Отчет о научно-исследовательской работе по Государственному контракту от «07» июля 2009 г. №02. 740. 11. 0270 по теме: «Разработка методик и создание биохимических коллоидных систем для ветеринарно-биологических и зоотехнических направлений»
Скачать 2.98 Mb.
|
2.1.4 Мембранное пищеварение как физиолого-биохимический коллоидно-ферментный процесс В настоящее время установлено, что, кроме двух классических типов пищеварения (внеклеточного и внутриклеточного) существует третий тип - мембранное пищеварение, которое осуществляется в момент контакта пищевых субстратов с поверхностными ферментами мембран микроворсинок кишечных клеток. Открытие мембранного пищеварения позволило приблизиться к пониманию таких сторон функционирования пищеварительного тракта, как поразительно высокие скорости переваривания пищи, которые невозможно воспроизвести in vitro; высокоселективные и специфические заключительные стадии расщепления пищевых веществ; высокоэффективное сопряжение пищеварительных и транспортных процессов; природа многих нарушений пищеварительно-транспортных функций желудочно-кишечного тракта и т.д. [78-89]. Первый этап – внеклеточное пищеварение – происходит в пищеварительных полостях и заключается в разрушении сложных тканевых и клеточных структур пищи, в дезагрегации физико-химических и химических комплексов, входящих в состав биологических структур пищевого продукта, ив разрыве ряда первичных химических связей в молекулах биополимеров [78-79]. Второй этап – мембранное пищеварение – продукты промежуточного гидролиза элиминируются в зону щеточной каймы, где происходят дальнейшие этапы обработки. Конечные продукты переваривания (в большинстве случаев мономеры) передаются с помощью механизмов, обсуждаемых ниже, с гидролитической на транспортные системы мембран [67, 74, 81]. Активность экзогидролаз обнаруживается главным образом в структурах слизистой оболочки, лишь 10 % или менее — в полости кишки. Эндогидролазы, обеспечивающие начальные этапы гидролиза, напротив, преобладают в полости [81]. Чрезвычайно важно то обстоятельство, что в разгар пищеварения ферменты, осуществляющие конечные стадии гидролиза, как и на фоне голода, прочно связаны со структурами слизистой тонкой кишки и поступают в ее полость лишь в незначительных количествах [82, 83, 87]. Таким образом, мембранный гидролиз является промежуточным (вторым) этапом ассимиляции пищевых веществ и должен рассматриваться как «акцепторный» механизм по отношению к полостному пищеварению и «донорный» – по отношению к мембанному транспорту и внутриклеточному пищеварению [78, 81, 85]. В настоящее время акцентируется главным образом лишь одна функциональная характеристика мембранного пищеварения – его связи с процессами всасывания, благодаря чему поверхность микроворсинок превращается в пищеварительно-транспортную систему. Не менее важными, однако, являются и другие аспекты проблемы: эффективность пищеварительного конвейера, образованного мембранным пищеварением вместе с полостным; стерильность мембранного пищеварения; - роль мембранного пищеварения как важного сепараторного и барьерного механизма [87]. Наконец, мембранное пищеварение является функцией клеточных мембран и не всегда требует наличия щеточной каймы. Имеются серьезные основания думать, что мембранное пищеварение в процессе эволюции возникло раньше, чем щеточная кайма, и существует уже на «гладких» поверхностях мембран бактерий и дрожжей [85]. У большинства многоклеточных беспозвоночных, всех млекопитающих и птиц основой мембранного пищеварения является щеточная кайма энтероцитов. Структура и ультраструктура щеточной каймы подробно охарактеризованы во многих работах [80, 81,85,90]. Щеточная кайма энтероцита – супрамолекулярная структура, образованная очень большим числом протоплазматических пальцеобразных выростов (микроворсинок), число которых достигает 50-200 млн. на 1 мм² площади слизистой оболочки. Каждая микроворсинка состоит из «протоплазматической стромы» и собственно мембраны. При электронной микроскопии обнаруживается ряд важных деталей, например, что мембрана состоит из отдельных субъединиц, придающих такой структуре большое функциональное значение. Эти два типа структур (ламинарная мембрана и глобулярные субъединицы) в действительности отражают два функциональных состояния мембраны. При высоких разрешениях электронного микроскопа можно видеть, что от внешней поверхности мембраны отходят многочисленные извитые нити, образующие гликокаликс (дополнительный примембранный слой). Нити гликокаликса являются продуктом деятельности данного энтероцита, «растут» из мембраны микроворсинок, а не являются адсорбированными мукополисахаридами слизистых клеток. Пористая структура щеточной каймы обеспечивает не только резкое увеличение пищеварительно-транспортной поверхности в 20-60 раз, но и определяет многие функциональные особенности процессов, происходящих на поверхности микроворсинок. Эта зона недоступна бактериям (в силу небольшого размера межворсинчатых пор, поэтому заключительные стадии гидролиза и начальные этапы всасывания происходят в стерильных условиях. Кроме того, здесь возникает своеобразное явление переноса веществ, характерное для очень малых капилляров, а также увеличивается вероятность контакта веществ, поступающих в поры щеточной каймы, с мембраной микроворсинок [82, 83, 85]. Высота микроворсинок неодинакова у разных видов животных и зависит от участка кишечника, типа питания, возраста, функционального состояния. В среднем длина одной микроворсинки равна 1 мк, диаметр ее в 10-15 раз меньше. Толщина слоя гликокаликса довольно значительна. Предполагается, что гликокаликс также влияет на всасывание, иммунологическое поведение, адгезионные силы. Он предупреждает проникновение на поверхность липопротеиновой мембраны крупных частиц, подвергшихся гидролизу полимеров пищи и бактерий. Одновременно гликокаликс влияет на протекание процессов мембранного гидролиза и транспорта, на что впервые обратил внимание S. Ito. Благодаря гликокаликсу между кишечной средой и поверхностью биомембраны образуется автономный слой жидкости, который предлагается называть перицеллюлярным слоем, или перицеллюлярной средой. Выбрасывание гликокаликса из щеточной каймы необходимо для очистки пор в «пористых реакторах от загрязнения» и осуществляется в результате быстрого обновления гликокаликса. Поэтому нарушение продукции гликокаликса при различных патологических состояниях увеличивает вероятность воздействия повреждающих агентов на биомембрану. Кроме того, гликокаликс, по-видимому, придает известную жесткость структуре щеточной каймы: все пространство между микроворсинками занято одним гликокаликсом, который предупреждает их слипание, изгибы и другие деформации. Предполагается, что сетчатая структура гликокаликса возникает в результате образования лабильных мостиков путем связывания анионных групп соседних нитей двухвалентными катионами. Ячейки такой сети достаточно подвижны, что позволяет понять, каким образом может происходить поступление ферментов и других веществ внутрь гликокаликсного пространства. С другой стороны, наличие катионных мостиков придает гликокаликсу большое сходство с заряженным молекулярным ситом и позволяет допустить избирательное по величине и заряду накопление веществ в гликокаликсном пространстве [90, 91]. Таким образом, гликокаликс выполняет следующие функции: - служит постоянно обновляющимся физическим фильтром, ограничивающим доступ к плазмалемме энтероцита частиц среды (химуса) определенного размера. Именно поэтому мембранное пищеварение в норме осуществляется в стерильной зоне, недоступной для бактерий; - является структурой, на которой локализованы гидролитические ферменты, осуществляющие конечные стадии переваривания пищевых веществ (мембранное пищеварение). Это могут быть как экзогенные ферменты (ферменты секрета поджелудочной железы и кишечного сока), так и эндогенные, синтезируемые самим энтероцитом. Как правило, эндогенные ферменты встроены в мембрану энтероцита, а экзогенные связаны с нитями гликокаликса. Каталитические центры ферментов обращены в направлении контакта с субстратом гидролиза. Экзогенные ферменты гликокаликса последовательно гидролизуют полимеры и олигомеры, а эндогенные - олигомеры и димеры. В результате такого последовательного гидролиза на мембране энтероцита образуются мономеры, которые транспортируются в цитоплазму энтероцита. Эндогенные ферменты и структуры транспорта взаимодействуют как единый механизм; - обеспечивает непрерывность трансмембранного обмена веществами энтероцита со средой, непрерывное взаимодействие процессов полостного пищеварения, мембранного пищеварения и транспорта (всасывания) питательных веществ внутрь клетки; - участвует в осуществлении энтероцитом функции иммунитета; - предотвращает слипание, изгибы и другие деформации микроворсинок мембраны (щеточная каемка), придает им жесткость (Т.S. Ко, 1964, 1965, 1969 и др.; А.В. Крыгин, 1962; А.В. Асатиани, А.Н. Бакурадзе, 1975;). Мембранное пищеварение обнаружено на всех ступенях эволюционной лестницы. У человека и высших животных этот тип пищеварения осуществляется в тонкой кишке и реализуется ферментами, связанными со структурами мембран кишечных клеток. Мембранное пищеварение происходит благодаря наличию на поверхности плазматической мембраны энтероцитов слоя ферментов, осуществляющих при контакте с пищевыми веществами их гидролитическое расщепление. К таковым ферментам относятся: - панкреатические, которые секретируются клетками поджелудочной железы, поступают вместе с ее соком в тонкую кишку, где адсорбируются на апикальной поверхности кишечных клеток (поэтому такие белки классифицируются как периферические); - мембранные (интегральные и полуинтегральные) которые синтезируются в самих кишечных клетках и затем встраиваются в их апикальную мембрану. В отличие от адсорбированных панкреатических ферментов мембранные прочно связаны с липопротеиновой мембраной микроворсинок щеточной каймы кишечных клеток, что объясняется их молекулярной структурой. Ферментативно активные белки мембраны кишечных клеток - олигомеры с большой молекулярной массой, как и другие трансмембранные белки, относятся к амфипатическим белкам, т.е. состоят из гидрофильной и гидрофобной частей. Гидрофильная часть выполняет каталитическую функцию, несет на себе углеводные остатки и существенно выдается над уровнем мембраны, гидрофобная - пронизывает мембрану и может частично выступать на ее внутренней поверхности. Активные центры ферментов обращены в полость тонкой кишки, т.е. ориентированы по отношению к мембране и водной среде. Этим мембранное пищеварение принципиально отличается от внутриклеточного и внеклеточного типов, но оно малоэффективно по отношению к крупным молекулам и тем более их комплексам. Теория мембранного пищеварения послужила поводом для фундаментального исследования роли поверхности эпителия кишки высших животных в осуществлении заключительных стадий гидролиза пищевых веществ. Мембранное пищеварение осуществляется как с помощью сорбированных экзогидролаз поджелудочной железы, так и собственно кишечных ферментов — эндогидролаз. Ферменты мембранного пищеварения фиксированы определенным образом по отношению к мембране и водной фракции. Мембранная локализация ферментов обеспечивает возможность образования ферментно-транспортных систем, тем самым связывая гидролиз и всасывание в единый процесс [85, 87]. Основной структурной клеткой, реализующей комплекс пищеварительных функций, является кишечная клетка — энтероцит. Столбчатые (каемчатые) клетки тонкой кишки (энтероциты) являются производными популяции стволовых клеток крипт. Все разновидности эпителиоцитов (столбчатые, бокаловидные, эндокриноциты, клетки Панета) образуются из камбиальных клеток крипт, откуда они (за исключением клеток Панета) мигрируют на кишечные ворсинки. Процесс миграции занимает от 3 до 6 сут, в течение которых происходит их дифференцировка. Метельский [80, 92]. Говоря о мембранном пищеварении, имеют в виду биохимическую коллоидную систему (БКС), состоящую из плазматической мембраны и гликокаликса. Специальная структурная организация энтероцитов обеспечивает эффективное выполнение ими пищеварительно-транспортных функций в тонкой кишке. Некоторые особенности мембранного пищеварения (структурная и функциональная связь с процессами всасывания, наличие пищеварительной цепочки, связывающей процессы полостного и мембранного гидролиза, стерильность мембранного пищеварения, его роль как барьерного механизма) обусловливают высокую эффективность этого типа пищеварения в осуществлении заключительных этапов ассимиляции пищевых веществ в организме [81, 83]. В исследованиях последних лет при электронной и сканирующей микроскопии выявлена зона пристеночного пищеварения, предшествующая мембранному. Р.А. Бродский и соавт. (1982), И.А. Морозов (1980, 1982) показали, что люминарная поверхность слизистой оболочки тонкой кишки покрыта слоем слизи. В этом слое обнаружены панкреатические и собственно кишечные ферменты. Слой пристеночных слизистых наложений, морфологически связанный с ультраструктурами поверхности слизистой оболочки, является зоной, ферментный аппарат которой может частично обеспечивать деградацию поли- и олигомеров питательных веществ. Слою слизистых наложений приписывается защитная, смазывающая функция, а также роль активного неспецифического химического барьера. Обнаружение в кишечной слизи активных ферментов выдвинуло ее на первый план в роли пищеварительного барьера, завершающего гидролиз питательных веществ перед их попаданием на мембраны эпителиоцитов. Важная роль слизи в транспорте веществ и иммобилизации в ней гидролитических ферментов обусловливает постоянный интерес к ее химическому составу, молекулярной структуре и физическим свойствам [93, 94]. Необходимость проникновения через мембрану энтероцитов ограничивает возможности внутриклеточного пищеварения и делает его эффективным в отношении соединений небольшого размера. Внутриклеточное пищеварение может осуществляться при пиноцитозе и эндоцитозе [78-85]. Мембранный гидролиз продолжает осуществляться внутри эндоцитозных везикул в процессе транспорта нутриентов через эпителиальную клетку, т.е. речь идет о внутриклеточном эндо-везикулярном мембранном пищеварении [94]. Мембранное пищеварение объединяет процессы внеклеточного пищеварения и всасывания, что облегчает проникновение расщепленных продуктов в клетку. Для лучшего понимания мембранного пищеварения, за счет которого расщепляется более 80 % всех химических связей в пищевых полимерах, подробнее рассмотрим строение апикальной части кишечной клетки, так как именно ее ферментным аппаратом обусловлен этот столь эффективный и жизненно важный механизм [85].  Рисунок 3 - Схема взаимодействий внеклеточного и мембранного пищеварений в тонкой кишке. Гидролиз высокомолекулярных пищевых субстратов происходит в полости и на внутренней поверхности тонкой кишки. Дальнейшая деполимеризация продуктов гидролиза протекает на липопротеиновой мембране за счет адсорбированных преимущественно панкреатических ферментов (промежуточные этапы гидролиза) и собственно мембранных (заключительные этапы). 1 - мембрана, 2 - микроворсинки, 3 - апикальный гликокаликс, 4 - латеральный гликокаликс, 5 - высокомолекулярные субстраты, 6 - низкомолекулярные субстраты, 7 - панкреатические ферменты, 8 - мембранные ферменты, 9 - транспортная система мембраны, 10 - регуляторные центры ферментов, 11 - каталитические центры ферментов, 12 - продукты. Питательные вещества, проходя через слой слизи, подвергаются воздействию многочисленных ферментов (рис. 3). Гликокаликс адсорбирует из полости тонкой кишки ферменты пищеварительных соков, которые осуществляют промежуточные стадии гидролиза всех основных питательных веществ. Продукты гидролиза поступают на апикальные мембраны энтероцитов, в которые встроены кишечные ферменты, осуществляющие собственное мембранное пищеварение, в результате которого образуются мономеры, способные всасываться. Благодаря близкому расположению встроенных в мембрану собственных кишечных ферментов и транспортных систем, обеспечивающих всасывание, создаются условия для сопряжения процессов конечного гидролиза питательных веществ и начала их всасывания. Для мембранного пищеварения характерна следующая зависимость: секреторная активность эпителиоцитов убывает от крипты к вершине кишечной ворсинки. В верхней части ворсинки идет в основном гидролиз дипептидов, у основания - дисахаридов. Пристеночное пищеварение зависит от ферментного состава мембран энтероцитов, сорбционных свойств мембраны, моторики тонкой кишки, от интенсивности полостного пищеварения, диеты. На мембранное пищеварение оказывают влияние гормоны надпочечников (синтез и транслокация ферментов). Пищевые продукты поступают в организм, главным образом, в виде полимеров, однако углеводы, белок и жиры появляются в итоге в крови в виде их составных частей — мономеров. Процесс гидролиза пищевых веществ до составляющих их мономеров называется перевариванием. Процесс переваривания происходит за счет полостного, внутриклеточного, мембранного пищеварения [78, 79, 83, 95-98]. Конечным продуктом амилазного переваривания крахмала и гликогена является мальтоза. После пептического и панкреатического протеолиза средний пищевой белок превращается в смесь, состоящую в основном из пептидов; содержание свободных аминокислот в смеси составляет приблизительно 20 % от общего количества. Таким образом, в результате переваривания в физиологических условиях углеводные и белковые продукты поступают в транспортные системы мембран щеточной каймы тонкой кишки большей частью в виде мальтозы, аминокислот и небольших пептидов. Последние расположены на той же клеточной поверхности, что и пищеварительные ферменты, благодаря чему особенно эффективной становится работа всех ферментов БКС как ферментативно-транспортных ансамблей [83, 85, 89, 99, 100 ]. Эпителии могут транспортировать растворенные вещества в двух направлениях: всасывание (или реабсорбция в почках) и секреция. Транспорт жидкости по отношению к плазме может быть или изотоничным, или гипертоничным. Двухмембранная модель трансэпителиального транспорта растворенных веществ (основная концепция) предполагает векторную природу транспортирующих эпителиев, когда вещества входят в клетку через одну мембрану и выходят через другую. Ионы попадают в клетки двумя путями: с помощью ионных каналов или с помощью переносчиков. Энергию для входа ионов в клетку обычно обеспечивает электрохимический градиент Na+ через плазматическую мембрану, генерируемый и поддерживаемый функционированием Na+/К+-АТФ-азного насоса. Этот насос чаще всего локализован на мембране, обращенной в кровь. Благодаря работе указанного насоса внутриклеточная концентрация Na+ составляет 10-20 мМ, а К+ — 90—120 мМ. Энергия, которую можно получить из электрохимического потенциала Na+ (разность ионных концентраций + разность электрических потенциалов на мембране) и которая выделяется, когда входящий Na+ пересекает плазматическую мембрану, может быть использована другими транспортными системами. Следовательно, Nа+/К+-АТФ-азный насос выполняет две важные функции: откачивает из клеток Na+ и генерирует электрохимический градиент, обеспечивающий энергией механизмы входа растворенных веществ. Таким образом, характерной особенностью транспорта веществ эпителиоцитами является то, что он осуществляется через монослой клеток (трансэпителиальный транспорт). Эпителиоциты кишечника (энтероциты) асимметричны, или поляризованы: апикальная и базальная мембраны отличаются друг от друга по проницаемости, набору ферментов, величине разности потенциалов и выполняют неодинаковые транспортные функции [101]. Наиболее важные продукты пищеварения (расщепления пищевых полимеров на мономеры), или нутриенты, оказываются в энтероцитах за счет активного транспорта. Механизм активного транспорта нутриентов, который осуществляется против градиента электрохимического потенциала, предполагает сопряжение с какой-либо экзэргонической реакцией, служащей движущей силой активного транспорта. Транспортные системы мембран подразделяются на первично-энергизированные транспортные системы (насосы) и вторично-энергизированные транспортные системы (котранспортеры). В отсутствие утилизируемой свободной энергии трансмембранные потоки пассивны. Примером насоса является, например, Na+/К+-АТФ-аза. Примером экзэргонической сопряженной реакции другого типа, распространенность и значение которой выяснились в последние годы, является движение некоторых одновалентных ионов, в частности натрия, по электрохимическому градиенту через мембрану. Бурный прогресс в физиологии транспортных процессов, наблюдающийся в последние годы, обусловил появление нескольких принципиально новых направлений исследования. Одним из основных достижений в физиологии транспортных процессов за последние десятилетия явились разработка метода фиксации потенциала (или метода тока короткого замыкания Юссинга) и модели трансклеточного транспорта Na+ Юссинга [102]. Cопряженный транспорт ионов и нутриентов, протекающий в тонкой кишке любых животных, можно изучать с двух равноценных точек зрения — биохимии и биофизики (например, электрофизиологии). С помощью биохимических методов определяют всасывание нутриентов и влияние на этот процесс соответствующих ионов, а методами электрофизиологии определяют токи, генерируемые при перемещении ионов через мембраны, и влияние на этот процесс соответствующих нутриентов. Исторически сложилось так, что биохимия и биофизика сопряженного транспорта нутриентов оказались существенно различными областями знания, которые редко взаимодействуют между собой напрямую. Академик A.M. Уголев был первым в мире, кто еще в 1979 г. в пределах одного коллектива (Лаборатории физиологии питания Института физиологии АН СССР) объединил оба эти направления, что до сих пор приносит свои плоды. Эпителиальные клетки кишечника, как известно, отличаются выраженной полярностью, части их плазматической мембраны, обращенные в просвет органа и во внутреннюю среду организма, имеют существенные морфологические различия. Зона контакта между эпителиальными клетками представляет собой высокоспециализированную область, которая не только обеспечивает механическую прочность эпителия, но и служит барьером на пути миграции белков плазматической мембраны с одной стороны клетки на другую. Поскольку растворенные вещества и вода транспортируются из полости кишки через эпителиальный пласт преимущественно в одном направлении, то его клетки должны быть поляризованы таким образом, чтобы вещества входили через апикальную плазмалемму и выходили через базолатеральную мембрану. Вследствие этого транспортные свойства обеих мембран различаются. Транспортные белки, будучи синтезированы внутри клетки, должны быть интегрированы в различные части плазматической мембраны. Попав в соответствующие части плазмалеммы, указанные белки должны там и оставаться, деля мембрану эпителиальной клетки на две части: — люминальную, или апикальную мембрану, и базолатеральную мембрану, обращенную к собственной пластинке слизистой оболочки, содержащей многочисленные микрососуды. Объединение клеток в клеточные ансамбли, формирующие ткани, происходит не случайным образом. Клетки образуют высокоупорядоченные структуры. При образовании ткани отдельные клетки занимают в ткани определенное положение, необходимое для взаимодействия и согласованного функционирования клеток и надклеточных структур. Специфические функции ткани обеспечиваются сложным взаимодействием ткани с окружающей средой. Адгезия клеток как тканеобразующий фактор сопряжена с множеством сигнальных процессов, контролирующих передачу информации между соседними клетками. Так, эпителиальные клетки, выстилающие пищеварительный тракт, прикрепляются друг к другу благодаря плотным контактам. Эти клетки располагаются на тонкой базальной мембране. В эпителии имеется особое соединение клеток, которое, во-первых, обеспечивает связь и взаимодействие между клетками и, во-вторых, благодаря наличию филаментов придает клеткам устойчивость к физическим воздействиям [103]. Различают следующие группы контактов, соединяющих эпителиоциты с внеклеточным матриксом и между собой: - плотные, или запирающие контакты, формирующие непроницаемый барьер между соседними клетками и предотвращают проникновение даже мельчайших молекул [например, ионов] с одной стороны эпителиального пласта на другую. - прикрепительные контакты, прикрепляющие клетки друг к другу и к внеклеточному матриксу. - коммуникационные контакты, пропускающие небольшие молекулы и электрические сигналы между соседними клетками. Молекулы, проникающие в клетку через апикальную плазмалемму, выходят из нее через базолатеральную плазмалемму и поступают в кровь. Следовательно, в поляризованном эпителиоците многие клеточные белки (например, транспортеры углеводов или аминокислот и ионные насосы) находятся в составе только апикальной или только базолатеральной мембраны. Щелевые контакты — это наиболее распространенные клеточные контакты. Под электронным микроскопом они выглядят как участки, разделяющие плазматические мембраны соседних клеток узкой щелью шириной 2-4 нм. Щелевой контакт построен из белковых субъединиц, называемых коннексинами (26 000-54 000 Д). Шесть идентичных субъединиц формируют кольцевидную структуру, называемую коннексоном. При совмещении коннексонов двух соседних клеток образуется водный канал, по которому могут проходить небольшие молекулы (<1000 Д). Всасывание – это физиологический процесс, в результате которого происходит перенос веществ из просвета кишки в кровь и лимфу. Это заключительный этап пищеварения, в основе которого лежат сложные биологические процессы переноса веществ из просвета кишечника. Всасывание осуществляется преимущественно в тонкой кишке [63, 71]. Пассивный транспорт веществ через монослой энтероцитов протекает без затрат свободной энергии и может происходить или трансклеточным, или околоклеточным путем. Относительная скорость всасывания сахаров в тонком кишечнике не одинакова. Если относительную скорость всасывания глюкозы принять за 100 %, то скорость всасывания галактозы составит 110 %, фруктозы – 43 %, маннозы – 19 %, ксилозы – 15 %, арабинозы – 9 %. |
Похожие:
 | Список основных исполнителей по Государственному контракту 14. 740. 11. 1258 от 17 июня 2011 Государственному контракту 14. 740. 11. 1258 от 17 июня 2011 на выполнение поисковых научно-исследовательских работ для государственных... |  | Список основных исполнителей по Государственному контракту 14. 740. 11. 1258 от 17 июня 2011 Государственному контракту 14. 740. 11. 1258 от 17 июня 2011 на выполнение поисковых научно-исследовательских работ для государственных... |
| Список основных исполнителей по Государственному контракту 14. 740. 11. 1258 от 17 июня 2011 Государственному контракту 14. 740. 11. 1258 от 17 июня 2011 на выполнение поисковых научно-исследовательских работ для государственных... | | Отчет о научно-исследовательской работе, выполняемой по государственному... «Разработка алгоритмов для биоинформационного анализа комплексных метаболических и молекулярно-генетических сетей» |
| Отчет о научно-исследовательской работе контракт №21/10 от «09» октября... Целью работы является исследование теоретических и практических особенностей существующих систем ротации в правоохранительных органах,... | | Отчет о научно-исследовательской работе по государственному контракту... Русский язык и культура речи: учебно-методический комплекс для студентов очной формы обучения / сост. И. А. Крым; Кузбасский институт... |
| Отчет по государственному контракту от 04. 06. 2012 №1102-01-41/06-12... ... | | Отчет о научно-исследовательской работе по теме: «Разработка научно... «Институт законодательства и сравнительного правоведения при Правительстве Российской Федерации» (ИЗиСП) |
| Отчет о научно-исследовательской работе по теме «Эффективность использования... Отчет по теме № са-12-39 «Эффективность использования отраслевых информационных систем» Минкультуры России | | Отчет о выполненной работе по Государственному контракту №12. 741.... Целью проведения работы является эффективное освоение молодыми исследователями и преподавателями лучших научных и методических отечественных... |
| Отчет №3 о научно-исследовательской работе по теме: «Грид-технологии» Разработка методов эффективного решения задач обработки, хранения, передачи и защиты информации | | Отчет о научно-исследовательской работе Гост 32-2001. Межгосударственный стандарт. Система стандартов по информации, библиотечному и издательскому делу. Отчет о научно-исследовательской... |
| Отчет о научно-исследовательской работе Межгосударственный стандарт (гост 32-2001). Отчет о научно-исследовательской работе. Структура и правила оформления (редакция 2005... | | Отчет о научно-исследовательской работе на тему: «Разработка модифицированных... «Разработка модифицированных методов выделения гуминовых веществ для получения биологических препаратов на основе вермикомпоста» |
| Общие положения отчет Отчет о научно-исследовательской работе (нир) документ, который содержит систематизированные данные о научно-исследовательской работе,... | | Отчет по Государственному контракту № «Разработка концепции создания интеллектуальной транспортной системы на автомобильных дорогах федерального значения» |
