Министерства здравоохранения и социального развития российской федерации

Т.А. Паршуткина Муниципальное автономное образовательное учреждение «Сибирский Лицей», г. Томск Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск Кафедра факультетской педиатрии с курсом детских болезней лечебного факультета Актуальность. По данным различных исследований в структуре основных пищевых аллергенов у детей преобладают такие аллергены, как яблоко, орехи [1, 3, 4]. Аналогичные данные получены в ходе эпидемиологического исследования, проведенного в Томской области: распространенность аллергии к яблоку у детей в возрасте 7-10 лет достигает 0,29% [2]. Существуют данные, свидетельствующие о важной роли перекрестной реактивности пищевых и пыльцевых паналлергенов в формировании пищевой аллергии у детей. Так, в яблоке содержится ряд структурных белков, сенсибилизация к которым развивается опосредованно на фоне сенсибилизации к растительным аэроаллергенам [4]. Цель исследования: установить роль паналлергенов в формировании структуры пищевой аллергии у детей в возрасте 7-10 лет, проживающих в Томской области. Материалы и методы. Нами проанализированы результаты обследования детей (n=1289, средний возраст 8,9±0,02лет), принявших участие в «Исследовании распространенности, социально-экономического значения и основ пищевой аллергии в Европе» по гранту VI рамочной программы Евросоюза) [5]. В исследовании использовали валидизированный клинический вопросник (интервьюирование родителей), определение уровня специфического IgE к пищевым аллергенам, а также структурным аллергенам яблока Mal d 1, Mal d 2, Mal d 3, Mal d 4 (ImmunoCAP, Phadia, Швеция). Результаты. Согласно полученным данным, специфическая сенсибилизация к аллергенам яблока по результатам оценки специфического IgE установлена у 72 пациентов. Анализ уровня специфического IgE к структурным белкам яблока продемонстрировал, что большинство пациентов имело сенсибилизацию к главному аллергену яблока Mal d 1 (43,05%), реже к липидотрансферному белку Mal d 3 (8,33%) и профилину Mal d 4 (9,72%). Следует отметить, что сенсибилизация к термостабильному белку Mal d 2 не выявлена ни у одного пациента. В исследуемой группе у 66,67% детей зарегистрирована сенсибилизация к главному аллергену березы Bet v 1. При проведении корреляционного анализа, также установлена ассоциация между наличием сенсибилизации к паналлергену Bet v 1 и белку яблока Mal d 1 (r=0,8, p<0,05). Полученные данные совпадают с результатами ряда исследований, свидетельствующих о высокой вероятности перекрестной сенсибилизации к Mal d 1 у больных поллинозом [3, 4]. Количество пациентов, имеющих сенсибилизацию к профилину Bet v 2, было значительно ниже (9,72%), однако, установлена положительная корреляция между уровнем профилинов Mal d 4 и Bet v 2 (r=095, p<0,05). Основными аллергическими симптомами, связанными с употреблением яблока, являлись эритематозные высыпания на коже (60,86%), оральный аллергический синдром (78,26%), риноконъюнктивальные проявления (21,73%). Значительно реже встречались одышка (17,39%), гастроинтестинальные симптомы (8,69%). Превалирование в структуре симптомов кожных и оральных проявлений обусловлено молекулярной характеристикой термолабильного аллергена Mal d 1, инактивируемого ферментами желудочно-кишечного тракта и редко вызывающего жизнеугрожающие реакции [4]. Таким образом, ведущим причиннозначимым аллергеном у сенсибилизированных к яблоку детей, проживающих в Томской области, является белок Mal d 1. Сенсибилизация к данному аллергену достоверно коррелирует с сенсибилизацией к главному аллергену березы Bet v 1. Основные клинические симптомы, связанные с употреблением яблока, у лиц, имеющих сенсибилизацию, включают кожные и оральные проявления, что обусловлено преобладанием сенсибилизации к термолабильному аллергену Mal d 1. Список литературы: 1. Лусс Л.В., Сидорович О.И., Успенская К.С. /Пищевая аллергия и пищевая непереносимость: принципы диагностики и терапии // Лечащий врач: медицинский научно-практический журнал. - 2007. - N4. - С. 16-20. 2. Федорова О.С./ Распространенность пищевой аллергии у детей в мировом очаге описторхоза// Бюллетень сибирской медицины. – 2010. - № 5. - С. 102-107. 3. Hauser M., Roulias A., Ferreira F., Egger M./ Panallergens and their impact on the allergic patient // Allergy asthma and clinical immunology. – 2010. - V. 6. - № 1. – Р. 1-16. 4. Sampson H.A./ Update on food allergy// J. Allergy Clin. Immunol. – 2004. – V. 114. - № 5. – P.805-819. 5. Wong G.W., Mahesh P.A., Ogorodova, L. M et al. / The EuroPrevall-INCO surveys on the prevalence of food allergies in children from China, India and Russia: the study methodology // Allergy. – 2009. – V.65. - № 3. - P. 385-390. ВЛИЯНИЕ АДЕНОЗИНА НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ ДЕНДРИТНЫХ КЛЕТОК К.С. Юрьева Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск Центральная научно-исследовательская лаборатория Отделение кардиологии Медицинского факультета Вандербилтского университета, г. Нэшвилл, США Актуальность: аденозин – эндогенный пуриновый нуклеозид, один из промежуточных метаболитов АТФ. В нормальных физиологических условиях его уровень в межклеточном пространстве относительно низок. Содержание аденозина существенно возрастает при воспалении, в результате повреждения клеток, а также при недостаточном снабжении тканей кислородом. Аденозин оказывает свое влияние на клетки через аденозиновые рецепторы. В экспериментах in vitro было обнаружено, что аденозин снижает способность зрелых дендритных клеток, полученных из моноцитов периферической крови человека, индуцировать Т клеточную пролиферацию[1]. Дендритные клетки – профессиональные антиген-распознающие и антиген-представляющие клетки. В нормальных условиях зрелые дендритные клетки индуцируют специфический иммунный ответ, а незрелые обладают иммуносупрессивными свойствами[2]. Представляет интерес изучение молекулярных механизмов, опосредующих эффект аденозина, а также роли аденозиновой регуляции в процессе формирования дендритных клеток из клеток предшественников костного мозга. Цель работы: состояла в изучении эффектов стимуляции аденозиновых рецепторов на формирование функциональных свойств дендритных клеток в процессе их дифференцировки и созревания из костномозговых предшественников. Материалы и методы: в работе были использованы клетки костного мозга полученные из бедренных и большеберцовых костей 10 мышей линии С57BL/6. Культивирование клеток проводили в среде RPMI с добавлением 10нг/мл интерлейкина-4 и 10нг/мл гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора, в присутствии негидролизуемого аналога аденозина (100 μМ NECA) или его растворителя DMSO. На 6-ой день инкубации, для созревания дендритных клеток, в культуру добавляли липополисахарид в концентрации 5мкг/мл. Оценку функциональной активности иммунокомпетентных клеток проводили с использованием смешанной культуры лимфоцитов. Определение активности аргиназы проводили спектрофотометрическим методом по превращению L-аргинина в мочевину. Активность индуцированной NO-синтазы в супернатантах культур дендритных клеток оценивали спектрофотометрически по количеству нитрита. Общая РНК была выделена из клеток набором RNeasy Mini kit (Qiagen,США) по инструкции производителя. Уровень экспрессии матричной РНК Аргиназы и iNOS определяли с помощью полимеразной цепной реакции в реальной времени на ABI PRISM 790HT Sequence Detection System (Applied Biosystems, США). Рис. 1. Эффект стимуляции аденозиновых рецепторов на активность и экспрессию мРНК аргиназы(А) индуцибельной NO-синтазы(Б) дендритными клетками, полученными в отсутствии(ДК) и присутствии аденозина(АДДК). Результаты и обсуждение: мы обнаружили, что зрелые дендритные клетки (после стимуляции с ЛПС) полученные в присутствии негидролизуемого аналога аденозина NECA обладают сниженной способностью индуцировать пролиферацию аллогенных Т клеток. (данные не представлены) С целью определения молекулярных механизмов, обуславливающих низкую эффективность аденозин дифференцированных дендритных клеток (АДДК) в стимуляции Т клеточной пролиферации, мы исследовали активность индуцибельной NO-синтазы (iNOS) и аргиназы. Аргинин – заменимая аминокислота, является общим субстратом для этих ферментов. Аргинин необходим для активной пролиферации в том числе и иммунокомпетентных клеток, локальное снижение его концентрации приводит к подавлению деления и роста клеток. В результате проведенных исследований мы установили, что активность iNOS у АДДК была снижена по сравнению с культурой дендритных клеток, полученных в отсутствии аденозинового аналога (352,6±15,3 и 413,5±19,4 мкМ нитрита натрия/мл соответственно, р=0,0242). (Рисунок1) Однако уровень экспрессии мРНК для iNOS не снижался при стимуляции (26,02±2,22 % мРНК β-актина, по сравнению с 19,76±2,99 % мРНК β-актина для ДК). Существенные различия были обнаружены для активности аргиназы в зрелых дендритных клетках. Стимуляция клеток с ЛПС приводила к снижению активности аргиназы в дендритных клетках, полученных в отсутствии аденозинового аналога (3114±298,1 МЕ/106клеток, по сравнению с 4916±603,7 МЕ/106клеток в незрелых ДК, р=0,0367) . В то же время, в зрелых АДДК аргиназная активность существенно возрастала до значений 10802±1299 МЕ/106клеток (по сравнению с незрелыми АДДК 6471±504,6 МЕ/106, р=0,02). То есть наблюдалась обратная тенеденция по отношению к физиологическому созреванию. Таким образом в АДДК мы обнаружили повышение активности аргиназы с одновременным сниженнием уровня активности NO-синтазы. В тоже время уровень экспрессии мРНК для iNOS не снижался. Одним из механизмов этого эффекта может быть регуляция трансляции iNOS концентрацией аргинина. Снижение концентрации внеклеточного аргинина, за счет усиленной работы аргиназы, активирует сигнальный каскад внутри клеток приводящий к ограничению трансляции белка iNOS. [3] Заключение: на основании проведенных исследований мы сделали заключение о том, что аденозин приводит к снижению способности зрелых дендритных клеток индуцировать Т клеточный иммунный ответ. Одним из механизмов, лежащих в основе пониженной функциональной активности АДДК, вероятно является увеличение активности аргиназы. Список литературы: 1. Novitskiy, S. V. Adenosine receptors in regulation of dendritic cell differentiation and function / S. V. Novitskiy, S. Ryzhov et al. // Blood – 2008.– Vol. 112 – N.5 – P. 1822-31. 2. Mahnke, K.  Immature, but not inactive: the tolerogenic function of immature dendritic cells / K. Mahnke, E. Schmitt et al. // Immunology and Cell Biology – 2002. – Vol. 80 – N.5 – P. 477-83. 3. Lee, J. Translational control of inducible nitric oxide synthase expression by arginine can explain the arginine paradox / J. Lee, H. Ryu, RJ. et al. // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America – 2003. – Vol. 100 – N. 8 – P. 4843-8. Работа выполнена при поддержке ФЦП 1.5, госконтракт № 02.740.11.5150 ЭФФЕКТЫ АДЕНОЗИНА НА НАЧАЛЬНОМ ЭТАПЕ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ МОНОЦИТОВ В CD14+/CD1а-/CD209+ ДЕНДРИТНЫЕ КЛЕТКИ У БОЛЬНЫХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ Ю.А. Яковлева, Е.В. Короткая, К.С. Юрьева Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск Центральная научно-исследовательская лаборатория Отделения кардиологии Медицинского факультета Вандербилтского университета, г. Нэшвилл, штат Теннесси, США Аденозин – эндогенный нуклеозид, промежуточный продукт пуринового метаболизма, играет важную роль в регуляции тканевого гомеостаза. Его количество в тканях существенно повышается при воспалении, достигая концентрации десятков и сотен микромоль. Аденозин осуществляет свои эффекты посредством активации аденозиновых рецепторов (A1, A2A, A2B и A3) [1]. Бронхиальная астма (БА) характеризуется хроническим, персистирующим воспалением дыхательных путей в сочетании со структурными изменениями ткани легкого. Дендритные клетки (ДК) играют важную роль в поддержании легочного воспаления: презентирование ДК антигена приводит к сдвигу иммунного ответа в сторону Th2 [2]. Мы предположили, что повышенная концентрация аденозина может способствовать дифференцировке моноцитов в ДК с провоспалительными свойствами (CD14+/CD1а-/CD209+), а также, что есть люди с высокой и низкой чувствительностью к аденозину. Для проверки нашей гипотезы мы сравнили антигенный фенотип на начальном этапе дифференцирования моноцитов в ДК у больных БА и здоровых доноров. Цель: Исследовать эффекты аденозина на процесс формирования антигенного фенотипа ДК, полученных из моноцитов периферической крови больных БА и здоровых доноров. Материал и методы: В исследование было включено 33 больных БА от 19 до 51 года. Клиническое обследование и диагностику провели сотрудники кафедры факультетской педиатрии с курсом детских болезней лечебного факультета Сибирского государственного медицинского университета (заведующий – член-корр. РАМН, д.м.н., профессор Огородова Л. М.), областного детского центра клинической иммунологии и аллергологии (Областная детская больница г. Томск, главный врач – Сальников В.А.). Диагноз верифицировали на основании критериев ВОЗ, документа GINA (2006 г.). В контрольную группу вошли 21 практически здоровых донора. Статистически значимых различий по возрасту и полу между группами не было. Выделение мононуклеаров из гепаринизированной венозной крови осуществляли методом центрифугирования в градиенте плотности Фиколл-Гипак (ПанЭко, Россия). Выделение моноцитов из мононуклеарной фракции проводили путем центрифугирования клеточной суспензии на градиенте плотности Перколла (SIGMA, США). Культивирование моноцитов проводили в полной питательной среде RPMI в присутствии ИЛ-4 (RD Systems, США) и ГМ-КСФ (RD Systems, США) в СО2-инкубаторе в течение 38 часов. Для стимуляции аденозиновых рецепторов использовали негидролизуемый аналог аденозина NECA (5'-N-этилкарбоксамидоаденозин) (SIGMA, США). Для определения уровня экспрессии поверхностных антигенов, клетки инкубировали с флюорохром-конъюгированными моноклональными антителами: CD1a-FITC (Dako, Дания), CD14-PE, CD209-PerCP-Сy 5.5 (BD Farmgen, США), последующим анализом на проточном цитофлуориметре FACS Calibur (BD Biosciences, США). Статистическую обработку результатов исследования проводили с использованием программы SPSS Statistics 17.0. Для проверки нормальности распределения показателей использовали критерий Шапиро-Уилка; т.к. ни одна из выборок не была распределена по нормальному закону, проверку статистической значимости равенства выборочных средних зависимых выборок осуществлялась с помощью критерия Уилкоксона (различия считали статистически значимыми при р<0,05). Результаты и обсуждение. При стимуляции аденозиновых рецепторов (АР) процент CD14+/CD1a-/CD209+ клеток возрастает с 1,35% (0,59%–5,785%) до 4,12% (1,62%–6,94%) у здоровых доноров (p<0,05) и с 4,16% (0,695%–14,515%) до 6,09% (1,105%–22,205%) (p<0,05) у больных БА. Были обнаружены существенные индивидуальные различия в ответ на стимуляцию АР как у больных БА, так и у здоровых доноров. В соответствии с уровнем индивидуальной реакции на аденозин, мы выделили по две подгруппы, в которые вошли люди с высоким ответом на аденозин (ВОА, подгруппа 1) и низким ответом на аденозин (НОА, подгруппа 2).Стимуляция АР повышала процент этих клеток у людей с ВОА с 5,78% (0,97%–10,72%) до 6,94% (3,0%–22,26%) (p<0,05). Не было обнаружено статистически значимых различий при стимуляции АР людей с НОА с 1,15% (0,14%–4,48%) до 1,53% (0,50%–6,55%) (W=-103, p=0,073). Вывод: Проведенные исследования подтвердили нашу гипотезу о вовлечении аденозина и аденозиновых рецепторов в формирование антигеного фенотипа, характерного для ДК с провоспалительными свойствами. Список литературы: 1. Adenosine receptors: therapeutic aspects for inflammatory and immune diseases / G. Hasko, J. Linden, B. Cronstein, P. Pacher // Nature Rev. Drug Discov., – 2008. – Vol. 7. – P. 759-770. 2. Lung dendritic cells : targets for therapy in allergic disease / B. N. Lambrecht // Curr. Mol. Med., – 2008. – Vol. 8. – P. 393-400. Работа выполнена при поддержке ФЦП 1.5, госконтракт № 02.740.11.5150

Похожие:

	Департамент здравоохранения ханты-мансийского автономного округа югры Минздравсоцразвития РФ №597н, приказом Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 16. 03. 2010 №152н...		Рабочая программа учебной дисциплины огсэ. 03 Немецкий язык по специальности... Фгоу спо «Омский медицинский колледж Министерства образования и социального развития Российской Федерации». Разработчик Загурская...
	Министерства здравоохранения и социального развития РФ ...		Министерства здравоохранения и социального развития РФ ...
	Тест №10. «Законодательство РФ об образовании» в конституции Российской... Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 16. 03. 2010 №152н «О мерах, направленных на формирование...		Утверждена Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 16. 03. 2010 №152н «О мерах, направленных на формирование...
	Требования к кандидатам Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 16. 03. 2010 №152н «О мерах, направленных на формирование...		Рабочая программа по фтизиатрии по специальности 060101 «лечебное дело» Учебные часы по Государственному образовательному стандарту Министерства образования и науки Российской Федерации и Министерства...
	Вич-инфекция/спид в дальневосточном федеральном округе российской... Работа выполнена в фгу «Хабаровский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии Министерства здравоохранения...		Приказ №639 г. Новосибирск Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 16. 03. 2010 №152н «О мерах, направленных на формирование...
	Тест по Конституции РФ 9 класс Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 16. 03. 2010 №152н «О мерах, направленных на формирование...		Рабочая программа по курсу «Обществознание» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 16. 03. 2010 №152н «О мерах, направленных на формирование...
	Тесты по дисциплине «Бюджетная система рф» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 16. 03. 2010 №152н «О мерах, направленных на формирование...		Российской федерации министерство здравоохранения и социального развития российской федерации Дисциплина «Общественное здоровье и здравоохранение, экономика здравоохранения» относится к циклу профессиональных дисциплин
	Тесты в системе оценки знаний студентов Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 16. 03. 2010 №152н «О мерах, направленных на формирование...		Приказ №1385 г. Новосибирск Минздравсоцразвития РФ №597н, приказом Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 16. 03. 2010 №152н...