Иммуномодулирующий эффект гала-вета и его влияние на физиологическое состояние поросят
Скачать 238.44 Kb.
|
На правах рукописи ВОДЯНИЦКАЯ Светлана Николаевна Иммуномодулирующий эффект гала-вета и его влияние на физиологическое состояние поросят 03.00.13 - физиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Белгород 2009 Работа выполнена на кафедре физиологии, фармакологии и ветеринарно-санитарной экспертизы ФГОУ ВПО «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия» Научный руководитель - доктор ветеринарных наук, профессор Резниченко Людмила Васильевна Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Безбородов Николай Васильевич; доктор биологических наук, профессор Фёдорова Марина Зотовна Ведущая организация – Орловский государственный аграрный университет Защита диссертации состоится ________________ 2009 года в «____» часов на заседании диссертационного совета Д 220.004.01 при ФГОУ ВПО «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия» по адресу: 308503, Белгородская область, пос. Майский, ул. Вавилова, д. 1. Тел/факс 8(4722)-39-22-62 С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО Белгородской государственной сельскохозяйственной академииАвтореферат разослан «___» 2009 г. Учёный секретарь диссертационного совета, канд. биолог. наук Ю. Н. Литвинов 1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы. В современных условиях интенсивного ведения свиноводства каждое животное в процессе индивидуального развития, особенно сразу после рождения, подвергается воздействию экологических, климатических, технологических и прочих стресс-факторов, которые изменяют среду его обитания, что способствует ослаблению защитных сил организма и развитию иммунодефицитных состояний. Ослабление естественной резистентности и иммунологической реактивности - одна из главных причин распространения и неблагоприятного течения болезней различной этиологии, поэтому в последние годы значительно возрос интерес исследователей и практических специалистов к проблеме иммуномодуляции (М.А.Костына, 1994). Считают, что развитие большинства болезней обусловлено нарушением функций иммунной системы. Положение усугубляется также возрастающей неэффективностью традиционных средств химиотерапии в связи с ростом устойчивости патогенов к традиционным лекарственным средствам (В.П.Урбан, 1989; В. М. Манько с соавт., 2002; Ю.Н.Фёдоров, 2005). Поэтому диагностика иммунодефицитных состояний животных, а также поиск и разработка препаратов, действующих на функциональную активность отдельных звеньев иммунной системы, являются одной из главных задач современной науки (Г.И.Горшков, 2007). В настоящей работе представлены исследования по изучению возможности применения поросятам иммунотропного препарата гала-вета, являющегося производным фталгидразида. Подобные исследования гала-вета на поросятах другими авторами не проводились. Цель и задачи исследования. Цель настоящей работы состояла в изучении влияния гала-вета на физиологическое состояние поросят разных возрастных групп, выявления оптимальных доз и продолжительности введения препарата для повышения иммунного статуса организма поросят. В соответствии с поставленной целью решались следующие задачи:
Научная новизна работы. Впервые на поросятах выявлено иммуностимулирующее действие гала-вета, сопровождающееся более ускоренным их ростом и повышением сохранности поголовья. Установлено, что препарат вызывает повышение некоторых показателей естественной резистентности организма, положительно влияет на морфологический и биохимический состав крови, приросты молодняка свиней. Определены эффективные дозы препарата и продолжительность его применения. Практическая значимость работы. На основании результатов изучения общефизиологических показателей, морфологических и биохимических исследований крови установлена безопасность применения гала-вета как иммуностимулятора. Препарат предлагается к применению как средство коррекции иммунного статуса при иммунодефицитах поросят. Исследования диссертанта использованы для разработки наставления по применению гала-вета, которое одобрено Ветфармбиосоветом и утверждено Департаментом ветеринарии МСХ РФ. Апробация результатов исследований. Результаты исследований были представлены на международных научно-производственных конференциях «Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения» (Белгород, 2007, 2008), в материалах первого съезда ветеринарных фармакологов России (Воронеж, 2007), на страницах журнала «Ветеринарный врач» (Казань, 2007) и в учёных записках Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н. Э. Баумана (2008), расширенном заседании кафедры физиологии, фармакологии и ветеринарно-санитарной экспертизы Белгородской государственной сельскохозяйственной академии (2008). Основные положения, выносимые на защиту:
Публикации результатов исследований. Материалы диссертации опубликованы в 6 научных статьях, в т.ч. в двух, помещённых на страницах изданий, рекомендованных перечнем ВАК для диссертационных исследований. Структура и объём диссертации. Диссертация представляет собой рукопись компьютерного набора объёмом 127 страниц. Состоит из разделов: введения, обзора литературы, описания материала и методик исследования, результатов исследования и их обсуждения, заключения, выводов, предложений производству. В списке использованной литературы 291 публикация, в т. ч. 215 отечественных авторов. Текст иллюстрирован 22 таблицами. Имеется приложение. 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Работа выполнялась в 2001-2009 гг. на базе Белгородской государственной сельскохозяйственной академии и Белгородской межобластной ветеринарной лаборатории. В опытах использовался гала-вет производства ЗАО ЦСМ «Медикор» (г. Москва). Объектами исследований служили поросята-сосуны 15-суточного возраста, поросята-отъёмыши 30-суточного возраста и поросята на доращивании 50-суточного возраста. Оценку иммунного статуса поросят проводили по клиническому состоянию и продуктивности животных, факторам естественной резистентности организма. В экспериментальной части работы использовано 398 поросят трёх возрастных групп 15-50-суточного возраста; в клинических и научно-производственных испытаниях – 840 голов таких же возрастных групп. Субхроническую токсичность и переносимость гала-вета определяли при инъекционном его введении общепринятым методом (И. В. Саноцкий, 1970). О характере влияния гала-вета на организм поросят судили по клиническим показателям, изменениям белкового, углеводного и минерального обмена, общей неспецифической резистентности организма, интенсивности роста и продуктивности животных (И. М. Карпуть, 1993). Экспериментальные исследования препарата на молодняке проводились в производственных условиях ООО «Возрождение» Красногвардейского района. Опытные и контрольные группы формировали по принципу групп-аналогов по породности, возрасту, живой массе, условиям содержания и кормления. В течение экспериментального периода учитывали: сохранность поголовья – путём ежедневного выявления павших животных с установлением причин падежа; живую массу молодняка – индивидуальным взвешиванием; затраты корма на единицу продукции – расчетным способом. Для биохимических и морфологических анализов кровь брали из краниальной полой вены не менее чем у шести животных из каждой группы. В крови определяли: содержание гемоглобина крови - гемиглобинцианидным методом (И.П.Кондрахин с соавт., 2004), число эритроцитов и лейкоцитов в 1 мм3 – с помощью камеры Горяева, фагоцитарную активность нейтрофилов – путём подсчёта процента фагоцитирующих клеток; по мазкам крови выводили лейкограмму – в описании Г. А. Симоняна с соавт. (1995). В сыворотке крови учитывали общий белок - рефрактометром ИРФ-22 (В. Г. Колб, В. С. Камышников, 1976), общий кальций – комплексонометрическим методом с трилоном Б и мурексидом (А. М. Смирнов с соавт., 1988), неорганический фосфор – колориметрическим методом с ванадат-молибденовым реактивом (в модификации В.Ф. Коромыслова, Л.А. Кудрявцевой, 1973), активность трансаминаз (АлАТ и АсАТ) определяли унифицированным методом Рейтмана-Френкеля, активность лизоцима - нефелометрическим методом (В. Г. Дорофейчук, 1968), общую бактерицидную активность – по И. М. Карпуть (1993). Ветеринарно-санитарную оценку мяса поросят, убитых после применения препарата, проводили по методам, описанным в правилах ветеринарно-санитарного осмотра убойных животных и ветеринарно-санитарной экспертизы мясных продуктов (М. Ф. Боровков с соавт., 2007). Расчёты экономической эффективности применения гала-вета проводили по результатам его производственных испытаний (И.Н.Никитин, 2006). Полученный в опытах цифровой материал подвергнут статистической обработке на персональном компьютере по общепринятым методам вариационной статистики с вычислением аргумента Стъюдента (td) и достоверности разницы между сравниваемыми величинами. Достоверной считалась разница при р0,05 (Г.Ф. Лакин, 1973). 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 3.1. Физико-химическая характеристика иммуностимулятора Гала-вет-5-амино-1,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидрофталазин-2 натрия дион-дигидрат (производное фталгидразида). Препарат представляет собой кристаллический порошок от белого до светло-жёлтого цвета, хорошо растворим в воде. Водные растворы имеют слабощелочную реакцию (рН 7,9-8,1). Гала-вет обладает иммуномодулирующим и противовоспалительным действием. Регулирует биосинтез активных веществ, контролирующих иммунные реакции, увеличивает фагоцитарную активность лейкоцитов, повышает резистентность организма к инфекции. 3.2. Изучение субхронической токсичности и переносимости гала-вета При изучении субхронической токсичности гала-вета на поросятах-отъёмышах установлено, что 20-суточное применение препарата в дозах 82,0; 164,0 и 328,0 мг/кг живой массы (1/20, 1/10 и 1/5 ЛД50) не оказывает отрицательного влияния на физиологическое состояние организма, биохимические показатели крови и не вызывает макроскопических изменений внутренних органов. При изучении переносимости гала-вета на поросятах-отъёмышах установлено, что 20-суточное применение препарата в дозах 5,0; 10,0 и 25,0 мг/кг живой массы (условно-терапевтическая, двух- и пятикратная доза от условно- терапевтической) не оказывает отрицательного влияния на организм животных, биохимические показатели крови и не вызывает макроскопических изменений со стороны внутренних органов, что позволяет длительно применять препарат без осложнений для организма животных. 3.3. Оценка естественной резистентности организма и биохимических показателей крови поросят Учитывались общефизиологические показатели животных и факторы естественной резистентности их организма: гуморальные (бактерицидная и лизоцимная активность сыворотки крови) и клеточные (общее количество лейкоцитов, лейкограмма, фагоцитарная активность), уровень иммуноглобулинов в сыворотке крови. Для проведения исследований были отобраны 3 группы поросят 15-, 30- и 50-суточного возраста, по 50 голов в каждой. Общее состояние всех животных оценивалось как удовлетворительное. При изучении морфологических показателей крови (табл. 1) установлено, что по сравнению с физиологической нормой у поросят 15- и 30-суточного возраста снижено количество лейкоцитов, в лейкограмме – меньше доля лимфоцитов, а также эозинофилов и моноцитов с небольшим увеличением нейтрофилов. К 50-суточному возрасту количество лейкоцитов и показателей лейкограммы нормализовались. Таблица 1 – Морфологические показатели крови поросят
Биохимические показатели крови животных представлены в табл. 2. Таблица 2 – Биохимические показатели крови поросят
При анализе биохимических показателей крови выявлены некоторые колебания в содержании сывороточного белка, что связано с возрастными особенностями, происходящими в организме поросят. Содержание общего белка было снижено во все возрастные периоды до самого отъёма и перехода с молочного питания на концентратное. У поросят всех исследуемых групп содержание гемоглобина в крови, кальция и фосфора в сыворотке крови, активность ферментов переаминирования были в пределах физиологической нормы. В показателях естественной резистентности организма отмечено значительное понижение фагоцитарной активности нейтрофилов во всех исследуемых группах животных, небольшое уменьшение бактерицидной активности сыворотки крови и более значительное снижение содержания иммуноглобулинов, особенно у поросят 15- и 30-суточного возраста. Наши исследования совпадают с данными И. М. Карпуть (1993), согласно которым у поросят в период отъёма в крови заметно снижается содержание эозинофилов, лимфоцитов и иммуноглобулинов. Это отражает приобретённые иммунодефициты, обусловленные потерей защитных факторов и структурными изменениями в иммунной системе. Таким образом, проведённые нами исследования по оценке иммунного статуса разновозрастных групп поросят свидетельствуют, что основные изменения отмечались в 15- и 30-суточном возрасте. В эти периоды были снижены общее количество лейкоцитов в крови, доли лимфоцитов, моноцитов в лейкограмме и содержание иммуноглобулинов в сыворотке. Требовалась коррекция неспецифической резистентности и иммунной реактивности. С этой целью и был применен гала-вет. В следующей серии опытов его влияние на организм поросят сравнивали с иммунофаном. 3.4. Сравнительная оценка влияния гала-вета и иммунофана на физиологическое состояние и прирост поросят-сосунов Для проведения опыта было сформировано пять групп поросят-сосунов 15-суточного возраста, по 20 голов в каждой. Одна группа была контрольной; первой, второй и третьей опытным группам внутримышечно вводили гала-вет из расчёта 3; 5 и 10 мг/кг живой массы, четвертой – иммунофан согласно наставлению по применению. Препараты применяли в течение 5 суток. Схема опыта представлена в табл. 3. Таблица 3 – Схема опыта на поросятах-сосунах
В результате проведённых исследований установлено (рис. 1), что после применения гала-вета в дозе 5,0 и 10,0 мг/кг живой массы среднесуточные приросты превышали контрольные показатели на 13,9 и 11,2% соответственно (р<0,01). После инъекции иммунофана среднесуточные приросты также были выше контрольных показателей (на 8,6%, при р<0,05). Самый низкий прирост был у животных первой (опытной) группы, где применялась минимальная доза гала-вета.  Рис. 1- Среднесуточные приросты поросят. Изучаемые препараты мало изменяли популяционный состав лейкоцитов: доли базофилов и эозинофилов в лейкограммах поросят контрольной и опытных групп варьировали, но эти изменения не имели определённой закономерности, и разница между полученными данными имела низкую статистическую значимость. Незначительные колебания долей сегментоядерных и палочкоядерных нейтрофилов, как и моноцитов, были в пределах физиологической нормы. Что касается лимфоцитов, то применение гала-вета вызвало их повышение, причём максимальное от дозы 5,0 мг/кг живой массы (на 5,3% выше контроля), но эти данные имели низкую статистическую достоверность. Таблица 4 - Показатели естественной резистентности поросят-сосунов
*р<0,05; **р<0,01. Следует отметить, что у всех поросят в начале экспериментального периода доля лимфоцитов была ниже физиологической нормы, что свидетельствовало об иммунодефицитном состоянии организма животных. В конце экспериментального периода доля лимфоцитов в лейкограмме поросят контрольной группы оставалась меньше физиологических значений, в то время как во всех опытных группах после применения препаратов уровень лимфоцитов повысился и достиг физиологической нормы, характерной для животных данной возрастной группы. При изучении показателей естественной резистентности организма наиболее эффективным оказался гала-вет в дозах 5,0 и 10,0 мг/кг живой массы. По сравнению с контролем (табл. 4) он существенно и в наибольшей мере повышал фагоцитарную активность лейкоцитов (на 35,1 и 29,6%, р<0,05) и содержание в сыворотке крови иммуноглобулинов (28,9 и 28,0, р<0,01-0,05). Иммунофан также вызывал существенное повышение фагоцитарной активности лейкоцитов и уровня иммуноглобулинов, но уступал по этим показателям гала-вету, применяемому в дозе 5,0 мг/кг. 3.5. Сравнительная оценка влияния гала-вета и иммунофана на физиологическое состояние и прирост поросят-отъёмышей Для проведения опыта было сформировано пять групп поросят-отъёмышей 30-суточного возраста, по 20 голов в каждой. Животные находились в одинаковых условиях кормления и содержания. Одна группа была контрольной; первой, второй и третьей (опытным) группам внутримышечно вводили гала-вет из расчёта 3; 5 и 10 мг/кг живой массы, четвертой – иммунофан согласно наставлению по применению. Препараты применяли в течение 3 суток. Животные находились под наблюдением в течение 30 суток. Установлено (рис. 2), что после применения гала-вета в дозах 5,0 и 10,0 мг/кг увеличение живой массы поросят 2-й и 3-й опытных групп превосходило контроль на 18,3 и 13,1% (в обоих случаях р<0,05). В этих же группах были самые высокие среднесуточные приросты животных, которые превышали показатели контрольной группы на 30,4 и 23,5% (р<0,01).  Рис. 2 - Живая масса поросят Под влиянием гала-вета восстанавливался уровень лимфоцитов в крови до физиологической нормы. По другим показателям также подтвердился приоритет повышенных доз гала-вета (табл. 5). После внутримышечного введения 5,0 и 10,0 мг/кг по сравнению с контролем наблюдалось повышение содержания иммуноглобулинов (на 22,1 и 22,9%, р<0,05) и фагоцитарной активности нейтрофилов (на 28,0 и 34,3%, р<0,05), но при этом не изменялась лизоцимная и бактерицидная активность сыворотки крови. Введение иммунофана по сравнению с контролем также способствовало существенному повышению уровня иммуноглобулинов и фагоцитарной активности лейкоцитов (на 21,7 и 29,5% , р<0,05). Ветеринарно-санитарная оценка мяса поросят проведена сразу после их убоя в конце экспериментального периода. По результатам изучения химического состава мяса мы не получили каких-либо негативных его изменений как после применения иммунофана, так и гала-вета. Производственные испытания подтвердили высокую эффективность применения гала-вета поросятам-сосунам и отъёмышам. Таблица 5 – Показатели естественной резистентности организма поросят
*р<0,05; **р<0,01. Во всех случаях отмечали увеличение среднесуточных приростов и повышение жизнеспособности животных. Сохранность составила 95-100 % против 80-90 в контроле. Как и в эксперименте, наиболее эффективной оказалась доза 5,0 мг/кг живой массы. ВЫВОДЫ
Практические предложения Гала-вет предлагается применять для повышения естественной резистентности организма и стимуляции роста поросят. Рекомендуемая доза гала-вета для внутримышечных инъекций – 5 мг/кг ежедневно в течение 3-5 суток. Список работ, опубликованных по теме диссертации 1. Водяницкая С.Н. Влияние гала-вета на некоторые показатели естественной резистентности организма поросят/С.Н.Водяницкая//Мат-лы XI международ. научно-производ. конф. – Белгород, 2007. – С.79. 2. Водяницкая С.Н. Эффективность использования гала-вета при колибактериозе поросят/С.Н.Водяницкая, В.И.Горматин//Бюл. научн. работ/БелГСХА-Вып.8. – Белгород, 2007. – С.56-59. 3 Водяницкая С. Н. Новый препарат в профилактике иммунодефицитных состояний животных/ С. Н. Водяницкая, А. Н. Ахапкин, Л. В. Резниченко// Мат-лы первого съезда ветеринарных фармакологов России. – Воронеж, 2007. – С.179-184.
Формат 60х84, 1/16. Усл. печ. л. 1,0. Заказ № 1183. Тираж 100 экз. Типография БВЦ | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Добавить документ в свой блог или на сайт
Похожие:
 | Физиологическое состояние и продуктивные качества цыплят-бройлеров... Работа выполнена в фгоу впо «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия» | | Tyler S. Lorig, Ph. D. Ruth Parmly Professor Тема: «Физиологическое взросление и его влияние на формирование познавательных и личностных качеств ребёнка» |
| По горизонтали: Растение, из листьев которого производят краситель Тема: «Физиологическое взросление и его влияние на формирование познавательных и личностных качеств ребёнка» | | Лингвистика Грызина О. В. Варианты оценки фразеологизмов с семой вероятности Дроботун А. В Тема: «Физиологическое взросление и его влияние на формирование познавательных и личностных качеств ребёнка» |
 | Анкета для родителей Что изменилось в вашем ребенке за последнее время? Тема: «Физиологическое взросление и его влияние на формирование познавательных и личностных качеств ребёнка» | | Изучить мозг художника Ученые и художники рассказали, как устроено творчество Тема: «Физиологическое взросление и его влияние на формирование познавательных и личностных качеств ребёнка» |
| Стратегии выхода на рынки России и Франции компании Даймлер Эффект страны производства и его влияние на объем продаж с. 15 | | Рабочая программа разработано в соответствии с Госу дарственными... Тема: «Физиологическое взросление и его влияние на формирование познавательных и личностных качеств ребёнка» |
| 2 декабря (пятница) в 16. 10, в зале №5 Инь и Янь. Тайцзицюань оказывает положительное влияние на состояние человека в целом, на его здоровье, мироощущение, контакты с внешним... | | Мирзакарим норбеков Целью дисциплины является изучение влияния комплекса факторов внешней среды на физиологическое состояние и продуктивные качества... |
| Исследовательская работа на тему: Фотоэлектромагнитный эффект и его... Фотоэлектромагнитный эффект и его применение в устройствах функциональной электроники | | Влияние натрия нуклеината на уровень естественной резистентности... Работа выполнена в фгоу впо «Брянская государственная сельскохозяйственная академия» |
| Реферат на тему: «Современное состояние гидро- и ветроэнергетики.... Современное состояние гидроэнергетики, её место в энергетике и влияние на окружающую среду | | Агро-дайджест Яровой сев завершен на 25,1 % Целью дисциплины является изучение влияния комплекса факторов внешней среды на физиологическое состояние и продуктивные качества... |
| Юрий мороз «Бизнес. Пособие для гениев» Целью дисциплины является изучение влияния комплекса факторов внешней среды на физиологическое состояние и продуктивные качества... | | Программа по дисциплине сд. Ф. 04: «Зоогигиена с основами проектирования... Целью дисциплины является изучение влияния комплекса факторов внешней среды на физиологическое состояние и продуктивные качества... |
