Стрептококкоз крупного рогатого скота в краснодарском крае
Скачать 1.52 Mb.
|
3.6. Обсуждение результатов исследований Специфическая профилактика инфекционных заболеваний животных является одной из основных реально осуществляемых мер контроля эпизоотических процессов в практике (С.И. Джупина, 2004). Свои исследования мы планировали и проводили начиная с оценки эпизоотической обстановки по инфекционным бактериальным заболеваниям крупного рогатого скота и нозологического профиля в Краснодарском крае в течение последних 10-ти лет (2004-2013 гг.). При изучении эпизоотической обстановки в ретроспективном анализе инфекционной патологии крупного рогатого скота по статистическим данным государственного управления ветеринарии Краснодарского края, ГБУ «Кропоткинская краевая ветеринарная лаборатория». и результатам собственных исследований за период с 2004 по 2013 годы регистрировали заболеваемость крупного рогатого скота разными бактериальными инфекционными болезнями, чаще регистрировали стрептококкоз, колибактериоз, псевдомоноз, стафилококкоз, реже сальмонеллез, злокачественный отек, эмфизематозный карбункул, пастереллез, инфекционная энтеротоксемия, некробактериоз, лептоспироз, туберкулез, бруцеллез, сибирская язва (рис. 2). Проведя ряд исследований было выявлено, что в Краснодарском крае эпизоотическая обстановка по бактериальным инфекционным болезням у крупного рогатого скота напряженная. Данный вид животных болеет разными инфекционными заболеваниями, превалируютют колибактериоз, стрептококкоз, псевдомоноз. В нозологическом профиле инфекционных бактериальных болезней на первом месте стоит эшерихиоз (50%), затем стрептококкоз (16,4%), псевдомоноз (14,1%), стафилококкоз (11,4%), сальмонеллез (3,8%), злокачественный отек (1,8%), пастереллез (0,7%), инфекционная энтеротоксемия (0,5%), бруцеллез (0,5%), некробактериоз (0,3%), туберкулез и эмфизематозный карбункул по 0,2%, лептоспироз и сибирская язва по 0,05% (рис. 3). Анализ результатов проведенных исследований показывает, что основными причинами появления и распространения инфекционных болезней в Краснодарском крае являются: нарушение нормативных требований по кормлению, содержанию животных и технологии животноводства, несанкционированная реализация продуктов животноводства без должного контроля. Поэтому необходимо для снижения эпизоотической напряженности по экономически значимым инфекционным болезням разрабатывать и строго выполнять противоэпизоотические мероприятия. Главное значение имеют специальные меры, направленные на своевременную диагностику и вакцинацию восприимчивых животных. Полученные нами данные согласуются с результатами исследователей Ю.В Сафарова, С.А. Джульфаева (1964); В.С. Слугина (1974); Е.А. Клепининой (1987); А.А. Конопаткина, В.А. Есепенок, Е.А. Клепининой (1990); Э.М. Мешева (1993); Р.А. Кадымова и соавт. (1990; 1992, 1998); Ю.Ф. Мишанина, Е.Н. Толмасовой (2001); Ю.М. Ибрагимова (2001) при изучении заразных заболеваний животных в разных частях нашей страны. При изучении превалентности вспышек стрептококкоза у крупного рогатого скота за последние 10 лет установлено, что за период 2004-2013 гг. было зарегистрировано 2321 вспышка заболевания на фермах разного типа в 20 районах Краснодарского края, отмечалась тенденция к снижению превалентности вспышек стрептококкоза в животноводческих хозяйствах края. Вспышки стрептококкоза протекали эпизоотически. За период 2004-2007 гг. превалентность вспышек у крупного рогатого скота стрептококкоза в хозяйствах края имела тенденцию к повышению, с 2008-2013 гг. наблюдалось снижение вспышек заболевания, это, по-видимому, связано со снижением численности поголовья животных, выполнением ветеринарно-санитарных мероприятий в хозяйствах края. Ежегодные совокупные показатели инцидентности вспышек заболевания сопровождались ростом. Вспышки стрептококкоза характеризовались эпизоотическим типом, что подтверждается широтой превалентности заболевания (20 административных района территории края), высокой частотой заноса возбудителя на фермы, длительностью периода неблагополучия (10 лет). При изучении территориальных границ стрептококкоза крупного рогатого скота в районах Краснодарского края установлено, что распространение стрептококкоза имеет выраженные регионарные особенности, из 20 районов наиболее часто стрептококкоз регистрируется у крупного рогатого скота в 8 районах: в Кавказском- 34%, Ейском- 18%, Кущевском- 8%, Тимашевском- 6%, Лабинском, Славянском и Павловском районах по 5%, г. Краснодаре- 4%, в других оставшихся районах от 1 до 2% (рис. 4, 5). Многообразие стрептококковых культур, выделяемых в хозяйствах данных районов сигнализирует о нестабильности погоды, особенно в демисезонные периоды (осень, весна), и зимой а так же о высоком уровне влажности, вследствие значительного количества осадков. Следовательно, можно сказать, что погода является способствующим фактором в динамике заболеваемости стрептококкозом. При изучении у крупного рогатого скота вспышек эпизоотий стрептококкоза в течение последних 10 лет в разных животноводческих хозяйствах Краснодарского выделялись разные виды патогенных стрептококков (рисунок 6). В результате установлено, что эпизоотии стрептококкоза крупного рогатого скота в хозяйствах Краснодарского края вызывали 10 видов патогенных возбудителей: Str.pneumoniae, Str.septicum, Str.pyogenes, Str.uberis, Str.bovis, Str.vestibularis, Str.zooepidemicus, Str.salivarus, Str.mutans, Str.gallolyticus, доминировал Str. pneumoniae. При изучении сезонности стрептококкоза КРС на животноводческих фермах края установлено, что стрептококкозом подвержены заболеванию животные всех: с 1-10 дней 37%, с 10-20 дней – 33%, в 20-60 дней – 14%, в 60-120 дней - 10%, взрослые – 6%. Взрослые животные заболевают реже, чем молодняк, но чаще они являются бактерионосителями (рис. 7). Постановку диагноза на стрептококкоз проводили на основании эпизоотологических данных, клинических признаков, патоморфологических изменений, с обязательным подтверждением лабораторной диагностикой. Лабораторные исследования включала результаты бактериологического исследования. Бактериологические исследования включали выделение возбудителя от больных животных в исходном материале согласно «Методическим указаниям по лабораторной диагностике стрептококкоза животных», утвержденных 25.09.1990 г. ГУВ СССР, «Методическим указаниям по бактериологической диагностике смешанных кишечных инфекций» (Москва, 2000) с использованием биохимических тест-систем фирмы «Pliva-Lachema Diagnostika»: NEFERMtest 24, ENTEROtest 24, STREPTOtest 16, EN-COCCUStest. Для определения в сыворотке крови животных титра специфических антител, проводили постановку реакции преципитации (РП) в капиллярах, используя методические указания по лабораторной диагностике стрептококкоза животных (М., 1990), утвержденные Главным управлением ветеринарии (ГУВ). Полученные нами данные согласуются с исследованиями Э.М. Мешева (1993), Ю.М. Ибрагимова (2001). При изучении клинического проявления стрептококкоза у крупного рогатого скота было установлено, что клинически болезнь протекает сверхостро, остро, подостро и хронически. Болеют животные всех возрастов, начиная со 2-3-го дня от рождения, и до 120 дней, а так же взрослое поголовье. Болезнь проявляется септицемией, конъюнктивитами, пневмонией, артритами, энтеритами. У новорожденных отмечают воспаление пупочного канатика - омфалит. Регистрируют болезнь в течение всего года, чаще всего в период с декабря по апрель. У взрослых животных наблюдаются поражения венчика копыт, воспаление межкопытной щели, пододерматиты, дерматиты, абсцессы, маститы, эндометриты и другие (рис.9-18). При стрептококкозе отмечали основные патологоанатомические и гистологические изменения: у 1-4-месячных телят более часто отмечали наличие серозно-катаральньной пневмонии, геморрагической пневмонии (35%), спленита (4 %), серозно-катарального гастроэнтерита и геморрагического гастроэнтерита (10%), гепатита (25%), артрита (10%), миокардита (6%). У взрослых животных находили артриты, серозно-катаральную пневмонию, геморрагическую пневмонию, серозно-катаральный гастроэнтерит, геморрагический гастроэнтерит, поражения венчика копыт, воспаление межкопытной щели, пододерматиты, дерматиты, абсцессы, маститы, эндометриты (рис 19-23). При гистологическом исследовании были выявлены изменения в сердечной мышце и печени при стрептококкозе крупного рогатого скота. В препарате сердечной мышцы (рис.25) выявлены множественные кровоизлияния между волокон. В препарате печены заметны признаки дистрофических изменений, наблюдаются отдельные гепатоциты, балочное строение не выявлено, (рис. 24), В препарате лёгкого отдельные альвеолы спавшиеся, другие заполнены войлокообразной массой (фибрином), отмечено большое колличество экссудата, содержащего большое количество эритроцитов и нейтрофилов, и заполняющего просветы мелких бронхов и альвеол. Отмечена выраженная десквомация, а так же дистрофия клеток альвеолярного эпителия (рис.26). От павших и больных животных, в ходе проведения лабораторно-диагностических исследований, было выделено 112 разных видов микроорганизмов рода Streptococcus, доля которых составила (%): Str.pneumoniae- 78%, Str.septicum- 7%, Str.pyogenes- 6%, Str.uberis- 2%, Str.bovis- 1%, Str.vestibularis- 1%, Str.zooepidemicus- 1%, Str.salivarus- 2%, Str.mutans- 1%, Str.gallolyticus- 1%. Доминирующим среди стрептококков был Str. pneumoniae- 78% (рисунок 29). Самой надежной защитой животных от инфекционных болезней является их вакцинация. Учитывая вышесказанное, создание препаратов, для осуществления специфической профилактики стрептококкоза крупного рогатого скота, является важной задачей. Противострептококковая вакцина для крупного рогатого скота на территории Росси не производится. Однако, данная болезнь широко регистрируется в разичных регионах страны и в том числе в Краснодарском крае. По мнению многих исследователей, вакцины, которые изготовлены из штаммов культур, полученных в эпизоотическом очаге, являются специфичными, высокоиммуногенными препаратами, способствуют формированию активной иммунной защиты. (Ахмедов А.М., 1983; Хакимова К.М., Савардинова А.К., 1985; Вачугов В.И., 1989; Кадымов Р.А. и соавт., 1990; Маннапова Р.Т. , 1998; Л.В. Шевченко, 2008; А.А. Шевченко, Л.В. Шевченко, 2010; О.Ю. Черных, 2010). Всвязи с этим, проводимые нами исследования были ориентированы на создание и изучение противострептококковых вакцин, а так же на борьбу с данным заболеванием. Нами из 112 исследованных культур микроорганизмов, полученных от крупного рогатого скота в животноводческих хозяйствах Краснодарского края, изучались различные свойства наиболее часто выделяемых стрептококков: культуральные, биохимические, тинкториальные, биологические, морфологические, серологические. Всвязи с проведёнными исследованиями, и на основании полученных результатов по стабильности, иммуногенности и антигенности, отобрали для разработки вакцины штамм Str.pneumoniae Для того, чтобы начать работу по констуированию вакцины, было необходимо разработать и отработать технологическую методику для её производства, а так же оценить её эффективность. Ранее в России в 1943г была разработана К.П. Чепуровым формолвакцина для борьбы со стрептококкозом у телят, ягнят и поросят из штамма Str. septicum. Позднее, в 1956 году, А.Г. Малявиным была предложена вакцина поливалентная для борьбы с диплококковой инфекцией, сальмонеллезом и пастереллёзом свиней. Однако, в скотоводческих хозяйствах регистрируются другие различные патогенные виды микроорганизмов рода Streptococcus. Исходя из этого, возникла необходимость разработки методики производства и изготовления новой противострептококковой вакцины, эффективность которой будет подтверждена в условиях хозяйств нашего края. Одним изключевых моментов стал выбор инактиватора. Он должен сохратять иммуногенность используемой культы, но подавлять её патогенность. Технологию режима инактивации отрабатывали путём внесения растворов формалина различной концентрации (0,1- 0,4%) в выращенную культуру возбудителя стрептококкоза. Концентрация клеток микроорганизмов штамма Str.рneumoniae в питательной среде при этом должна составлять не менее 4 миллиардов в 1 см3 по оптическому стандарту ГИСК имени Тарасевича. После чего культуру с инактиватором при температурных режимах 37°С и 22°С (±2°С) оставляли на 15 суток, иногда перемешивая содержимое (рис. 30, 31, 32). Для подтверждения полноты проведения инактивации возбудителя производили высевы на стерильные среды: мясо-пептонный бульон, мясо-пептонный агар, окрашивание по методике Грама. При необходимости использовали заражение возбудителем штамма Str.рneumoniae лабораторных животных, за которыми вели наблюдение 10 суток (табл. 1). В результате проведённой работы нами была создана методика производства инактивированной противострептококковой вакцины для крупного рогатого скота. Отработана кинетика инактивации культуры возбудителя штамма Str.рneumoniae, которая основывается на синергетическом действии различных инактиваторов. Методика совместного действия температуры и химического вещества позволила снизить количество используемого формалина при добавлении к культуре возбудителя. Уменьшилось и время, потраченное на проведение инактивации в несколько раз в сравнении с ранее используемой методикой. Подобные результаты были получены Н.Б. Бушуевой, М.Я. Ярцевым (1997), М.Я. Ярцевым и соавт. (1998) при инактивации сальмонелл и пастерелл при изготовлении вакцин, Л.В. Шевченко (2008) при инактивации патогенных стрептококков нутрий. Используя разработанную методику производства противострептококковой вакцины, были созданы опытные серии препарата на основе штамма Str.рneumoniae: формолвакцина, адсорбированная на гидрате окиси алюминия; формолвакцина, содержащая масляный адъювант; формолвакцина без адъюванта. Предварительно отработали прививочную дозу. Она составила по оптическому стандарту ГИСК имени Тарасевича 1,0 миллиард микробных клеток. Эта доза обеспечивает 100%-ую защиту иммунизированных, при заболевании и гибели непривитых животных от вирулентного возбудителя стрептококкоза штамма Str.pneumoniae (табл. 2). При определении безвредности и иммуногенных свойств опытных серий вакцин проводили прививку белых мышей и через 14 суток осуществлями заражение возбудителем штамма Str.рneumoniae. В опыте участвовали три изолированные группы лабораторных животных, в каждой из которых применялась определённая опытная серия вакцины. Доза каждого препарата была одинаковой - 0,5 см³, введение – внутримышечное. При применении противострептококковой гидроокисьалюминиевой формолвакцины уровень иммунной защиты составил 80%, местных и общих изменений после иммунизации выявлено не было, как и при использовании ГОА вакцины без адъюванта, однако защита животных была ниже – 60%. У белых мышей, которым применялась ГОА вакцина, содержащая масляный адъювант, 2-3 дня наблюдали хромоту, уровень иммунной защиты оказался равен 60%. Новая вакцина прошла производственные испытания на крупном рогатом скоте различных возрастных групп. Взрослые животные вакцинировались двукратно в дозе 5,0 см3, внутримышечно. Интервал между инъекциями составил 7-14 дней. Спустя 14 суток после ревакцинации было отмечено формирование активной иммунной защиты против исследуемого возбудителя (табл. 3 и 4). Разработанная нами методика производства противострептококковой инактивированной ГОА-формолвакцины для крупного рогатого скота, позволяет создавать безвредный и высокоиммуногенный биологический препарат, который позволяет создавать в организме животных надёжную иммунную защиту. Сохранность лабораторных животных против штамма Str.pneumoniaе после однократного применения составляет 80%, а после двукратного - 100%. Более высокие показатели отмечены при иммунизации животных гидроокисьалюминиевой формолвакциной против стрептококкоза, в сравнении с аналогичными вакцинами с масляным адъювантом и без него, что согласуется с результатами исследований многих ученых (Романов Е.А. и соавт., 2000; Гаффаров Х.З. и соавт., 2003; Белова Н.Б., 2005; Сергеев В.А. и соавт., 2006; Шевченко Л.В., 2008; Шевченко А.А., 2009; Черных О.Ю., 2010). При использовании противострептококковой вакцины в производственных условиях на фермах хозяйств Тимашевского, Кореновского и Тихорецкого районов иммунизации подверглись телята 7-8-дневного и 30-тидневного возраста и взрослые коровы. Телята вакцинировались внутримышечно, двукратно, интервал между инъекциями составил 10 суток. Доза при первом введении препарата составила 1,0 см³, а при ревакцинации - 1,5 см³. Уровень иммунной защиты против возбудителя стрептококкоза крупного рогатого скота штамма Str. рneumoniae, через 14 дней после ревакцинации, у 7-8- дневных телят составил 86,7 - 95,4%, а у 30-тидневных - 90,0 - 96,7%. Титр специфических антител к штамму Str. рneumoniae, который был определён спустя 9 месяцев после ревакцинации составил 1:16-1:64 (табл. 6). В каждом хозяйстве иммунизировали животных разных возрастов. Колличество привитых составляло от 100 – до 700 голов. Инъекцировали препарат двукратно, интервал между введениями составлял 7-14 дней. Взрослым коровам вводили вакцину внутримышечно в дозе 5,0 см3. Наблюдение за иммунизированными животными сохраняли 9 мес. Через 30 дней после ревакцинации титр иммунных антител в сыворотке крови коров штамму Str. рneumoniae составил 1:16 - 1:128, а спустя 9 месяцев - 1:16-1:64 (табл.7). Новая противострептококковая инактивированная вакцина для крупного рогатого скота в производственных условиях показала себя как безвредный, высоиммуногенный биологический препарат. Использование разработанных методов контроля на стерильность, безвредность, иммуногенность, проведённых на белых мышах, позволяет выпускать безопасную, высокоиммуногенную и стерильнуювакцину против стрептококкоза крупного рогатого скота. Предложенный метод контроля качества опробован и признан эффективным при производстве трёх серий препарата, а это более 30 тысяч доз (табл. 5). Проверка вакцины на стабильность показала, что иммуногенность сохраняется не менее 12 месяцев со дня выпуска при соблюдении условий хранения. Хранится вакцина при 2–10°С в тёмном сухом месте. В этом случае она способствует формированию активной иммунной защиты к штамму Str.pneumoniaе, которая составляет не менее 80% Выпускается противострептококковая вакцина для на ФГУП «Армавирская биофабрика», предприятие расположено на территории Краснодарского края. На вакцину разработана и утверждена в установленном порядке нормативно-техническая документация на опытно-промышленное производство (регламент по изготовлению и контролю, ТУ, наставление по применению). Исходя из результатов исследований, разработанная вакцина показала себя как безвредный, ареактогенный, высокоиммуногенный препарат для профилактики и борьбы со стрептококкозом крупного рогатого скота. На разработанное изобретение было получено два патента РФ: : «Способ изготовления вакцины ассоциированной против стафилококкоза и стрептококкоза крупного рогатого скота», №2406532 от 20.12.2010 г, «Вакцина ассоциированная против стафилококкоза и стрептококкоза крупного рогатого скота» №2406533 от 20.12.2010 г. Используя методы контроля, отработанные на белых мышах, позволяют производить безвредную и высокоиммуногенную вакцину. Вакцина успешно прошла производственные испытания в животноводческих хозяйствах, расположенных в различных районах Краснодарского края, признанных неблагополучными по стрептококкозу. Таким образом, с учетом теоретических предпосылок конструирования вакцинных препаратов, преимущества инактивированной вакцины, анализа эпизоотической обстановки в Краснодарском крае по инфекционным заболеваниям крупного рогатого скота, были выделены и изучены, тинкториальные, морфологические, культуральные, биологические и антигенные свойства штамма Str.pneumoniaе - вирулентного возбудителя стрептококкоза КРС. Разработанная нами вакцина показала себя как безвредный и высокоиммуногенный препарат для специфической профилактики стрептококкоза на неблагополучных по данному заболеванию животноводческих фермах, где доминирует штамм Str.pneumoniaе. |
Похожие:
 | Перечень лабораторных исследований, проводимых бу чр "Чувашская республиканская... Ррс свиней, ротавирусную инфекцию крупного рогатого скота, коронавирусную инфекцию крупного рогатого скота, стельность коров | | Лейкоз лейкоз крупного рогатого скота Лейкоз крупного рогатого скота – хроническое вирусное заболевание, которое протекает бессимптомно или проявляется лимфоцитозом и... |
| Реферат Тема: Животноводство в годы ВОВ. Работу В украинской сср поголовье крупного рогатого скота уменьшилось на 44%, овец и коз — на 74, свиней — на 89, лошадей — на 70%. В районах... |  | Бизнес-план Создание фермы по разведению крупного рогатого скота для получения мяса 2011 год Концепция проекта предусматривает создание фермы по разведению крупного рогатого скота для получения мяса в Алматинской области |
| Адаптация чёрно-пёстрого скота разных эколого-генетических типов в условиях ростовской области Акклиматизационно-адаптивные и продуктивные качества крупного рогатого скота | | Значение ассоциаций микроорганизмов в этиологии и профилактике инфекционных... ... |
| 1 обзор литературы Особенности лейкоза крупного рогатого скота и современные методы его диагностики | | Реферат Совершенствование схемы профилактики и лечения инфекционного... В процессе увеличения поголовья герефордского скота на территории Челябинской области наметилась тенденция к широкому распространению... |
| Постановление О докладе Уполномоченного по правам ребенка в Краснодарском крае за 2009 год Собрание Краснодарского края отмечает, что деятельность Уполномоченного по правам ребенка в Краснодарском крае (далее также — Уполномоченный)... | | Методические рекомендации по диагностике, лечению и профилактике... Рекомендации разработаны авторским коллективом сотрудников фгу «фцтрб-вниви» и Главного управления ветеринарии км рт |
| Рабочий план по эпизоотологии и инфекционным болезням для студентов... Диагностика и мероприятия при чуме крупного рогатого скота, злокачественной катаральной горячке | | «Мероприятия по улучшению воспроизводства крупного рогатого скота... Место проведения: «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К. И. Скрябина» |
| Формирование мясной продуктивности молодняка крупного рогатого скота... Лазаренко Виктор Николаевич, доктор сельскохозяйственных наук, профессор кафедры генетики и разведения сельскохозяйственных животных... | | Сравнительные физико-химические и морфологические свойства трубчатых... «Новоубеевская основная общеобразовательная школа» Дрожжановского муниципального района Республики Татарстан |
| Рабочая программа учебной дисциплины физиология крупного рогатого... Проректор по учебной работе, заместитель председателя умо по агрономическому образованию д т н | | Вирусная диарея Вирусная диарея болезнь слизистых (вд вс) крупного рогатого скота, впервые обнаружена в США п. Олофсоном и Фоксом в 1946 г. Болезнь... |
