Козлова З.Г., Цепалов В.Ф.
Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН, Москва
119334, Москва, ул. Косыгина, д. 4, e-mail: yevgeniya-s@inbox.ru
Цивилизация изменила многовековой уклад человечества, принося массу негативных факторов, а это отразилось на протекании важных физиологобиохимических процессов и привело к патологии различных органов. В целом ряде заболеваний наблюдается активация свободнорадикальных процессов, приводящих к структурным повреждениям тканей, что способствует прогрессированию заболеваний. С целью предотвращения или уменьшения патологического воздействия окислительно-восстановительного стресса в клинической практике используются биологически активные добавки (БАД), содержащие антиоксидантные комплексы, состоящие из витаминов (C, E, A), микроэлементов (цинк, селен, медь). Основным механизмом действия данных препаратов производители указывают их антиоксидантные свойства, что и должно определять их лечебный эффект в первую очередь. У современных людей доминируют болезни опорно-двигательного аппарата.
Задача данной работы состояла в определении исходного уровня антиоксидантной активности (АОА) БАД и лекарственных препаратов и сравнении их между собой. С этой целью мы провели изучение АОА in vitro следующих БАД и препаратов, используемых для лечения и профилактики заболеваний опорно-двигательного аппарата: Исцелин – Маурицен, Остеомакс. Остеомакс экстра; Био-Астин, Милона-6, Артризамин, Целебрекс, Артротек. Для определения АОА была использована методика высокочувствительной реакции инициированного окисления углеводорода изопропилбензола (Авторское свидетельство .№ 714273 от 15.10.1979., Цепалов В.Ф. и др.). Метод прямой, он высокочувствителен, точен и информативен. Анализ позволяет проводить исследование как жиро-, так и водорастворимых антиоксидантов (АО). Анализ последних проводили в смеси полярных и неполярных растворителей-углеводородов: к кумолу добавляли смесь н-гексана, диметилсульфоксида и воды.
В данной работе впервые получены количественные данные по жиро- и водорастворимым АО в лекарственных препаратах и БАД. Эти данные колеблются для жирорастворимых АО в пределах 7,2 . 10-4 – 4,3 . 10-2 М/кг и от 1,0 . 10-3 – 5,7 . 10-2 М/ кг для суммарного содержания жиро- и водорастворимых АО. В основном, все образцы, содержащие более 1,0 . 10-3 M/кг АО, являются потенциальным источником АО для организма. В лекарственном препарате Целебрекс присутствуют только жирорастворимые АО, водорастворимых АО – нет. Относительно высокое содержание АО в препаратах найдено в следующей последовательности: Исцелин, Био-Астин, Милона-6, Артризамин, Артротек, Целебрекс.
Метод анализа позволяет выявлять лекарственные препараты и БАД с относительно высоким содержанием в них АО, что может быть использовано в качестве одного из критериев выбора препарата с более сильным биологическим эффектом.
ИЗУЧЕНИЕ АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТИ ПЛОДОВ
AMELANCHIER SPICATA И ARONIA MELANOCARPA КАК СЫРЬЯ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ПИЩЕВЫХ ДОБАВОК
Колбас Н.Ю.
УО Брестский государственный университет имени А.С. Пушкина, г. Брест, 224016, бульвар Космонавтов 21, г. Брест, Республика Беларусь, +375-162-23-16-32, n.kolbas@gmail.com
Плоды растений содержат широкий спектр биологически активных веществ, что позволяет использовать их для производства биологически активных добавок различного действия, в том числе и антиоксидантного. При этом необходимо добиться максимальной экстракции полезных веществ растительного сырья, а затем и сохранения их целебных свойств.
Целью данного исследования была оценка антиоксидантной активности и состава фенольных соединений экстрактов плодов Amelanchier spicata (Lam.) С. Koch и Aronia melanocarpa (Michx) Elliot. в зависимости от способа их заготовки. Спиртовую экстракцию свежих и высушенных плодов проводили в соотношении 1г образца (в пересчете на сухой вес) на 10 мл этилового спирта финальной концентрации 70%, с периодическим перемешиванием и настаиванием 14 суток при комнатной температуре без доступа света. Антиоксидантную активность тестируемых экстрактов оценивали по способности ингибировать долгоживущий катион-радикал ABTS•+ (2,2'-азинобис[3-этил-2,3-дигидро-6-бензотиазол-сульфокислота]). Данная методика эффективна для определения как гидрофильных так и липофильных антиоксидантов в широких пределах рН. К 1 мкл исследуемого экстракта добавляли 3 мл рабочего раствора ABTS•+, регистрировали изменение оптической плотности смеси при λ 734 нм после 10 минут инкубации при температуре 250С и постоянном перемешивании. Общее содержание фенольных соединений определяли методом Folin-Ciocalteau и выражали в эквивалентах галловой кислоты, для количественного анализа антоцианов в пересчете на цианидин хлорид применяли метод Ribéreau- Stonestreet. В ходе исследования определено, что содержание фенольных соединений экстрактов высушенных плодов в 1,6-2,5 раза выше, чем экстрактов свежих плодов и составило для Amelanchier spicata 3,3342±0,019 и 1,3584±0,024 соответственно, для Aronia melanocarpa − 4,8797±0,039 и 2,9924±0,058 в мг галловой кислоты на мл экстракта. При этом наблюдались лишь незначительные отличия в антиоксидантной активности исследуемых экстрактов. Ранее проведенные исследования, а так же сопоставление полученных данных с литературными, позволяют относить плоды Aronia melanocarpa и Amelanchier spicata к группе растительного сырья высокой аниоксидантной активности. Кроме того высокое содержание антоцианов: 2,3791±0,007 мг цианидин хлорида на мл экстракта для Aronia melanocarpa и 1,571±0,010 – для Amelanchier spicata, позволяют рекомендовать данные плоды к использованию в пищевой промышленности в качестве красителей естественного происхождения.
ВЛИЯНИЕ ИНТЕНСИВНОСТИ ОСВЕЩЕНИЯ И ТЕМПЕРАТУРЫ НА СОДЕРЖАНИЕ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫХ АНТИОКСИДАНТОВ В ЛИСТЬЯХ И СТЕБЛЯХ ВОДЯНОГО КРЕССА
Кононков П.Ф., Гинс М.С., Гинс В.К
Всероссийский научно-исследовательский институт селекции и
семеноводства овощных культур, 143080, п. ВНИИССОК, Московская область, Россия, vniissok@mail.ru
Растения водяного кресса (Nasturtium ofbicinale R.Br.), интродуцированные в Россию из Кубы проф. П.Ф. Кононковым, и созданный на их основе сорт Подмосковный, выращивали в защищенном грунте ВНИИССОК в течение года. Выявлена прямая зависимость содержания аскорбиновой кислоты в листьях и черешках от интенсивности освещения и температуры окружающей среды. Показан синтез антоцианов de novo в стеблях, окрашивающих их в темно-фиолетовый цвет, в ответ на высокую интенсивность освещения (таблица). Одновременно в стеблях увеличивалось содержание аскорбиновой кислоты, которое положительно коррелировало с увеличением концентрации антоцианов и фракции конденсированных и полимерных фенолов. В листьях водяного кресса наблюдали возрастание содержания аскорбиновой кислоты и флавоноидов (флавонолов и флавонов). Предполагается, что в условиях высокой интенсивности освещения и температуры при развитии неспецифического окислительного стресса система антиоксидантной защиты в листьях формируется путем возрастания количества флавонолов и флавонов, в то время как в стеблях высокая интенсивность освещения индуцировала синтез антоцианов. Это может быть связано с различной ответной реакцией растения на повышенную интенсивность освещения, позволяющее ему адаптироваться к новым условиям различными путями в листьях и стеблях.
Таблица. Влияние интенсивности освещения на фракционный состав и содержание фенольных соединений водяного кресса (% на абсолютно сухую массу) и количество аскорбиновой кислоты (мг%).
Интенсивность освещения
|
Орган растения
|
Сумма ФС
|
Простые фенолы и фенолкарбоновые кислоты (±0,05)
|
Флаво-ноиды
(±0,11)
|
Антоци-аны/
Лейкоантоци-аны
|
Конденси-рованные и поли-мерные ФС (±0,11)
|
Аскор-биновая кислота, мг%
|
15клк
|
Листья
|
5,52
|
0,71
|
4,07
|
-/-
|
0,74
|
70,0
|
40клк
|
Листья
|
5,48
|
0,53
|
3,84
|
-/-
|
1,11
|
160,0
|
15клк
|
Стебель зеленый
|
4,59
|
0,34
|
1,17
|
-/1,77
|
1,31
|
20,4
|
40клк
|
Стебель с пигментом
|
5,30
|
0,24
|
0,57
|
2,67/ 0,77
|
1,05
|
50,0
|
АНТИОКСИДАНТНАЯ АКТИВНОСТЬ НЕКОТОРЫХ
ГИДРОКСИБЕНЗИЛСУЛЬФИДОВ И
ГИДРОКСИАРИЛПРОПИЛСУЛЬФИДОВ, А ТАКЖЕ ИХ
СУЛЬФОКСИДОВ НА МОДЕЛИ ТЕРМИЧЕСКОГО
АВТООКИСЛЕНИЯ СВИНОГО ЖИРА
Коробицина Е.В., Нестерович С.Л., Просенко А.Е.
Научно- исследовательский институт химии антиоксидантов
Новосибирского государственного педагогического университета
630126, г Новосибирск, ул. Вилюйская, 28. Факс (383) 244-18-56, Е-mail: chemistry@ngs.ru
В течение последних лет в НИИ химии антиоксидантов был синтезирован ряд высокоэффективных серосодержащих фенольных антиоксидантов на основе 2,6-диметил- и 2,6-ди-трет-бутилфенола. Полученные на настоящий момент экспериментальные данные относительно противоокислительной эффективности и биологической активности свидетельствуют о том, что соединения такого рода могут успешно использоваться в медицине и косметологии.
Известно, что все лекарственные средства в организме человека претерпевают ряд разнообразных физико-химических и биохимических превращений, в результате которых биологическая активности исходного препарата может ослабевать или усиливаться. По данным литературных источников, биотрансформация органических сульфидов в организме человека происходит путем S-окисления с образованием сульфоксидов как первичных метаболитов. В связи с этим, представляет определенный интерес проведение сравнительных исследований антиоксидантной активности сульфоксидов и сульфидов аналогичного строения.
В настоящей работе исследованы антиокислительные свойства фенольных сульфидов и сульфоксидов бензильного (Ι) и пропильного (ΙΙ) типа с различных характером пространственного экранирования фенольной ОН-группы в широком диапазоне концентраций на модельной реакции термического автоокисления лярда.
Окисление проводили при 133ºС в условиях барботажа кислородом. Концентрация исследуемых соединений составляла 1, 1.5 и 2.75 мкмоль/г.
Показано, что все исследованные бензильные сульфоксиды в малых концентрациях значительно превосходят по значениям периодов индукции сульфиды аналогичного строения. При этом, с увеличением степени пространственного экранирования фенольной ОН-группы (замена метильных о-заместителей трет-бутильными) данная тенденция ослабевает. С повышением концентрации преимущество сульфоксидов перед сульфидами сокращается. Сульфоксиды пропильного ряда по своей способности ингибировать окисление свиного жира очень близки к соответствующим сульфидам. Замена о- метильных групп трет-бутильными также приводит к некоторому снижению антиоксидантной активности, однако данная закономерность не столь очевидна, как в случае гидроксибензилтиопроизводных.
В целом, было установлено, что в результате реакции окисления гидроксибензилсульфидов до сульфоксидов, протекающей при биотрансформации в биологических системах, активность исходного препарата не ослабевает, а напротив, повышается. В работе обсуждаются возможные причины данного явления.
ФЛАВОНОИДНЫЕ БИООКСИДАНТЫ КАЗАХСТАНСКИХ
РАСТЕНИЙ РОДА SEDUM
Корулькин Д.Ю., Абилов Ж.А.
Казахский национальный университет им. аль-Фараби, г. Алматы
Казахстан, 050012, г.Алматы, ул. Карасай батыра, 95А,
e-mail: physcion@rambler.rи
Для выделения флавоноидов из травы 11 казахстанских видов Sedum, сырье исчерпывающе экстрагировалось 30% водным этанолом с последующим фракционированием концентрата бензолом, хлороформом, этилацетатом и бутанолом. Концентрированные извлечения разделяли на колонке с сефадексом LH-20, элюируя компоненты водой и водно- спиртовыми смесями.
В результате выделен и идентифицирован 21 флавоноидный гликозид, среди которых один оказался новым, структура которого установлена комплексом химических и спектральных данных. Это 3-O- β-D-галактопиранозидо-(2→1)-О-β-D-ксилопиранозид 5,7,3’,4’-тетраоксифлавона.
Для 5 флавоноидных гликозидов изучено антиоксидантное действие при добавлении их к сухому молоку. Установлено влияние растворимости гликозидов и концентрации их на величину и характер антиоксидантного действия, а также удлинение сроков хранения молока.
В частности, при использовании изученных соединений в концентрациях от 0.1 до 0.5%, обеспечивается продление срока хранения молока в 2-3 раза и, одновременно ведет к улучшению его качества, по-видимому, за счет снижения в нем продуктов окисления и сохранения процента жирности.
Известно, что не только рутин, но и другие флавоноидные гликозиды, в той или иной мере, обладают Р-витаминной активностью, за счет чего также может улучшиться не только сохранность, но и питательная ценность молока.
ИНТЕНСИВНОСТЬ ПРОЦЕССОВ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ И УРОВЕНЬ СИСТЕМЫ АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ У ДОМАШНИХ ЖИВОТНЫХ (СОБАК).
Костромитинов Н. А. ,1 Суменкова Е. А.
ООО «Ветбиохим», 105120 г. Москва 3-й Сыромятнический переулок д. 3 / 9.
!ООО «ВИТА» г. Москва ул Канетимировская д.3 корп.6
тел. 89153330937, эл. почта: Kostromitinow@yandex.ru
Изучение процессов перекисного окисления липидов является основой для решения вопроса о целесообразности применения антиоксидантов в комплексе лекарственной терапии при заболеваниях различного генеза. Актуальность проблемы продиктована, прежде всего, необходимостью разработки принципов фармакокоррекции нарушений перекисного окисления липидов (ПОЛ) и системы антиоксидантной защиты (АОЗ) с помощью отечественных лекарственных препаратов, обладающих низкой токсичностью.
Целью работы являлось изучение интенсивности процессов перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты организма у здоровых собак.
Материалы, методы и результаты исследования. Интенсивность ПОЛ и состояние АОЗ методом хемилюминесценции (ХЛ) определяли у 25 собак, которых разделили на 5 групп (в зависимости от возраста), по 5 голов в каждой.
Методом хемилюминесценции установлено, что показатели светосуммы и максимальной светимости были наибольшими в период половой зрелости организма (7-12 мес.), указывающие на то, что процессы перекисного окисления липидов (ПОЛ) в этом возрасте превалируют над суммарной антиоксидантной активностью крови. В данном возрасте состояние гуморально-клеточного иммунитета не стабильно и животные являются наиболее предрасположенными к заболеваниям различного характера. Такое же явление отмечено у стареющих животных в возрасте 8 - 9, 10 и 12 лет.
При достижении зрелости организма (с 1,5 до 3х лет) интенсивность процессов ПОЛ в организме снижается, а уровень антиоксидантной активности крови, характеризующейся снижением показателей светосуммы и максимальной светимости в среднем в 1,6 раза и повышением угла наклона графической кривой в среднем в 1,8 раза.
У собак среднего возраста (от 4 до 6 лет), интенсивность процессов ПОЛ в организме повышается, а уровень антиоксидантной активности крови незначительно снижается, характеризующейся повышением показателей светосуммы и максимальной светимости в среднем в 2,8 раза.
Полученные данные свидетельствуют о том, что при достижении 1,5 – 3х – летнего возраста и до 6 лет стабилизируется интенсивность процессов ПОЛ и суммарная антиоксидантная активность крови.
Из вышесказанного следует, что у собак в период 1,5 –3х годовалого возраста и до 6 лет происходит стабилизация защитных систем организма.
Вывод. Методом хемилюминесценции (ХЛ) определено изменение интенсивности процессов ПОЛ и антиоксидантной активности крови у здоровых собак в зависимости от возраста. В зависимости от возраста у здоровых собак породы восточно-европейская овчарка процессы ПОЛ протекают как с накоплением наибольшего количества ТБК- активных продуктов, так и с повышением уровня антиоксидантной защиты организма, сопровождающееся повышением активности каталазы, пероксидазы, а также уровня церулоплазмина, фосфолипидов и -липопротеидов. Причем, у животных в возрасте от 1,5 до 6 лет процессы ПОЛ и состояние системы АОЗ организма стабилизированы и уравновешены. |
