson P. C., Dewdney R. S. et al.//Mutat. Res. 1988. V. 204. P. 407-420. 18. Bender M. A., Preston R. J. et al.//Mutat. Res. 1988. V. 204. P. 421-433. 19. Weirich-Schwaiger H., Weiruch H. G., Gruber B. et al.//Mutat. Res. 1996. V. 316. P. 37-48. 20. Âèëåí÷èê Ì. Ì. Ìîëåêóëÿðíûå ìåõàíèçìû ñòàðåíèÿ. Ì.: Íàóêà, 1970. 168 c. 21. Êóëåøîâ Í. Ï.//Öèòîëîãèÿ. 1972. Ò. 14. ¹ 11. Ñ. 1368. 22. Natarajan A. T. et al.//Mutat. Res. 1995. V. 311. P. 47-54. 23. Ìàçíèê Í. À., Âèííèêîâ Â. À.//Öиòîëîãèÿ è ãåíåòèêà. 1997. ¹ 6. Ñ. 41-47. 24. Kadhim M. A., Lorimore S. A. et al.//Int. J. Radiat. Biol. 1995. V. 67. ¹ 3. P. 287-293. 25. Ponnaiya B., Cornforth M. N., Ullrich R. L.//Rad. Res. 1997. V. 147. P. 288-294. 26. Ullrich R. L., Ponnaiya B.//Int. J. Radiat. Biol. 1998. V. 74. № 6. P. 747-754. 27. Воробцова И. Е., Воробьева М. В., Корытова Л. И., Шуст В. Ф.//Цитология. 1995. Т. 37. № 5/6. С. 449-458. 28. Vorobtsova I. E., Vorobyova M. V., Bogomazova A. N.//Proc. of 27th Annual Meeting of the European Society for Radiation Biology. Montpellier, September 1-4 1996. Eds. M. Martin, F. Daburon. France.: Radioprotection-colloques. 1997. V. 32. P. 227. 29. Schmid E., Braselmann H., Nahrstedt U.//Mutat. Res. 1995. V. 348. P. 125-130. 30. Johnson K. L., Nath J. et al.//Mutat. Res. 1999. V. 439. P. 77-85. 31. Hagmar L., Brogger A., Hansteen I. L. et al.//Cancer Res. 1994. V. 54. P. 2919-2922.
1Центральный Научно-исследовательский Рентгено-радиологический институт МЗ РФ, С.-Петербург, Россия 2Национальная Лаборатория им. Лоуренса, Ливермор, США 3Научно-исследовательская Лаборатория Прикладной Экологии МЗ РФ, Москва, Россия Таблица 1. Обменные хромосомные аберрации, выявленные путем FISH-окрашивания у людей различных групп
Л-ликвидаторы; ВТ-ветераны; ВЭ-взрослые эвакуированные; ДЭ-дети эвакуированные; ВК-взрослый контроль; ДК-детский контроль * различие с контролем достоверно (p<0,05) Таблица 2. Обменные хромосомные аберрации, выявленные путем FISH-окрашивания у людей разного возраста в экспонированной и контрольной группах
* различие с контролем достоверно (p<0,05) Таблица 3. Коэффициенты уравнений квадратичной зависимости возраст-эффект для транслокаций и дицентриков в контрольной и экспонированной группах
* различие с контрольной группой (p<0,05) Рис. 1. Сравнение зависимостей частоты транслокаций от возраста у людей контрольной и экспонированной групп. 1 - контроль. 2 - экспонипованные. По оси абсцисс - количество транслокаций на 100 клеток; по оси ординат - возраст в годах. И. Е. Воробцова1, Дж. Д. Такер2, Н. М. Тимофеева1, А. Н. Богомазова1, П. Г. Плешанов3 ВЛИЯНИЕ ВОЗРАСТА И ОБЛУЧЕНИЯ НА ЧАСТОТУ ТРАНСЛОКАЦИЙ И ДИЦЕНТРИКОВ, ОПРЕДЕЛЯЕМЫХ МЕТОДОМ FISH, В ЛИМФОЦИТАХ ЧЕЛОВЕКА Реферат На выборке из 115 контрольных доноров и из 273 человек, подвергшихся неконтролируемому лучевому воздействию в малых дозах (Чернобыль, Семипалатинск, Челябинск), исследовано влияние возраста и облучения на частоту транслокаций и дицентриков, определяемых методом “chromosome painting”. Возраст обследуемых колебался от 3 до 85 лет, время прошедшее после облучения - от 1 до 40 лет. Возрастная зависимость обоих типов хромосомных обменов соответствовала квадратичной функции в обеих группах обследованных лиц. Частота транслокаций нарастала с возрастом значительно быстрее, чем частота дицентриков. Уровень стабильных обменов в экспонированной группе был достоверно выше, чем в соответствующем возрастном контроле. 1Центральный Научно-исследовательский Рентгено-радиологический институт МЗ РФ, С.-Петербург, Россия 2Национальная Лаборатория им. Лоуренса, Ливермор, США 3Научно-исследовательская Лаборатория Прикладной Экологии МЗ РФ, Москва, Россия
P. G. Pleshanov3 EFFECT OF AGE AND RADIATION EXPOSURE ON THE FREQUENCY OF TRANSLOCATIONS AND DICENTRICS DETECTED BY FISH IN HUMAN LYMPHOCYTES Summary The frequencies of translocations and dicentrics detected by «chromosome paiting» in lymphocytes were estimated in 115 healthy donors and in 273 people exposed to uncontrolled irradiation at low doses 1-40 years ago. Age responses of both types of exchanges at the age range from 3 to 85 years fit to quadratic model. The frequency of translocations grew faster with age than the frequency of dicentrics. The yields of stable exchanges in exposed people was significantly higher than those in control donors of corresponding ages. 1Central Research Institute of Roentgenology and Radiology, Ministry of Russia, St. Petersburg, Russia 2Lawrence Livermore National Laboratory, Livermore, USA 3Applied Ecology Research Laboratory, Ministry of Health of Russia, Moscow, Russia | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Добавить документ в свой блог или на сайт
Похожие:
 | Sh [S] she, shop, show, fish, sheep Finnish fish is fresh fish ch | | Влияние облучения электронами на p-n переходы в сверхрешетках si-Ge А. И. Сягло1, Н. А. Поклонский1, С. Б. Ластовский2, H. Presting3, Н. А. Соболев4,5 |
 | Исследование радиационных изменений в керамике ск-1 методом ик-спектроскопии Астапова Е. С., Костюков Н. С., Ванина Е. А., Пивченко Е. Б. «Структурные изменения керамических материалов в результате нейтрронного... | | «Влияние вибрации на организм человека» Теперь мы осознали, что любая деятельность человека оказывает влияние на окружающую среду, а ухудшение состояния биосферы опасно... |
| Реферат По физике На тему: «Влияние электромагнитного излучения на организм человека» Влияние электромагнитных лучей, исходящих от сотовых телефонов, на организм человека | | Решение заданий из №128, 129 у доски по схеме ... |
| Исследовательская работа по физике на тему: Звук. Влияние звука на... Целью семинара является обсуждение и проработка лучших мировых практик и современных моделей реализации проектного подхода в инженерном... | | Влияние воды с пониженным содержанием дейтерия и кислорода 18 о на... Работа выполнена в Государственном научном центре Российской Федерации – Институте медико-биологических проблем Российской академии... |
| Программа элективного курса «Клуб молодых исследователей» (для учащихся 8 9 классов) Только с помощью научных методов можно следить за толщиной и однородностью озонного слоя, защищающего человека от ультрафиолетового... | | Физический факультет Сравнительное исследование парамагнитных свойств образцов, полученных методом пиролиза аэрозолей и золь-гель методом 19 |
| Экология и эдоровье человека Колодезников Артем ученик 9 класса Колодезникова Людмила Теперь мы осознали, что любая деятельность человека оказывает влияние на окружающую среду, а ухудшение состояния биосферы опасно... | | Конкурс «Азбука здорового человека\ Исследовательский проект по физике... Уровни шумов от различных источников и реакция организма на акустические воздействия |
| Литература. 11 Влияние личных качеств учителя в системе обучения детей младшего школьного возраста. 4 | | М. М. Пришвин «золотой луг», «Лесная капель», «Календарь природы»(ответственность... И. А. Бунин. «Антоновские яблоки»(близость человека к природе, подчинение быта крестьянским заботам) |
| Методическая разработка уроков по теме: «Многообразие биогеоценозов.... «Многообразие биогеоценозов. Влияние деятельности человека. Проблемы и пути их решения» | | Урок по живописи «Палитра природы источник внутреннего мира человека» 9 класс Цель урока: изучить влияние цвета в природе на эмоциональные ощущения и эстетические переживания человека |
