Лекция: Содержание, задачи и методы патологической анатомии. История предмета
Скачать 367.56 Kb.
|
| ПАП-методе цепь промежуточных антител, связывающих энзим с антигеном, несколько длиннее, чем при непрямом иммунофлуоресцентном методе. Энзимное, т.е. пероксидазное антитело связывается с первичным антителом, уже находящемся на антигене, посредством еще одного антитела-мостика. При авидин-биотиновом методе первичное антитело, находящееся на антигене и меченное биотином, связывается с ПАП-комплексом через промежуточное антитело, меченное авидином. Оба белка — авидин и биотин резко повышают качество реакции, поэтому ABCметод считается более чувствительным. Для иммуногистохимических реакций используют 2 типа антител: поли- и моноклональные. Первые получают из антисывороток иммунизированных кроликов. Моноклональные антитела получают в культуре тканей или из асцитической жидкости, полученной из брюшной полости лабораторных животных. Моноклональные антитела абсолютно специфичны по отношению к антигену и не дают перекрестной реактивности. Популярность иммунопероксидазного метода связана, в основном, с его простотой и доступностью. Существует множество коммерческих наборов (kits) сывороток к различным антигенам, специфичным для тканей или опухолей и получившим название маркеров. Выгоды применения иммунопероксидазных реакций объясняются высокой чувствительностью (по сравнению с иммунофлуоресценцией ПАП-метод чувствительнее в 1000 раз, а ABC-метод — в 10000 раз), относительной стойкостью, возможностью применения некоторых реакций на депарафинированных срезах, прошедших и фиксацию, и проводку через спирты. Иммуноцитохимический метод заключается в аналогичной обработке антителами цитологических препаратов. В современных клинических лабораториях, патологоанатомических отделениях и научно-исследовательских институтах для прижизненной диагностики применяют методы молекулярной биологии: проточную цитометрию и технику гибридизации in situ, т.е. на месте, на гистологическом срезе. Первый метод необходим для количественного анализа содержания ДНК в клетках опухолей. С этой целью исследуемый кусочек нефиксированной ткани с помощью ферментов подвергают дезагрегации, т.е. разъединению и размельчению до отдельных клеток. Затем в специальной установке поток суспензии изолированных клеток толщиной в 1 клетку, окруженный обволакивающей жидкостью, проходит через считывающий лазерный пучок. С помощью гибридизации in situ достигается совмещение генетического материала (фрагментов ДНК, генов) in vitro на основе комплементарности, т.е. взаимного соответствия, например, пуриновых или пиримидиновых оснований у нуклеиновых кислот. Этот метод применяется, в основном, в трех областях патологии: для идентификации по геному микробов или вирусов, находящихся в тканях или жидкостях; для изучения генома при его врожденных нарушениях; при диагностике опухолей, в частности, для распознавания вирусных онкогенов. Есть множество модификаций метода. Очень популярна полимеразная цепная реакция (ПЦР), которая осуществляется прямо на гистологических срезах. Вначале проводят денатурацию исследуемой ДНК, т.е. разъединение двух ее спиральных нитей и получение одной из них в изолированном состоянии. Затем наслаивают другую, инородную нить (чаще РНК), меченную флуорохромом или ПАП-комплексом. Молекулярная структура этой нити, т.е. последовательность ее оснований, заведомо известна. Если имеется комплементарность с исследуемой нитью, то красящая реакция на гистологическом препарате положительна, а строение этой нити становится известным. В арсенале патологической анатомии используется также хромосомный анализ, позволяющий определять отклонения в генетическом аппарате (геноме) клеток, имеющие врожденный или приобретенный характер. Этот анализ приобретает особое значение при распознавании и изучении опухолей, различные варианты которых сопровождаются вполне специфическими маркерными перестройками или аберрациями хромосом. Для этого прижизненно взятую ткань культивируют, т.е. выращивают на искусственных средах. Такой метод культивирования позволяет путем пересевов и отбора клеток добиться получения культуры клеток одного тканевого типа и даже одного клона, т.е. линии, происходящей от одной стволовой клетки. Основные этапы хромосомного анализа на примере исследования лимфоцитов крови состоят в следующем. В культуру гепаринизированной крови (гепарин — антикоагулянт) добавляют фитогемагглютинин, стимулируя Т-лимфоциты к трансформации в бласты (менее зрелые формы, способные к митозу и делению). Через 2—3 сут инкубации в культуру вносят колхицин для задержки митозов на стадии метафазы у делящихся лимфоцитов. Именно в метафазе хромосомы как бы распластываются, что удобно для изучения. Затем клетки переносят на предметное стекло, фиксируют и окрашивают, чаще всего по методу Гимзы. В результате в каждой паре хромосом выявляются светлые (неокрашенные) и темные (окрашенные) полосы (bands), поэтому метод называют бэндингом хромосом. Расположение полос в нормальном кариотипе (наборе хромосом) высокоспецифично для каждой пары хромосом, и диаграммы (карты) бэндинга в норме хорошо известны. Хромосомный анализ относится к экономически дорогим методам и потому применяется нечасто. В ходе диагностических исследований на материале, взятом при жизни больного, используется электронная микроскопия: трансмиссионная (в проходящем пучке, подобно светооптической микроскопии) и сканирующая (снимающая рельеф поверхности). Первую применяют чаще, особенно для изучения в ультратонких срезах ткани деталей строения клеток, выявления микробов, вирусов, отложений иммунных комплексов и др. Применение ультраструктурного исследования с дифференциально-диагностической целью необходимо при исследовании целого ряда заболеваний, например гломерулопатий, некоторых видов опухолей, и является частью алгоритма постановки морфологического диагноза. В историческом плане становление патологической анатомии можно разделить на три периода: анатомический (с древности до начала XIX в.), микроскопический (с первой трети XIX в. до 50-х гг. XX в.), современный ультрамикроскопический (после 50-х гг. XX в.) период развития патологической анатомии, который можно охарактеризовать как период патологической анатомии живого человека. Анатомический период изучения патологических изменений органов человеческого тела тесно связан возникновением и развитием научной анатомии в XV—XVII вв. Только в XVI веке начали накапливать материалы по патологической анатомии болезней, полученные при вскрытии трупов. Наиболее значительную роль в создании метода анатомического исследования, описании строения всех важнейших органов и их взаиморасположения сыграли в середине XVI в. работы А.Везалия, Г.Фаллопия, Р.Коломбо и Б.Евстахия. Анатомические исследования второй половины XVI—начала XVII вв. не только укрепили позиции анатомии, но и способствовали появлению интереса к ней у врачей. Значительное влияние на развитие анатомии в этот период оказали философ Ф.Бэкон и анатом У.Гарвей. В 1676 г. Т.Боне сделал первую попытку на значительном материале (3000 вскрытий) показать существование связи между обнаруженными морфологическими изменениями и клиническими проявлениями болезни. В XVII в. в Европе появились богатейшие анатомические музеи (Лейден), в которых были широко представлены патологоанатомические препараты. Важнейшим событием в истории патологической анатомии, определившим ее выделение в самостоятельную науку, стало издание в 1761 г. основного труда Дж.Б.Морганьи “О местоположении и причинах болезней, выявленных анатомом”. В конце XVIII в. были опубликованы многочисленные работы, построенные на принципе клинико-анатомических сопоставлений, предложенном Дж.Б.Морганьи. Необходимо отметить, что в XVIII и в начале XIX столетия анатомические изменения систематизировались в основном по органам, в которых обнаруживались наибольшие изменения. Клинико-анатомические сопоставления часто делались лечащими врачами, однако понимание сущности болезней удавалось в очень ограниченной степени. Большим вкладом в развитие учения о морфологических изменениях во внутренних органах при различных болезнях были труды Ксавье Биша (Bichat, 1771—1802), доказывавшего необходимость изучения тканей организма, а также Жана Крювелье (Cruvelier, 1791 —1873), ставшего автором первого патологоанатомического атласа. R. Т. Leannec (1781 —1826), изобретатель метода аускультации, описал изменения при туберкулезе и болезнях печени. В 1837 году был издан на русском языке учебник «Основания монологической анатомии с присовокуплением болезненных припадков», написанный Джемсом Гопом на английском языке, переведенный на немецкий, а далее и на русский язык. Анатомические изменения, находимые при вскрытиях, дополненные ограниченными, возможными в те времена, микроскопическими исследованиями, были обобщены и систематизированы венским патологоанатомом Карлом Рокитанским (1804—1878). В своем трехтомном руководстве по патологической анатомии (1844—1846) он систематизировал изменения, развивающиеся в разных органах, представляющих собою проявления патологических процессов различной этиологии. Сущность этих процессов в то время не была ясна, так как микроскопические исследования органов и тканей в то время только начали свое развитие. К. Рокитанский своим трудом внес большой вклад в развитие клинико-анатомического направления в патологической анатомии. В своей капитальной работе он писал: «Патологическая анатомия имеет ближайшее отношение к нозологии, к клинической медицине. Как клиническая медицина допускает и требует анатомического изучения своего предмета и не может без этого существовать, так и патологическая анатомия может и должна совершенствоваться с клинической точки зрения. Только такое практическое направление в работе дает ручательство за прочность и преуспевание нашей науки... Для патологической анатомии возникает задача не только описать болезненные изменения, свойственные каждой ткани и органу, указать и изучить на трупе значение этих изменений, их взаимоотношения, развитие, исходы и т. д., но также связать их с прижизненными изменениями, показать в настоящей связи анатомические явления и клинические наблюдения и потом, на основании первых, более или менее подробно выяснить развитие болезни». Так была создана общая патологическая анатомия, т. е. описание морфологических болезненных изменений, развивающихся в разных органах или системах органов: нарушения кровообращения, некрозы, воспаление и др. Вторая половина XIX столетия характеризовалась постепенным развитием исследований с помощью микроскопа, модели которого стали совершенствоваться. Систематически велось изучение нормальных и патологически измененных тканей и клеток. Измененных тканей и органов производились еще Н. И. Пироговым и врачами зарубежных стран (Карл Рокитанский). Крупными трудами того периода были исследования Рудольфа Вирхова (R. Virchow, 1821—1902) и его школы (Орт—Orth, 1847—1923; Реклингхаузен — Recklinghausen, 1833-1910) и др. В этих трудах большую и основную роль играло широкое использование метода микроскопического исследования тканей. Расширение его позволяло постепенно выявлять морфологические изменения, свойственные многим болезненным процессам и болезням. В начале своей деятельности, в 1848 г., Р. Вирхов был послан в Силезию, где на почве голода вспыхнула эпидемия сыпного («голодного») тифа среди угнетенного польского населения. В своих отчетах Р. Вирхов не только дал описание анатомических изменений у умерших, но отметил значение социального фактора (бедности, голода) при бездействии немецкого правительственного аппарата. Эти отчеты Р. Вирхова, а также оказание им врачебной помощи раненым в период революции 1848 года повели к его высылке из Берлина на несколько лет. Долголетние исследования Р. Вирхова привели его к выводу о доминирующем значении клеточных элементов в тканях организма и о происхождении клеток только из клеток. Так создался труд Р. Вирхова «Целлюлярная патология» (1858). «Целлюлярная патология» и «Болезнетворные опухоли» представили собою крупные труды, заключающие описания анатомических и микроскопических изменении при большом числе болезней, в которые было внесено очень много нового. Р. Вирхов писал, что патологическая анатомия не только наука о трупах погибших от болезней, но в то же время клиническая и экспериментальная наука. Он подчеркивал значение клинико-анатомических сопоставлений. Необходимость изучения целостного организма, его нервных и гуморальных связей была в то время недооценена. Открытие патогенных микробов (происходившее во второй половине прошлого столетия), связанное с трудами Пастера, Давена, Ралье и др., позволило выявить причину многих инфекционных болезней и вести научно обоснованную борьбу с ними. В России первые попытки организации прозекторского дела относятся к XVIII в. Они связаны с деятельностью видных организаторов здравоохранения — И.Фишера и П.З.Кондоиди. Эти попытки не дали ощутимых результатов в связи с низким уровнем развития российской медицины и состоянием медицинского образования, хотя уже в то время проводились вскрытия с контрольно-диагностическими и исследовательскими целями. Становление патологической анатомии как научной дисциплины началось лишь в первой четверти XIX в. и совпало по времени с улучшением преподавания нормальной анатомии в университетах. Одним из первых анатомов, обращавших внимание студентов на патологические изменения органов во время вскрытия, был Е.О.Мухин. Впервые вопрос о необходимости включения патологической анатомии в число обязательных предметов преподавания на медицинском факультете Московского университета был поставлен в 1805 г. М.Я.Мудровым. По предложению Ю.Х.Лодера преподавание патологической анатомии в виде курса при кафедре нормальной анатомии было отражено в университетском уставе 1835 г. В соответствии с этим уставом преподавание самостоятельного курса патологической анатомии было начато в 1837 г. проф. Л.С.Севруком на кафедре нормальной анатомии. В 1841 г. в связи с созданием нового медицинского факультета в Киеве Н.И.Пирогов поставил вопрос о необходимости открытия кафедры для преподавания патологии в Университете Св. Владимира. В соответствии с уставом этого университета (1842) было предусмотрено открытие кафедры патологической анатомии и патологической физиологии, которая начала функционировать в 1845 г. Ее возглавил Н.И.Козлов — ученик Н.И.Пирогова. В 1846 г. профессором кафедры патологической анатомии и патологической физиологии медицинского факультета Императорского Московского университета был назначен Ю.Дитрих — адъюнкт факультетской терапевтической клиники. После смерти Ю.Дитриха руководителем кафедры стал его ученик А.И. Полунин (1820—1888), который является основоположником московской школы патологоанатомов и зачинателем клинико-анатомического направления в патологической анатомии. Особое место в московской школе патологоанатомов занимал М. Н. Никифоров, который руководил кафедрой патологической анатомии Московского университета, выполнил ценные работы по патологической анатомии, создал один из лучших учебников и подготовил большое число учеников, возглавивших впоследствии кафедры патологической анатомии в различных городах России. Один из его талантливых учеников А.И. Абрикосов впоследствии возглавил кафедру патологической анатомии Московского университета с 1920 по1952г., заложил научные и организационные основы патологоанатомической службы в СССР. Анатомические и в особенности микроскопические изменения, развивающиеся при инфекционных болезнях, стали предметом широкого изучения основоположником русской патологоанатомической школы М. М. Рудневым (1837—1878), профессором Военно-медицинской академии в Петербурге. Его учениками и последователями были Н. П. Ивановский (1843—1912), И. П. Виноградов (1847—1906), В. П. Крылов (1841—1906), а далее их преемники А. И. Моисеев (1857—1939), Ф. Я. Чистович (1870—1942), Г. В. Шор (1872— 1948), В. К. Высокович (1854—1912) и мн. др. И. И. Мечников и его ученики изучали реактивные процессы, развивающиеся в организме в борьбе с инфекциями. Им был открыт феномен фагоцитоза, который был далее изучен с сравнительно-анатомической точки зрения. Значимость этого феномена в ходе развития инфекционных процессов была широко представлена в трудах учеников И. И. Мечникова, работников Военно-медицинской академии (К. Ф. Славянский, Н. Я. Чистович и др.). Исследования защитных реакций организма и клеточных систем, участвующих в них, в дальнейшем вылились и в изучение тканевого обмена. |
Похожие:
 | Методические рекомендации для студентов к практическим занятиям по... Тема: «Структура и задачи патологоанатомической службы. Диагноз: требования к формулировке. Ятрогении. Методы биопсийного и цитологического... |  | Рабочая программа по патологической анатомии, клинической патологической... Рабочая программа учебной дисциплины одобрена на заседании кафедр патологической анатомии от «26» августа 2013г. Протокол №22 |
| Учебные комнаты кафедры патологической анатомии вгма переведены во... Юрьевского университета (до 1918 г.), кафедра патологической анатомии медицинского факультета Воронежского государственного университета... | | Рабочая программа по патологической анатомии, клинической патологической... Рабочая программа учебной дисциплины одобрена на заседании кафедр патологической анатомии от «26» августа 2013г. Протокол №22 |
| Методические рекомендации для студентов к практическим занятиям по... Тема: «Болезни пародонта и слизистой оболочки рта. Гингивит. Пародонтит. Пародонтоз. Пародонтомы (эпулисы). Десмодонтоз (прогрессирующий... | | Методические рекомендации для студентов к практическим занятиям по... Эндометриоз. Предопухолевые заболевания и опухоли шейки и тела матки. Болезни яичников, маточных труб и молочных желез. Эндометриоз... |
| Календарно-тематический план по дисциплине Анатомия № Введение в предмет. История развития анатомии как науки. Объект и методы анатомического исследовния. Плоскости, оси и основные ориентиры... | | Лекция I и проблема языка и сознания лекция II 31 слово и его семантическое... Монография представляет собой изложение курса лекций, про* читанных автором на факультете психологии Московского государственного... |
| Рефераты по клинической патологической анатомии Патологическая анатомия изменений в сердце при хронической сердечной недостаточности | | О проведении научно-практической конференции Заведующим кафедрами судебной медицины, травматологии, патологической анатомии и криминалистики |
| «Патологическая анатомия, секционный курс» Цель преподавания патологической анатомии изучение структурных основ болезней, их этиологии и патогенеза | | Рабочая тетрадь по учебно-клинической практике по патологической анатомии и вскрытию (отчет) По своему характеру история государства и права зарубежных стран пра вовая (юридическая) наука, поэтому она входит в число основных... |
| Тесты по патологической анатомии для студентов 3 курса При бронхоэктатической болезни в стенке бронхоэктаза обнаруживают все нижеперечисленные изменения, кроме | | Тесты по патологической анатомии для самоаттестации студентов стоматологического факультета При бронхоэктатической болезни в стенке бронхоэктаза обнаруживают все нижеперечисленные изменения, кроме |
| 1. Предмет и задачи курса «История государства и права Беларуси» Лекция Предмет «Истории государства и права Беларуси»: сущность, содержание, особенности | | «Патологическая анатомия, клиническая патологическая анатомия» Цель преподавания патологической анатомии изучение структурных основ болезней, их этиологии и патогенеза |
