Государственный стандарт качества лекарственного средства общая фармакопейная статья
Скачать 189.26 Kb.
|
| МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ Масс-спектрометрия ОФС Вводится впервые Метод масс-спектрометрии – это метод качественного и количественного анализа лекарственных средств, основаный на прямом измерении отношений массы к числу элементарных положительных или отрицательных зарядов ионов (m/z) в газовой фазе, полученных из испытуемого вещества. Заряд может быть обусловлен присоединением или потерей электрона, протона, катиона, или аниона, в зависимости от условий ионизации и состава образца. Данное отношение выражается в атомных единицах массы (а.е.м.) или в дальтонах (Да). Ионы, образовавшиеся в ионном источнике прибора, ускоряются и перед попаданием в детектор разделяются с помощью масс-анализатора. Эти процессы происходят в камере, в которой насосная система поддерживает вакуум от 10-3 до 10-6 Па. Сигнал, отвечающий иону, представлен несколькими пиками, соответствующими статистическому распределению различных изотопов этого иона. Такой сигнал называется изотопным профилем (для небольших молекул), а отдельный пик, представляющий наиболее распространенный изотоп для атома - моноизотопным пиком. Результирующий масс-спектр является графиком зависимости количества различных ионов от отношения m/z. При анализе сложных молекул возникает необходимость в двух и более последовательных масс-анализаторах для расшифровки молекулярной структуры. В приборе МС/МС (MSn) (тандемный масс-спектрометр) масс-анализаторы выстраивают последовательно друг за другом. Из ионов, разделенных в первом масс-анализаторе, отбирают неидентифицированные по своему строению частицы (родительские ионы) и разбивают их на более мелкие фрагменты столкновением с атомами инертного газа (диссоциация, активированная соударением - CID) или лазерным излучением. Этот процесс реализуется перед вторым масс-анализатором, при помощи которого анализируют продукты распада (дочерние ионы). Масс-спектрометрический анализ дает важную качественную (определение молекулярных масс, структуры фрагментов определяемых молекул) и количественную (с использованием внешнего или внутреннего стандартов) информацию с пределом обнаружения от пикомоля (10-12) до фемтомоля (10-15). Разновидности метода отличаются: способом ввода образца в прибор, механизмом образования ионов (типом ионного источника) и способом разделения ионов по отношению массы к заряду (типом масс-анализатора). Технические характеристики масс-спектрометров. Важнейшими техническими характеристиками масс-спектрометров являются скорость сканирования, чувствительность, динамический диапазон, разрешение. Скорость сканирования. Масс-анализатор пропускает ионы с определенным соотношением массы и заряда (m/z) в определенное время (кроме многоколлекторных приборов, ионно-циклотронного резонанса, орбитальной ловушки ионов). Для того, чтобы проанализировать все ионы по отношению m/z масс-анализатор должен сканировать все значения, нужные для пропускания к детектору всех интересующих ионов. Скорость развертывания поля называется скоростью сканирования, которая должна быть максимальна (соответственно, время сканирования должно быть как можно меньше), поскольку масс-спектрометр должен зарегистрировать сигнал за время выхода хроматографического пика, которое может составлять несколько секунд. При этом, чем больше масс-спектров будет измерено за время выхода хроматографического пика, тем точнее будет описан хроматографический пик, и тем меньше вероятность пропустить его максимальное значение. С помощью математической обработки можно легко определить индивидуальность пика и "доразделить" его с помощью масс-спектрометрии. Самым медленным масс-анализатором является магнит, минимальное время его сканирования, без особой потери чувствительности, составляет доли секунды. Квадрупольный масс-анализатор может разворачивать спектр за десятые доли секунды, ионная ловушка и линейная ионная ловушка - быстрее, а масс-спектрометр ионно-циклотронного резонанса - медленнее. Любое сканирование во всех перечисленных типах масс-анализаторов является компромиссным – с увеличением скорости сканирования понижается чувствительность, т.к. меньше времени тратится на запись сигнала на каждое массовое число. Для типичных методов анализа скорости сканирования квадрупольного анализатора или ионной ловушки оказывается достаточно для получения удовлетворительных результатов. В то же время, для высокопроизводительного анализа сложных молекулярных систем желательно использовать время-пролетный масс-спектрометр, который способен записывать масс-спектры со скоростью 40 000 спектров в секунду! Разрешение. Разрешение, или разрешающая способность масс-спектрометра, определяется как возможность масс-анализатора разделять ионы с близкими массами. Очень важно определить массы ионов максимально точно, это позволяет вычислить атомный состав иона, или идентифицировать молекулу путем сравнения с базой данных, сократив число возможных кандидатов с тысяч и сотен до единиц или одного единственного. Для магнитных масс-анализаторов, в которых расстояние между пиками масс-спектра не зависит от масс ионов, разрешение представляет собой величину равную M/ΔM. Эта величина, как правило, определяется по 10%-й высоте пика. Так, например, разрешение 1000 означает, что пики с массами 100.0 а.е.м. и 100.1 а.е.м. отделяются друг от друга, то есть не накладываются вплоть до 10 % высоты. Для анализаторов, в которых расстояние между пиками меняется в рабочем диапазоне масс (чем больше масса, тем меньше расстояние), таких как квадрупольные анализаторы, ионные ловушки, время-пролетные анализаторы, строго говоря, разрешение (M/ΔM) имеет другой смысл: оно характеризует конкретную массу. Поэтому эти масс-анализаторы характеризуют по ширине пиков – величине, остающейся постоянной во всем диапазоне масс. Ширина пиков измеряется на уровне 50 % их высоты. Для таких приборов ширина пика на полувысоте, равная 1, является неплохим показателем и означает, что такой масс-анализатор способен различить номинальные массы, отличающиеся на атомную единицу массы практически во всем его рабочем диапазоне. Номинальной массой или массовым числом называют ближайшее к точной массе иона целое число в шкале атомных единиц массы. Например, масса иона водорода Н+ равна 1.00787 а.е.м., а его массовое число равно 1. Масс-анализаторы, которые измеряют номинальные массы, называют анализаторами низкого разрешения. Масс-спектрометры с двойной фокусировкой (магнитной и электростатической), ионно-циклотронного резонанса относятся к приборам среднего или высокого разрешения. Типичным разрешением для магнитного спектрометра является величина, превышающая 60 000, а работа на уровне разрешения 10 000 – 20 000 является рутинной. На масс-спектрометре ионно-циклотронного резонанса при анализе образца с массой около 500 а.е.м. можно легко достичь разрешения 500 000, что позволяет проводить измерения масс ионов с точностью до четвертого – пятого знака после запятой. Разрешения в несколько тысяч можно добиться при использовании время-пролетных масс-анализаторов, однако, исследуя образцы с большой молекулярной массой, для которых этот тип приборов имеет преимущество перед другими анализаторами, этого разрешения хватает лишь для того, чтобы измерить массу иона с точностью ± десятки а.е.м. Следовательно, разрешение масс-анализатора тесно связано с другой важной характеристикой - точностью измерения массы иона. Проиллюстрировать значение этой характеристики можно на простом примере: массы молекулярных ионов азота (N2+) и монооксида углерода (СО+) составляют 28.00615 а.е.м. и 27.99491 а.е.м., соответственно (оба иона характеризуются массовым числом 28). Эти ионы будут регистрироваться масс-спектрометром порознь при разрешении 2500, а точное значение массы даст ответ - какой из газов регистрируется. Измерение точной массы доступно на приборах с двойной фокусировкой, на время-пролетных масс-спектрометрах (в низкомолекулярном диапазоне) и на масс-спектрометрах ионно-циклотронного резонанса. Динамический диапазон. Динамический диапазон это соотношение максимального и минимального детектируемых сигналов. Значение динамического диапазона можно проиллюстрировать на примере: при анализе смеси, содержащей 99.99 % одного соединения или какого-либо элемента и 0.01% какой-либо примеси, мы должны быть уверены в правильности определения компонентов. Для этого нужно иметь диапазон линейности в 4 порядка. Современные масс-спектрометры для анализа органических соединений характеризуются динамическим диапазоном в 5-6 порядков, а масс-спектрометры для элементного анализа 9-12 порядков. Чувствительность. Чувствительность - величина, показывающая какое количество вещества нужно ввести в масс-спектрометр для того, чтобы его можно было детектировать. Чувствительность является одной из важнейших характеристик масс-спектрометров. Для простоты обычно рассматривают связанный с чувствительностью параметр – минимальное определяемое количество вещества, или порог обнаружения. Типичная величина порога обнаружения хорошего хромато-масс-спектрометра, используемого для анализа органических соединений, составляет 1х10-12 грамм при вводе 1 микролитра раствора. Пределы обнаружения неорганических веществ, например, методом ICP/MS (ИСП/МС – масс-спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой) составляет 1х10-15 (одна доля на квадриллион). Область применения метода Установление подлинности лекарственных веществ. Фрагментированный масс-спектр является «отпечатком пальцев» химического строения. Поэтому идентичность масс-спектров однозначно свидетельствует об идентичности молекул, особенно в сочетании с использованием библиотек масс-спектров и хроматографических данных. Масс-спектр высокого разрешения позволяет определять атомный состав молекулы (брутто-формулу) по точной массе. Количественное определение фармацевтических субстанций и примесей в лекарственных формах. Количественный анализ проводится с использованием стандартных образцов в комбинации с традиционными хроматографическими методиками, причем не требуется точного воспроизведения условий хроматографирования, поскольку пик на хроматограмме идентифицируют по масс-спектру, а интегрирование по площадям пиков избранных ионов или реакций позволяет количественно определять компонент при неполном разделении пиков на хроматограмме. Идентификация примесей и установление неизвестной структуры. Масс-спектр позволяет определить молекулярную массу соединения по молекулярному иону, а во многих случаях выяснить, из каких фрагментов состоит молекула, что в сочетании с применением библиотек спектров и данными спектроскопии ЯМР дает возможность однозначно установить химическую структуру. Количественное определение следовых количеств веществ, например, в фармакокинетике и метаболомике. Уникальная избирательность в режимах SIM (мониторинг избранных ионов) и SRM (мониторинг избранных реакций) наряду с очень высокой чувствительностью, позволяет использовать комбинацию ВЭЖХ и масс-спектрометрию для определения анализируемых веществ на фоне таких сложных многокомпонентных смесей, как биологические жидкости или растительные экстракты. Количественное определение более 70 элементов с пределами измерения от 10 до 0.1 ррt (parts per trillion) методом ИСП-МС. Оборудование Масс-спектрометр состоит из следующих блоков, имеющих несколько разновидностей: Система ввода образца Первой стадией анализа является ввод образца испытуемого вещества в прибор без значительного нарушения вакуума. Наиболее применимы системы ввода, позволяющие анализировать компоненты смеси, разделяемые при помощи соответствующего прибора, соединенного с масс-спектрометром: Газовая хроматография/масс-спектрометрия (GC/MS). При использовании подходящих капиллярных колонок возможно непосредственное введение конца колонки в ионный источник прибора без применения сепаратора. Применяется для анализа химических соединений, имеющих температуру кипения примерно, до 400ºС. Жидкостная хроматография/масс-спектрометрия (LC/MS). Такая комбинация приборов особенно эффективна при анализе нелетучих полярных соединений, либо термолабильных веществ. В связи с трудностью получения ионов в газовой фазе, при данном методе требуется применение специальных интерфейсов: электроспрей (ESI), термоспрей (TSI), химическая ионизация при атмосферном давлении (APCI), фотоионизация при атмосферном давлении (APPI), и др., которые представляют собой самостоятельные методы ионизации и будут рассмотрены ниже. Сверхкритическая флюидная хроматография/масс-спектрометрия Этот метод ввода образца заключается в том, что подвижная фаза, обычно состоящая из находящейся в сверхкритическом состоянии двуокиси углерода, переходит в газообразное состояние после прохождения через нагретую заслонку, находящуюся между колонкой и ионным источником. Капиллярный электрофорез/масс-спектрометрия (CE/MS) Элюент вводится в ионный источник, в некоторых случаях после добавления дополнительного растворителя, при этом скорость потока может достигать нескольких миллилитров в минуту. Ограничениями данного метода являются малые количества вводимого образца и необходимость использовать летучие буферные растворы. Устройства для прямого ввода образца Образец вводится в прибор через вакуумный шлюз при помощи клапана, штанги, транспортера или автосамплера, испаряется термически или в процессе десорбции с поверхности непосредственно в ионном источнике. При таком способе ввода необходимо использовать чистые образцы или иметь ввиду, что полученный масс-спектр может представлять собой спектр смеси нескольких соединений. Ионный источник Электронный удар (EI) Образец испытуемого вещества, находящийся в газообразном состоянии, ионизируют потоком электронов, энергия которых (обычно 70 эВ) больше энергии ионизации образца. При этом, кроме молекулярного иона М+, образуются осколочные ионы меньшей массы, характерные для данной молекулярной структуры. Главным ограничением данного способа является необходимость испарения образца, что делает невозможным исследование полярных, термолабильных или высокомолекулярных соединений. Ионизация электронным ударом может быть использована в газовой хроматографии в сочетании с масс-спектрометрией, и лишь в отдельных случаях в жидкостной хроматографии. Химическая ионизация (CI). При этом способе ионизации используется газ-реагент, например, метан, изобутан, аммиак, монооксид азота, диоксид азота или кислород. В спектре присутствуют ионы типа (М+Н)+ , (М-Н)- , а также ионные комплексы, образованные аналитом с используемым газом-реагентом. Фрагментация при химической ионизации проявляется в меньшей степени, чем при ионизации электронным ударом. Для термолабильных веществ используют разновидность данного метода ионизации, при которой образец, нанесенный на проволоку, очень быстро испаряется вследствие эффекта Джоуля – Томсона (десорбционная химическая ионизация). Бомбардировка быстрыми атомами (FAB) или ионизация бомбардировкой быстрыми ионами (вторичноионная масс-спектрометрия – SIMS). Образец, растворенный в вязкой матрице, например в глицерине или м-нитробензиловом спирте наносят на металлическую поверхность, ионизируют потоком нейтральных атомов, например, аргона или ксенона, или обладающими большой кинетической энергией ионами цезия. Образуются ионы (М+Н)+ и (М-Н)- типов или ионные комплексы, образованные средой (матрицей) и образцом. Данный тип ионизации хорошо подходит для полярных, термолабильных соединений, позволяя получать спектры молекул с массой до 10 000 Да. Важно, чтобы образец был равномерно растворен в матрице, в противном случае качество спектра сильно ухудшается, а попытки количественного анализа смесей приводят к непредсказуемым результатам. Известен проточный вариант FAB, который может быть использован для жидкостной хроматографии, однако скорость потока подвижной фазы должна быть очень низкой (менее 10 мкл/мин). Полевая десорбция и полевая ионизация. Образец испаряют около вольфрамового проволочного эмиттера, покрытого микроиглами (полевая ионизация) или помещают на эту проволоку (полевая десорбция). Электрическое поле (напряжение около 10 кВ), образуемое эмиттером, ионизирует образец. Энергия, переносимая при данных способах ионизации, составляет всего доли эВ, т.е. избыточная энергия молекулярного иона значительно ниже, чем при других способах ионизации. Кроме того, другие электроны ионизирующейся молекулы не возбуждаются, и М+ оказывается в основном (невозбужденном) электронном состоянии и спектр зачастую представляет собой единственный пик, принадлежащий молекулярному иону. Матричная лазерная десорбционная ионизация (MALDI) Образец, смешанный с соответствующей средой (матрицей) и помещенный на металлическую подложку, ионизируют короткими лазерными импульсами с длиной волны от УФ- до ИК- диапазона (продолжительность импульсов может составлять от пикосекунды до нескольких наносекунд). В качестве матрицы обычно используются УФ- поглощающие органические соединения (2,5-дигидроксибензойная, синаповая кислоты, 2,6-дигидроксиацетофенон и др.). Данный способ ионизации применяется, главным образом, при анализе соединений с очень большой молекулярной массой (более 100 000 Да). Индуктивно связанная плазма (ICP). Образец, растворенный в сильной минеральной кислоте (азотная, соляная, плавиковая, царская водка и т.д.), подается в зону горения аргоновой плазмы, где при температуре в несколько тысяч градусов происходит распад образца на атомы с ионизацией. Метод применяется, для определения более 70 элементов. Ввиду наличия молекулярных интерференций оптимально использовать приборы высокого разрешения или комбинированные масс-анализаторы с камерой соударений. Изотопные интерференции, как правило, могут быть разрешены математическими методами. Электроспрей (электрораспыление) (ESI). Образец, находящийся в растворе, вводится в источник через капилляр, на конце которого имеется потенциал порядка 5 кВ. На выходе из капилляра образуется аэрозоль из заряженных капель с высоким поверхностным зарядом. Испарение молекул растворителя из образующихся микрокапель приводит к образованию в газовой фазе однозарядных (М+Н)+, (М-Н)- или многозарядных ионов (М+nН)+n , (М-nН)-n. Скорость потока подвижной фазы при данном виде ионизации может меняться от нескольких нл/мин до 1-2 мл/мин. Такой способ ионизации применяют для полярных соединений. Особенных успехов удалось достичь при использовании электроспрея для установления структур полипептидов, белков и нуклеиновых кислот с молекулярными массами до 1 000 000 Да и выше. Очень хорошо электроспрей сочетается с жидкостной хроматографией и капиллярным электрофорезом. Химическая ионизация при атмосферном давлении (APCI). Ионизацию образца проводят при атмосферном давлении в зоне коронного разряда, помещенной на пути подвижной фазы, которая распыляется как вследствие тепловых эффектов, так и благодаря использованию потока азота. Образуются однозарядные ионы (М+Н)+ или (М-Н)-. Метод хорошо зарекомендовал себя для анализа сравнительно небольших полярных и неполярных молекул с весом менее 1 200 Да. Возможность использования высоких скоростей потока подвижной фазы (до 2 мл/мин) делает этот способ ионизации идеальным для сочетания с жидкостной хроматографией. Фотоионизация при атмосферном давлении (APPI). В ионном источнике APPI используют криптоновую лампу, которая излучает фотоны с энергией 10.0 и 10.6 эВ. Эти фотонные энергии достаточны для ионизации большинства анализируемых соединений, в то время как для ионизации типичных растворителей (вода, метанол, ацетонитрил и т.д.) для обращенно-фазной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием необходимо излучение с большей энергией. Использование низкоэнергетичных фотонов в качестве источника ионизации приводит к получению масс-спектров, свободных от «химического шума», а также гарантирует минимальную фрагментацию ионов, позволяя идентифицировать протонированные ионы или радикальные катионы. Кроме перечисленных разновидностей ионных источников существует целый ряд менее распространенных способов ионизации, таких как термоспрей, плазменная десорбция, лазерная абляция и др. Масс-спектрометрия DART Масс-спектрометрия DART (Direct Analysis in Real Time) – быстрый метод получения спектров низкомолекулярных соединений в режиме on-line, непосредственно во время анализа, практически не требующий пробоподготовки. Метод позволяет проводить сверхбыструю идентификацию компонентов любых твердых или жидких объектов. Процедура анализа сводится к тому, что объект вносят пинцетом (в случае твердых образцов) или палочкой (в случае жидких объектов) в ионный источник DART, где происходит испарение вещества и его ионизация с последующей регистрацией ионов масс-спектрометром. При этом образуются очень простые спектры, обычно содержащие протонированные молекулярные ионы низкомолекулярных компонентов пробы. Метод масс-спектрометрии DART применим для отслеживания полноты реакций органического синтеза новых лекарственных веществ, прямого анализа компонентов смесей, разделенных на пластинке ТСХ с ее поверхности, обнаружение фальсификатов при анализе фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов. Масс-анализатор Двойная фокусировка Принцип действия всех масс-анализаторов основан на физических законах движения заряженных частиц. Исторически первым масс-анализатором, остающимся непревзойденным по своим характеристикам и сегодня, был магнит. Согласно физическим законам траектория заряженных частиц в магнитном поле искривляется, а радиус кривизны зависит от массы частиц, в регистрирующем устройстве ионы распределяются по массам. Для увеличения разрешения, на пути ионов устанавливают дополнительно электростатический анализатор. Магнитные масс-спектрометры имеют высокое разрешение, что позволяет использовать их при исследовании органических соединений с высоким разрешением, при анализе изотопных соотношений, элементном анализе на предельной чувствительности. Квадрупольный анализатор Устройство анализатора указанного типа основано на принципе квадруполя, который представляет собой четыре стержня, на которые попарно, в противоположной полярности подается определенная комбинация постоянного и радиочастотного переменного напряжений. Ионы, перемещающиеся параллельно осям этих стержней, попадают в гиперболическое поле. Возможность пропускания ионов зависит от соотношения m/z и напряжения радиочастотного поля. Изменяя напряжение поля сканируют все значения m/z в рабочем диапазоне прибора (обычно от 1 до 2 000). Некоторые приборы сканируют до 4 000 а.е.м. Квадрупольные масс-спектрометры не требуют использования высоких напряжений, порядка тысячи вольт, в отличие от магнитных масс-спектрометров. Это позволяет упростить конструкцию, поскольку для создания вакуума в приборе требуются меньшие размеры вакуумной камеры. Время-пролетный анализатор (Time Of Flight, TOF) В таких анализаторах ионы распределяются по массе в бесполевом пространстве, а не за счет закономерностей движения заряженных частиц в поле (магнитном или электростатическом). Ионы из источника разгоняются электрическим полем, приобретая достаточно большую кинетическую энергию, и попадают в бесполевое пространство. На входе в это пространство все ионы имеют одинаковую кинетическую энергию, и, в соответствии с формулой E=mv2/2, будут двигаться с разными скоростями. В зависимости от массы ионы в разное время достигнут детектора. Регистрация ионов и измерение времени при попадании в детектор позволяет рассчитать их массу. На основе время-пролетного масс-анализатора сконструированы очень быстрые (и чувствительные) масс-спектрометры. Время-пролетный масс-анализатор, в отличие квадрупольного анализатора, позволяет регистрировать широкий диапазон масс и измерять массы очень больших молекул, а наиболее подходящим способом ионизации оказался описанный выше метод MALDI (ионизация лазерной десорбцией при содействии матрицы). Время-пролетные масс-анализаторы используют, в основном, благодаря их простоте, быстродействию и относительно невысокой стоимости. Квадрупольная ионная ловушка Развитие квадрупольных анализаторов привело к созданию "ионной ловушки". В квадрупольной ионной ловушке ионы фиксируются внутри квадруполя за счет запирающих потенциалов на входном и выходном концах ловушки. Затем, при наложении изменяемой резонансной радиочастоты, ионы выводятся из ловушки в соответствии с величиной m/z и регистрируются электронным умножителем. Такой механизм позволяет значительно увеличить популяцию захваченных ловушкой ионов, что ведет к расширению динамического диапазона и к улучшению чувствительности. Ионная ловушка позволяет удерживать ионы, которые необходимы для установления строения, не акцентируясь на остальных фрагментах молекулы, при этом процесс фрагментации можно повторять многократно, до 10 - 15 раз (общепринятое обозначение MSn). Ионно-циклотронный резонанс Ионы, подвергнутые действию сильного магнитного поля, движутся по круговым траекториям с частотами, которые могут быть непосредственно связаны с величинами m/z для этих ионов посредством Фурье-преобразования. Анализаторы такого типа обладают очень высокой разрешающей способностью (до 1 000 000 и выше), а также позволяют получать МСn спектры. Недостатком масс-анализаторов на основе ионно-циклотронного резонанса является необходимость использования очень низкого давления (порядка 10-7Па) и применение сверхпроводящих магнитов, работающих при температуре жидкого гелия 4,2К. Орбитальная ловушка ионов В орбитальной ловушке ионов (Orbitrap) не используют магнитные поля (масс-спектрометр с двойной фокусировкой или ионно-циклотронного резонанса) или радиочастоты (квадрупольные ионные ловушки). Принцип работы масс-анализаторов этого типа основан на электростатической аксиально-гармонической орбитальной ловушке ионов, которая использует симметричное статическое электрическое поле между внешним и внутренним электродами специальной формы. По аналогии с масс-анализаторами на основе ионно-циклотронного резонанса, в спектрометре с орбитальной ионной ловушкой ион детектируют по наведенному значению тока на внешних электродах; частоты, соответствующие различным m/z, выделяют с помощью алгоритма Фурье-преобразования, а затем конвертируют в масс-спектр. Орбитальная ловушка характеризуется также большей емкостью ионов. Большая емкость пространственного заряда по сравнению с ионно-циклотронной и квадрупольной ловушками позволяет достичь большей точности измерения массы (разрешение порядка 100 000 на полувысоте пика), более широкого динамического диапазона и диапазона отношений величин m/z. Обнаружение сигнала и обработка данных Ионы, разделенные анализатором, преобразуются в электрические сигналы детектирующими системами, в частности, электронным умножителем, фотоумножителем или цилиндром Фарадея. Контроль различных физических параметров, требуемых для согласованной работы всех систем прибора, обработка данных, включая калибровку, визуализацию спектров, автоматические количественные расчеты, архивирование данных, создание и использование библиотек масс-спектров осуществляются компьютером с соответствующим программным обеспечением. Регистрация спектров Различают три основных способа регистрации спектров: по полному ионному току (TIC); мониторинг избранного иона (SIM) или нескольких ионов (MIM); селективная регистрация избранных реакций распада иона (SRM) или нескольких ионов (MRM). Регистрация по полному ионному току и по диссоциации инициированной соударением позволяют получать масс-спектры, однозначно связанные со строением конкретной молекулы. На основе полученных таким образом спектров созданы библиотеки (базы данных), позволяющие определять структуру молекулы по эталонным спектрам. Селективная регистрация ионов позволяет определять малые концентрации аналита на фоне сложной матрицы, а также приводит к огромному выигрышу в чувствительности: время, которое тратится на запись полного масс-спектра, при селективной регистрации используется для записи только одного или нескольких ионов. Регистрация избранных реакций является еще более избирательным методом определения искомого соединения в сложной смеси. Методики количественного анализа с использованием методов масс-спектрометрии должны быть валидированы. |
Добавить документ в свой блог или на сайт
Похожие:
 | Министерство здравоохранения российской федерации государственный... ... | | Государственный стандарт качества лекарственного средства общая фармакопейная статья Ненулевые магнитные моменты имеют изотопы ядер элементов с нечетной атомной массой (1H, 13C, 15N, 31P, 19F и др.) |
| Государственный стандарт качества лекарственного средства общая фармакопейная статья Успешное выполнение многих фармакопейных испытаний и методик количественного и качественного анализа требуют регулирования или поддержания... | | Государственный стандарт качества лекарственного средства общая фармакопейная статья Агар. Пористые пластины толщиной не более 20 мм или пленки толщиной не более 0,5 мм белого или светло-желтого цвета; допускается... |
| Государственный стандарт качества лекарственного средства фармакопейная статья Вакцина состоит из живых микобактерий вакцинного штамма бцж Mycobacterium bovis, cубштамм bcg-1 (Russia), лиофилизированных в 1,5... | | Государственный стандарт качества лекарственного средства фармакопейная... Сыворотка против яда змеи гадюки лошадиная представляет собой иммуноглобулиновую фракцию сыворотки лошади, содержащую специфические... |
| Государственный стандарт качества лекарственных средств общая фармакопейная статья В зависимости от источника происхождения различают масла жирные растительного происхождения (растительные жирные масла) и масла жирные... |  | Инструкция по применению ксенона (29) и защищена Фармакопейная статья... Ректор Академик го дпо рамн л. К. Мошетова), кафедра анестезиологии и реаниматологии (зав каф проф. И. В. Молчанов) |
| Оригинал Translation Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на жидкие лекарственные формы для приема внутрь | | Общая фармакопейная статья Радиофармацевтические препараты применяются для радионуклидной диагностики и лечения различных заболеваний с использованием методов... |
| Статья опубликована в энциклопедическом словаре "Этика" (М.: Гардарики, 2001) Федеральный государственный образовательный стандарт среднего профессионального образования по специальности 111101 зоотехния | | Государственный образовательный стандарт Общая характеристика специальности 032500. 00 География с дополнительной специальностью |
| Государственный образовательный стандарт Общая характеристика направления подготовки дипломированного специалиста "приборостроение" | | Государственный образовательный стандарт Общая характеристика направления подготовки дипломированного специалиста "приборостроение" |
| Государственный образовательный стандарт Общая характеристика направления подготовки дипломированного специалиста «строительство» | | Государственный образовательный стандарт Общая характеристика специальности 053300 Режиссура театрализованных представлений и праздников |
