Отчет о научно-исследовательской работе «Разработка методов оценки риска, прогнозирования течения и профилактики папилломавирус-ассоциированного канцерогенеза шейки матки»
Скачать 0.76 Mb.
|
Глава 2 Исследование концентрации пероксинитрита в тканях биоптата, взятых при кольпоскопии у женщин с диагностированной папилломавирусной инфекцией высокого онкогенного риска, с предраковыми заболеваниями шейки матки (дисплазия, лейкоплакия с явлениями атипии, эритроплакия, аденоматоз), с раком шейки маткиОбследовано 3 группы женщин: с диагностированной папилломавирусной инфекцией высокого онкогенного риска, с предраковыми заболеваниями шейки матки (дисплазия, лейкоплакия с явлениями атипии, эритроплакия, аденоматоз), с раком шейки матки (клиническая характеристика представлена в главе 1). Пероксинитрит – анион, имеющий формулу ONOO−. Он образуется в результате реакции перекиси водорода с нитрит-ионом:  Пероксинитрит является сильным окислителем. Благодаря своим свойствам он способен вызывать повреждения широкого спектра молекул в клетке, в том числе ДНК и белков. Образование пероксинитрита in vivo происходит в результате взаимодействия супероксид-иона и оксида азота:  Так как пероксинитрит является короткоживущим анионом, о его возможной концентрации судили по суммарной концентрации стабильных метаболитов нитратов и нитритов в ткани биоптата (мкМ) спектрофотометрически с использованием реактива Гриса (Nitrate/Nitrite Colorimetric Assay Kit) (Cayman, USA). Для этого в каждую пробу добавляли разбавленную в два раза буфером (Аssay buffer) гомогенизированную ткань, 10 мкл энзимного кофактора и 10 мкл нитрат-редуктазы. Инкубировали 1 час при комнатной температуре и вносили 50 мкл реактива Гриса R1 и 50 мкл реактива Гриса R2. Инкубировали 10 минут при комнатной температуре, измеряли оптическую плотность при 540 нм. Обнаружено, что ВПЧ низкого онкогенного риска (10, 13 типы ВПЧ) не изменяет синтез NO, о чем свидетельствует нормальный уровень нитрат-нитритов в тканях биоптатов в данной группе женщин. Концентрация нитрат-нитритов у пациенток с 16, 18 типами и больных с предраковыми заболеваниями шейки матки достоверно выше нормы (p<0,01), но между группами различий нет (р>0,01). У женщин с раком шейки матки в тканях биоптата выявлены максимальные концентрации, достоверно (p<0,01) более высокие по сравнению с нормой и с показателями нитрат-нитритов других групп пациенток (рис. 5).  Рисунок 5 – Концентрация нитрат-нитритов (мкМ/мг) в тканях биоптатов шейки матки женщин с диагностированной папилломавирусной инфекцией разного онкогенного риска, с предраковыми заболеваниями шейки матки (дисплазия, лейкоплакия с явлениями атипии, эритроплакия, аденоматоз), с раком шейки матки, (достоверность различий при p<0,05) Обращают на себя внимание данные повышения уровня нитрат-нитритов при патологии шейки матки. Так как концентрация нитрат-нитритов является косвенным показателем величины образующего пероксинитрита, по этим данным представляется возможным судить о возможном участии NO-зависимых путей развития патологии тканей. Выявленные одинаково повышенные уровни нитрат-нитритов у женщин с ВПЧ высокого онкогенного риска и у больных с предраковыми заболеваниями являются основанием для назначения и апробации эффективности антиоксидантов в комплексной терапии женщин с ВПЧ высокого онкогенного риска и пациенток с предраковыми заболеваниями шейки матки. Глава 3 Рандомизированное контролируемое испытание эффективности подключения препаратов антиоксидантов в профилактике развития канцерогенеза у клинически здоровых женщин с риском развития рака шейки матки (диагностированная ВПЧ инфекция) и женщин с предраковыми заболеваниями шейки матки с гистологическим контролем тканей, взятых при кольпоскопии (через 3 месяца на фоне терапии антиоксидантами)Материалы и методы. В исследование были включены 250 пациенток, стратифицированных по патологии: 1 группа – 152 клинически здоровые женщины с выявленным ВПЧ высокого онкогенного риска в возрасте 25–45 лет; 2 группа – 98 пациенток с предраковыми заболеваниями шейки матки в возрасте 25–52 лет. Все пациентки предоставили подробную информацию об имевшихся ранее случаях заболеваний, передающихся половым путем. У всех пациенток был проведен тщательный осмотр промежности, вульвы, влагалища, уретры и канала шейки матки. Разделение участников исследования. Каждая из женщин-участниц рандомизированного исследования эффективности подключения препаратов антиоксидантов в профилактике развития канцерогенеза подписала подтверждение согласия на участие. После стратификации пациентов по патологии (см. схему 1) они были распределены случайным образом (двойное слепое рандомизированное исследование) в опытную группу или в плацебо-группу: 1 группа – 82 клинически здоровые женщины с выявленным ВПЧ высокого онкогенного риска в опытной группе; 70 клинически здоровых женщин с выявленным ВПЧ высокого онкогенного риска в группе плацебо. 2 группа – 50 пациенток с предраковыми заболеваниями шейки матки в опытной группе; 48 женщин с предраковыми заболеваниями шейки матки в группе плацебо.  Схема 1 – Разделение пациенток с риском развития рака шейки матки (диагностированная ВПЧ-инфекция) и женщин с предраковыми заболеваниями шейки матки в испытании эффективности подключения препаратов-антиоксидантов. В качестве препарата-антиоксиданта апробирован «Immugen» (IDI FARMACEUTICI S.p.A. (Италия), который является одной из последних разработок в области комбинаций антиоксидантов и аминокислот и представляет собой уникальный комплекс оптимально сочетающихся компонентов. Препарат состоит из убихинона (коэнзим Q), витамина Е (альфа-токоферол- ацетат), фосфолипидов сои (лецитин), альфа-метионина и селена. Метионин и селен обладают антиоксидантными свойствами, снижая разрушающее действие свободных радикалов. Коэнзим Q – всемирно известный препарат: усиливает метаболические процессы и ускоряет ранозаживление, снижает интоксикацию, улучшает общую сопротивляемость организма, является одним из основных веществ, активно противостоящих процессам старения. Фосфолипиды сои и витамин Е дополняют комплекс за счет выраженных антисклеротических и противораковых свойств. Показано эффективное действие препарата при некоторых вирусных инфекциях, папилломатозе кожи, атопическом дерматите, гнойно-воспалительных процессах мягких тканей [28, 29, 30]. Препарат может быть с успехом использован как при лечении различных нозологических форм, так и в качестве профилактического средства. Оценка переносимости препарата Immugen. Проводился мониторинг и регистрация любых эпизодов (как общих, так и местных), которые могут быть связаны или не связаны с применением препарата. На каждую женщину, участвующую в исследовании, была заведена «Индивидуальная регистрационная карта» для учета общих и местных реакций. Результаты переносимости препарата Immugen (через 3 месяца на фоне терапии антиоксидантами). Анализ клинических проявлений показал, что в 1,2 % случаев (1 пациентка) в 1 группе клинически здоровых женщин с выявленным ВПЧ высокого онкогенного риска был случай аллергической сыпи, преимущественно на лице и шее, данная пациентка имеет множественную повышенную чувствительность к ряду пищевых продуктов. В дальнейшем эта пациентка была исключена из испытания. Во второй группе пациенток с предраковыми заболеваниями шейки матки в 2 % случаев (1 женщина) прием препарата сопровождался диареей, что было расценено как индивидуальная непереносимость. В дальнейшем данная пациентка также была исключена из испытания. Детальная оценка общего состояния женщин после начала приема препарата в комплексной терапии показала, что других случаев непереносимости не зарегистрировано. Гистологический контроль тканей, взятых при кольпоскопии (через 3 месяца на фоне терапии антиоксидантами). 1 группа женщин. Так как в этой группе женщин были пациентки клинически здоровые, то есть без выявленной патологии урогенитальной системы, биопсия не проводилась. Участницы рандомизированного исследования прошли гинекологический осмотр и кольпоскопию, в результате которой у 1 (6,0 %) женщины на фоне терапии (через три месяца) были признаки кандидоза, у 1 (2,0 %) женщины из группы плацебо были выявлены признаки неспецифического кольпита. 2 группа женщин. До начала терапии пациентки из второй группы с предраковыми заболеваниями шейки матки прошли гинекологический осмотр, кольпоскопическое исследование и по показаниям было проведено гистологическое исследование биоптатов шейки матки. Наиболее частым гистологическим признаком диагнозом был койлоцитоз (см. табл. 11). Достаточно часто обнаруживались утолщение многослойного плоского эпителия (44,0 %) и гиперкератоз (38,0 %). Практически у любой женщины (47 из 50 пациенток) встречалось сочетание 2 и более признаков патологии при гистологическом анализе. При цитологическом исследовании в 100 % случаев выявлялся воспалительный тип мазка. Таблица 9 – Частота встречаемости различных гистологических диагнозов в группе пациенток с предраковыми заболевания шейки матки
Наиболее типичные данные кольпоскопического исследования приведены ниже в виде примеров.На фоне комплексной терапии после эксцизии пораженного участка и дальнейшей терапии с применением антиоксидантного препарата Immugen обнаружено улучшение состояния ткани шейки матки, что выявлялось в постановке диагноза «вариант нормы» в 100 % случаев, в связи с чем повторный гистологический анализ со взятием биоптата не проводился. При цитологическом исследовании воспалительный тип мазка был выявлен в 38,0 % случаев. В группе плацебо в 2 % случаев было необходимо повторное гистологическое исследование по причине несоответствия глубины биоптата задачам гистологического исследования. При цитологическом исследовании воспалительный тип мазка был выявлен в 46,0 % случаев. ООО Медицинский центр «ВИТА+» ул. Шогенцукова, 5 Прием от 13.01.2012 12:18:43 Пациент Алексеева Наталья Юрьевна Доктор Сижажева Оксана Анатольевна Изображения   Кольпоскопический диагноз Оригинальный сквамозный эпителий: по краю цилиндрического эпителия. Цилиндрический эпителий: 1 зона вокруг цервикального канала. Нормальная зона трансформации (ЗТ): представлена закрытыми и открытыми железами. Стык между плоским и цилиндрическим эпителием: экзоцервикс. Плоскоклеточная метаплазия: по краю цилиндрического эпителия. Общий диагноз и рекомендации Кольпоскопическое заключение: Эктопия: Зона трансформации. Взята биопсия шейки матки 12 часов 1 зона. Рекомендовано: ЗППП, мазок на АК. ООО Медицинский центр «ВИТА+» ул. Шогенцукова, 5 Прием от 21.01.2012 17:48:51 Пациент Зябкина Екатерина Александровна Доктор Сижажева Оксана Анатольевна Изображения   Кольпоскопический диагноз Оригинальный сквамозный эпителий: по краю цилиндрического эпителия. Цилиндрический эпителий: 1 зона вокруг цервикального канала. Нормальная зона трансформации (ЗТ): представлена открытыми железами. Стык между плоским и цилиндрическим эпителием: экзоцервикс. Плоскоклеточная метаплазия: по краю цилиндрического эпителия. Общий диагноз и рекомендации Кольпоскопическое заключение: Эктопия: Зона трансформации. Взят мазок на АК. Рекомендовано: биопсия шейки матки после санации. ООО Медицинский центр «ВИТА+» ул. Шогенцукова, 5 Прием от 18.01.2012 17:36:59 Пациент Биттирова Наталья Юрьевна Доктор Сижажева Оксана Анатольевна Изображения   Кольпоскопический диагноз Оригинальный сквамозный эпителий: по краю цилиндрического эпителия. Цилиндрический эпителий: 1–2 зона по передней губе. Нормальная зона трансформации (ЗТ): представлена открытыми железами. Стык между плоским и цилиндрическим эпителием: экзоцервикс. Плоскоклеточная метаплазия: по краю цилиндрического эпителия. Общий диагноз и рекомендации Кольпоскопическое заключение: Эктопия: Зона трансформации. Взят мазок на АК. Рекомендовано: анализ на ЗППП, биопсия шейки матки после санации. ООО Медицинский центр «ВИТА+» ул. Шогенцукова, 5 Прием от 01.02.2012 14:39:10 Пациент Мервенецкая Юлия Михайловна Доктор Сижажева Оксана Анатольевна Изображения   Кольпоскопический диагноз Оригинальный сквамозный эпителий: по краю цилиндрического эпителия. Цилиндрический эпителий: 1–2 зона вокруг цервикального канала. Нормальная зона трансформации (ЗТ): представлена закрытыми и открытыми железами. Стык между плоским и цилиндрическим эпителием: экзоцервикс. Плоскоклеточная метаплазия: по краю цилиндрического эпителия. Общий диагноз и рекомендации Кольпоскопическое заключение: Полиповидная эктопия: Зона трансформации. Взят мазок на АК. Рекомендовано: ПЦР на ВПЧ (высокого риска), биопсия шейки матки после санации. ООО Медицинский центр «ВИТА+» ул. Шогенцукова, 5 Прием от 18.01.2012 15:29:48 Пациент Миронова Полина Андреевна Доктор Сижажева Оксана Анатольевна Изображения   Кольпоскопический диагноз Оригинальный сквамозный эпителий: по краю цилиндрического эпителия. Цилиндрический эпителий: 1–2 зона вокруг цервикального канала. Нормальная зона трансформации (ЗТ): представлена открытыми железами. Стык между плоским и цилиндрическим эпителием: экзоцервикс. Плоскоклеточная метаплазия: по краю цилиндрического эпителия. Пунктация (нежная и грубая): 2–3 зона по передней и задней губе с переходом на своды. Йод-негативная зона: в указанной зоне. Общий диагноз и рекомендации Кольпоскопическое заключение: Эктопия: Зона трансформации: Пунктация. Взят мазок на АК. Рекомендовано: мазок на ЗППП, биопсия шейки матки после санации. ООО Медицинский центр «ВИТА+» ул. Шогенцукова, 5 Прием от 30.01.2012 17:45:10 Пациент Маноенко Инна Анатольевна Доктор Сижажева Оксана Анатольевна Изображения  Кольпоскопический диагноз Оригинальный сквамозный эпителий: на экзоцервиксе. Цилиндрический эпителий: в цервикальном канале. Стык между плоским и цилиндрическим эпителием: у наружного зева. Плоскоклеточная метаплазия: 1 зона вокруг цервикального канала. Лейкоплакия (тонкая и толстая): 1–2 зона по задней губе. Йод-негативная зона: в указанной зоне. Общий диагноз и рекомендации Кольпоскопическое заключение: Грубая лейкоплакия. В связи с отсутствием эффекта от коагуляции рекомендовано: конизация шейки матки с последующим гистоанализом. Оценка изменения концентрации нитрат-нитритов в ткани шейки матки (через 3 месяца на фоне терапии антиоксидантами) Исследование роли токсичных третичных радикалов в папилломавирус-ассоциированном онкогенезе и разработка методов подбора антиоксидантов для профилактики и терапии предраковых и раковых заболеваний шейки матки является актуальной, так как позволит оценить эффективность воздействия на свободно-радикальное звено патогенеза предраковых и раковых заболеваний шейки матки и послужит маркером эффективности при разработке профилактического комплекса. Оптимизация стандартов терапии пациенток с риском развития РШМ, с предраковыми заболеваниями шейки матки (дисплазия, лейкоплакия с явлениями атипии, эритроплакия, аденоматоз), с раком шейки матки с подключением препаратов-антиоксидантов и их комплексов к базисной терапии онкобольных позволит создать условия для полноценной реализации апробированных вариантов лечения и улучшить качество жизни онкологических больных. Применение комплекса антиоксидантных аминокислот и витаминов в комплексной терапии женщин с ВПЧ высокого онкогенного риска и пациенток с предраковыми заболеваниями шейки матки имело выраженный клинический эффект (см. выше) и достоверно снижало концентрации нитрат-нитритов в ткани (р<0, 01) (рис. 6,7).  Рисунок 6 – Концентрация нитрат-нитритов (мкМ/мг) в тканях биоптатовшейки матки клинически здоровых женщин с диагностированной папилломавирусной инфекцией высокого онкогенного риска, (достоверность различий при p<0,05).  Рисунок 7 – Концентрация нитрат-нитритов (мкМ/мг) в тканях биоптатов шейки матки пациенток с предраковыми заболеваниями шейки матки, (достоверность различий при p<0,05) |
Похожие:
 | Отчет о научно-исследовательской работе «Разработка методов оценки... Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования | | Отчет о научно-исследовательской работе разработка методов оценки... Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования |
| Отчет о научно-исследовательской работе разработка методов макроэкономической... «Разработка методов макроэкономической оценки расходов федерального бюджета», шифр темы 0111-03-09 | | Отчет о научно исследовательской работе план ниокр фонда социального... «Разработка Концепции оценки профессионального риска причинения вреда жизни и здоровью работника с учётом индивидуально накопленной... |
| Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... «Разработка новых методов индивидуальной коррекции сводно-радикального статуса при бактериальных инфекциях» | | Отчет №3 о научно-исследовательской работе по теме: «Грид-технологии» Разработка методов эффективного решения задач обработки, хранения, передачи и защиты информации |
| Отчет о научно-исследовательской работе по теме «Разработка принципов... «Российский научно-исследовательский институт культурного и природного наследия имени Д. С. Лихачева» | | Отчет о научно-исследовательской работе Гост 32-2001. Межгосударственный стандарт. Система стандартов по информации, библиотечному и издательскому делу. Отчет о научно-исследовательской... |
| Отчет о научно-исследовательской работе Межгосударственный стандарт (гост 32-2001). Отчет о научно-исследовательской работе. Структура и правила оформления (редакция 2005... |  | Общие положения отчет Отчет о научно-исследовательской работе (нир) документ, который содержит систематизированные данные о научно-исследовательской работе,... |
| Отчет о научно-исследовательской работе Разработка критериев оценки качества очистки внутренних поверхностей трубопроводов систем теплоснабжения жилого фонда г. Красноярска... | | Отчет о научно-исследовательской работе по программе фундаментальных... Институт химии твердого тела и механохимии Сибирского Отделения Российской академии наук |
| Как предупредить рак шейки матки Но чаще всего про гинеколога вспоминают тогда, когда женщина забеременела, или когда появились резкие боли, выделения и другие болезненные... | | Отчет о научно-исследовательской работе Анализ возможности использования международных стандартов оценки при разработке российских федеральных стандартов оценки |
| Реферат Отчет о научно-исследовательской работе состоит Отчет о научно-исследовательской работе состоит из 33 рисунков, 8 разделов, 12 подразделов, 9 формул, 31 источника. Общий объем 48... | | Особенности течения беременности и родоразрешения женщин, перенесших заболевания шейки матки Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования “Московская медицинская академия... |
