Изучение метаболома сырья и лекарственных форм крапивы двудомной

Скачать 271.15 Kb.

Название	Изучение метаболома сырья и лекарственных форм крапивы двудомной
страница	2/3
Дата публикации	13.08.2015
Размер	271.15 Kb.
Тип	Автореферат

100-bal.ru > Химия > Автореферат

1 2 3

Изучение содержания макроэлементов кальция и магния в крапиве двудомной

Содержание кальция (Са) и магния (Mg) в крапиве двудомной определяли методом ААС, комплексонометрически, а также потенциометрически с использованием кальций-селективного электрода.

Для определения методом ААС образцы сырья (листья, стебли, корневища и корни крапивы двудомной) предварительно измельчали и подвергали сухому озолению, с последующим растворением в разбавленной 1:1 кислоте азотной. Полученные данные представлены в табл. 3.

Для решения одной из задач настоящего исследования (изучение возможности получения ЛФ крапивы двудомной, обогащенной Са) необходимо было разработать точную, простую и быструю в исполнении методику количественного определения. За основу была взята методика комплексонометрической оценки субстанции кальция хлорида, используемая в российской и британской фармакопеях.
Таблица 3. Содержание кальция и магния в крапиве двудомной, определенное методом ААС

ЛРС	Содержание, %
ЛРС	Кальций	Магний
Листья	1,3000	0,9000
Стебли	1,1000	0,8000
Корневища и корни	1,1000	0,9000

В разработанной для анализа листьев крапивы методике определение складывалось из следующих этапов: к водному извлечению добавляли раствор натрия гидроксида концентрированный для осаждения катионов магния в виде гидроксида магния, т.к. они мешают определению, катионы кальция остаются в анализируемом образце. Полученный осадок отфильтровывали, а фильтрат нейтрализовали концентрированной кислотой хлористоводородной до рН = 7-8. Дальше рН фильтрата доводили до значения, при котором работает индикатор, добавляли небольшое количество индикаторной смеси и титровали 0,05 М раствором трилона Б (NaЭДТА) до перехода окраски. Была рассмотрена возможность использования трех индикаторов: эриохрома черного Т, мурексида и хромогена темно-синего. Результаты, полученные при использовании всех индикаторов, сопоставимы (табл. 4, 5). Для дальнейшего исследования был выбран хромоген темно-синий, вследствие легкости регистрирования конечной точки титрования из-за очень четкого перехода окраски. Разработанная методика защищена патентом РФ. Метрологические характеристики показали возможность использования методики для количественного определения Са и Mg в сырье крапивы.

Таблица 4. Содержание кальция в листьях крапивы двудомной, определенное комплексонометрическим методом (n=10; р=0,95)

Анализируемое сырье	Содержание кальция, %
	Индикатор
	Эриохром черный Т	Мурексид	Хромоген темно-синий
Листья	0,4732±0,0005	0,4904±0,0002	0,4904±0,0005
Стебли	0,3760±0,0005	0,3727±0,0002	0,3171±0,0005
Корневища и корни	0,3123±0,0002	0,2853±0,0007	0,2171±0,0005

Таблица 5. Метрологические характеристики методики комплексонометрического определения кальция в листьях крапивы (n=10; р=0,95)

, мг%	S²	S	±∆Х	ɛ, %
Индикатор – эриохром черный Т
0,4732	0,0007	0,0266	0,0005	0,1145
Индикатор - мурексид
0,4904	0,0001	0,0116	0,0002	0,0232
Индикатор – хромоген темно-синий
0,4904	0,0007	0,0267	0,0005	0,0535

Также была разработана методика потенциометрического определения Са с использованием электрода, селективного к элементу, обратимого по отношению к этому иону и реагирующего на Са²⁺ с высокой чувствительностью. В разработанной методике проводили измерение электродвижущей силы анализируемой пробы, доведенной до рН 5 кислотой хлористоводородной, с добавлением раствора калия хлорида с концентрацией 1 моль/л в соотношении 5:1, с помощью хлорсеребряного и кальций-селективного электродов с последующим нахождением концентрации кальция по калибровочному графику. Содержание Са в сырье крапивы, определенное потенциометрически составило в листьях 0,4698±0,0004%, стеблях 0,4088±0,0004%, корневищах и корнях 0,3246±0,0003%, полученные результаты сопоставимы с данными комплексонометричского определения (табл. 4).
Изучение динамики накопления гидрофильных БАВ и макроэлементов кальция и магния в листьях крапивы двудомной

Разработанные в ходе исследования методики количественного определения БАВ были использованы для изучения динамики накопления в сырье крапивы аскорбиновой кислоты, флавоноидов, кальция и магния. Для анализа было использовано ЛРС крапивы, заготовленное в Московской области (Домодедовский район) в различные фазы вегетации растения (с апреля по сентябрь 2011 г.).

Анализ полученных данных (рис. 1, 2) показал, что наибольшее содержание аскорбиновой кислоты (44,85±0,06 мг% - 46,97±0,04мг%) и суммы флавоноидов (0,2194±0,0001% - 0,3004±0,0001%) накапливается в листьях крапивы двудомной в фазу цветения (июль – август месяцы). В это же время в сырье отмечено и максимальное содержание Са (4,2436±0,0003% - 4,4256±0,0003%) и Mg (1,8411±0,0004% - 2,6640±0,0003%).

мг%

мг%

Рисунок 1. Динамика накопления аскорбиновой кислоты и флавоноидов в листьях крапивы по фазам вегетации.
Рисунок 2. Динамика накопления кальция и магния в листьях крапивы по фазам вегетации.
Изучение лекарственных форм, получаемых из крапивы двудомной

Зарегистрированными ЛФ крапивы двудомной являются настой и жидкий экстракт, которые применяются в качестве кровоостанавливающего средства. Это фармакологическое действие обеспечивает витамин К₁, обладающий коагуляционной способностью. Однако в настой витамин К₁ практически не переходит и кровоостанавливающее действие осуществляется за счет других БАВ метаболома крапивы двудомной, таких, как флавоноиды, дубильные вещества и соединения минеральной природы – соли кальция.

Для изучения ЛФ крапивы двудомной готовили настой (1:10) из листьев по фармакопейной методике. Жидкий экстракт (1:1) из листьев крапивы был получен в лабораторных условиях методом дробной мацерации, с использованием в качестве экстрагента 50% спирта этилового. Полученный жидкий экстракт соответствовал требованиям статьи «Экстракты» ГФ XI, вып. 2. Полученные ЛФ крапивы были охарактеризованы по внешнему виду, в них были определены рН и сухой остаток.

В гомеопатии крапива двудомная применяется в форме настоя гомеопатического и настоек гомеопатических матричных (из свежего цельного растения и из свежих листьев), которые были изготовлены в соответствии с ОФС 42-0001-00 (настой гомеопатический) и ВФС 42-2799-96 (настойки гомеопатические матричные).

Исходя их принципа «сквозной стандартизации», методики, разработанные для анализа БАВ, Са и Mg в ЛРС крапивы были модифицированы и адаптированы для анализа ЛФ крапивы. Результаты представлены в табл. 6.

Таким образом, в ходе проведенного исследования была дана оценка ЛФ крапивы двудомной по содержанию гидрофильных БАВ и макроэлементов Са и Mg. А также показана возможность применения разработанных методик для количественной оценки содержания кальция и магния в ЛФ крапивы двудомной. Методика количественного определения Са в жидких экстрактах из ЛРС защищена патентом РФ.
Получение ЛФ крапивы двудомной, обогащенной кальцием

Имеющиеся на отечественном фармацевтическом рынке лекарственные препараты, содержащие соли Са, имеют ряд противопоказаний и могут вызывать серьезные побочные эффекты. Применение лекарственных растений и растительных препаратов, в которых макро- и микроэлементы находятся в биоусваеваемой форме, может быть более эффективным для нормализации минерального баланса организма (Кудрин А.В., Ноздрюхина Л.Р. и др.).

В ходе исследования были подобраны условия, увеличивающие переход Са и Mg из растительного сырья в извлечение. Кальций в листьях крапивы содержится в цистолитах и друзах в свободном (ионном) виде, а также в виде комплексных солей. Наибольшее количество магния входит в состав хлорофилла и представлено солями органических кислот. Все эти соединения под действием сильной минеральной кислоты (кислоты хлористоводородной) разрушаются, и макроэлементы в виде растворенных солей переходят в извлечение. Это было подтверждено микроскопически на микропрепаратах из ЛРС, обработанных 8% раствором кислоты хлористоводородной, характерных

Таблица 6. Содержание БАВ в листьях, аллопатических и гомеопатических лекарственных формах крапивы двудомной (n=10; р=0,95)

Название БАВ/ группы БАВ	Листья	Настой	Жидкий экстракт	Настой гом.	Настойка матричная гом. (целое растение)	Настойка матричная гом. (листья)
Флавоноиды	1,0879±0,0005%	0,0485±0,0002 мг%	0,0175±0,0001 мг%	0,0170±0,0001 мг%	0,0315±0,0001 мг%	0,0515±0,0002 мг%
Дубильные вещества	3,59±0,02%	3,476±0,009 мг%	4,017±0,003 мг%	1,085±0,002 мг%	1,81±0,01 мг%	2,08±0,01 мг%
Полисахариды	5,62±0,01%	0,584±0,001%	0,380±0,001%	151,66±0,04 мг%	5,42±0,01 мг%	5,37±0,01 мг%
Восстанавливающие моносахара	4,06±0,02%	0,1593±0,0003%	0,0841±0,0003%	6,08±0,01 мг%	0,0335±0,0001 мг%	0,0311±0,0001 мг%
Аскорбиновая кислота	33,64±0,02 мг%	0,0311±0,0002 мг%	0,0377±0,0001 мг%	0,0280±0,0002 мг%	0,0320±0,0002 мг%	0,0445±0,0002 мг%
Свободные органические кислоты	1,503±0,004%	1,471±0,002 мг%	6,152±0,003 мг%	2,45±0,01 мг%	7,42±0,01 мг%	6,04±0,02 мг%
Гидроксикоричные кислоты	2,4942±0,0002%	2,417±0,001%	1,541±0,001%	1,511±0,002%	0,437±0,002%	0,433±0,002%
Свободные аминокислоты	0,593±0,001%	0,1401±0,0002%	0,603±0,001%	0,128±0,001%	0,294±0,001%	0,244±0,001%
Хлорофилл	6,5015±0,0003%	не определено	1,055±0,003%	не определено	не определено	не определено
Кальций	0,4773±0,0004%	0,689±0,001 мг%	0,8025±0,0003 мг%	0,589±0,002 мг%	0,343±0,003 мг%	0,302±0,003 мг%
Магний	0,4952±0,0001%	0,3770±0,0005 мг%	0,4710±0,0005 мг%	0,328±0,003 мг%	0,282±0,003 мг%	0,239±0,002 мг%

В настое не определяли содержание хлорофилла, так как он являясь липофильным соединением, очень плохо переходит в воду.
для листьев крапивы анатомо-диагностических признаков нет: друзы в мезофилле отсутствуют, а у цистолитов, расположенных в клетках эпидермиса, сохраняется только оболочка (рис. 3, 4).

Использование 8% раствора кислоты хлористоводородной позволило увеличить в извлечении из листьев крапивы содержание кальция в 3 раза, магния – в 2 раза.

1

1

а б

Рисунок 3. Цистолита (1). а – стандартный микропрепарат, б – микропрепарат, полученный после кипячения в 8%-ой кислоте хлористоводородной. Увеличение × 200.

а б

Рисунок 4. а – цепочки друз (стандартный микропрепарат), увеличение × 90; б – сосуды без цепочек друз оксалата кальция, увеличение × 200 (микропрепарат, полученный после кипячения в 8%-ой кислоте хлористоводородной).

В лабораторных условиях методом дробной мацерации был получен жидкий экстракт листьев крапивы с использованием в качестве экстрагента 50% спирта этилового, подкисленного до рН=2 кислотой хлористоводородной. В полученном экстракте было определено содержание суммы флавоноидов, кальция и магния (табл. 7).

Таблица 7. Содержание суммы флавоноидов, кальция и магния в экстрактах листьев крапивы двудомной (n=10; р=0,95)

БАВ	Содержание, мг%
БАВ	Жидкий экстракт	Са-жидкий экстракт*
Флавоноиды	0,0175±0,0001	0,0221±0,0001
Кальций	0,8025±0,0003	1,9900±0,0005
Магний	0,4710±0,0005	1,1095±0,0006

* Са-жидкий экстракт – экстракт, полученный на подкисленном спирте этиловым.

1 2 3

Похожие:

	Рабочая программа учебной дисциплины пм. 02 Изготовление лекарственных форм и ПМ. 02 «Изготовление лекарственных форм и проведение обязательных видов внутриаптечного контроля» разработана на основе федерального...		Методические указания для студентов 5 курса отделения заочного обучения... Канд фармац наук, старший преподаватель кафедры технологии лекарственных форм и организации фармацевтического дела фармацевтического...
	Русский язык для казахских школ в шпаргалке а утром все хрустело... А утром все хрустело вокруг: подмерзшие дороги, листья на крыльце, черные стебли крапивы, торчавшие из под снега. Обощающее слово...		Рабочая программа по дисциплине В. В ресурсоведение по направлению... Цель дисциплины состоит в углублении теоретических знаний и приобретении практических умений и навыков по вопросам ресурсоведения,...
	Рабочая программа по дисциплине В. В ресурсоведение по направлению... Цель дисциплины состоит в углублении теоретических знаний и приобретении практических умений и навыков по вопросам ресурсоведения,...		Рабочая программа дисциплины «природа техногенного сырья и проблемы его использования» Задача курса – ознакомить будущих магистров с основными крупномасштабными источниками твердых отходов при переработке минерального...
	Программа по формированию навыков безопасного поведения на дорогах... Ективных и безопасных лекарственных средств или их комбинаций для информации врачей на основе знаний фармакодинамики, фармакокинетики,...		Создание форм антибиотичесого препарата нового поколения доксициклина... Канд фармац наук, старший преподаватель кафедры технологии лекарственных форм и организации фармацевтического дела фармацевтического...
	М. Г. Елисеева «Соблюдение условий хранения лекарственных средств... Актуальные вопросы по обеспечению качества лекарственных средств в аптечных учреждениях и учреждениях здравоохранения Республики...		Методические указания по проведению лекций и семинарско-практических... Ении, оформлении и отпуске лекарств. От уровня организации контроля качества лекарственных средств в аптеке зависит качество и культура...
	Требования к информации, необходимой при представлении заявок на... ...		Методические указания Введение Актуальность темы Между тем, промышленные заготовки этого сырья совершенно не ведутся, а сборы его местным населением для собственных нужд и для Аптекоуправления...
	Приказ представлен в сокращённом варианте. Министерство здравоохранения российской федерации Ввести в действие с 1 января 1998 года "Инструкцию по изготовлению в аптеках жидких лекарственных форм" (приложение)		Разработка лекарственных форм с флуконазолом для лечения кандидозов... О муниципальной целевой программе «Профилактика терроризма и экстремизма на территории Кировского района рсо-алания»
	«Лесная служба спасения» Способы заготовки лекарственных растений. Применение лекарственных растений. 6		Курсовая работа по технологии лекарств тема: «Законодательные основы... Государственное регулирование отношений, возникающих в сфере обращения лекарственных средств 13

Школьные материалы