Сборник статей d Ставрополь, 2012 удк (082): 159. 9: 616-085:=>616-089: 616-053. 2: 616. 31 Ббк 72. 471. 3я431(2Рос-4Ста) и 66 Научно-практическая конференция с международным участием «Инновации молодых учёных»
Скачать 6.03 Mb.
|
Результаты и обсуждение. Существует много методик определения статинов методом обратнофазной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) но, учитывая сложность метода (использование внутреннего стандарта, градиента концентрации), они не всегда воспроизводимы на местах. Описанные отечественные методики с использованием осаждения белков крови и последующим анализом надосадочной жидкости с помощью ВЭЖХ для определения ловастатина не применяются из-за низкой чувствительности и большого количества эндогенных веществ, мешающих определению. Кроме того, при использовании данного способа существенно возрастает риск загрязнения хроматографической колонки недоосажденными белками крови. В иностранной литературе описано много методик определения метаболита ловастатина методом ВЭЖХ, базирующимся на применении твердофазовой экстракции с использованием дорогих патронов Sep-Pak C18 (фирмы «Waters»). При выборе условий разделения были опробованы различные колонки и составы подвижных фаз. Оптимальными были признаны следующие условия: хроматографическое разделение проводили при температуре 50±1°С в изократическом режиме на микроколонке Hypersil ODS C18 125*4 mm и зернением сорбента 5 мкм, детектирование проводили при длине волны 246 нм. В качестве подвижной фазы использовали смесь метанола и фосфатного буфера, взятых в соотношении 78,0:22,0 по объему, рН системы 7,24. Перед применением мобильную фазу дегазировали под вакуумом. Скорость элюирования составляла 1,0 мл/мин. Время удерживания ловастатина в этих условиях составило 14,7 ±0,3 мин, метаболита - 6,5 ±0,2 мин (рис.).  Рис. Типичная ВЭЖХ - хроматограмма одновременного определения ловастатина и его метаболита в концентрациях 10 мкг/мл Предел детектирования ловастатина и его метаболита составил 10 нг/мл, предел количественного определения 20 нг/мл. Пики ловастатина и его метаболита отделены от пиков эндогенных соединений, что позволило достоверно определить исследуемые вещества. Из плазмы крови препарат извлекали экстракцией смесью хлороформа и изопропанола (9:1) после подкисления пробы раствором соляной кислоты. К образцу плазмы крови объемом 350 мкл добавляли 350 мкл 1 Н раствора соляной кислоты и 7,0 мл экстракционной смеси. Проба подвергалась энергичному встряхиванию в течение 20 минут с последующим центрифугированием при 1500 об/мин в течение 20 минут. Затем нижний органический слой отбирали и упаривали досуха. Сухой остаток растворяли в 100 мкл подвижной фазы, для полноты растворения смесь подвергали обработке на вибромиксере типа «Vоrtex» и 50 мкл полученного раствора вводили в хроматографическую систему. Коэффициент экстракции ловастатина при такой обработке составлял 96±2,9%, а метаболита - 65±4,3%. Количественное определение ловастатина и метаболита осуществляли по методу абсолютной калибровки, которую проводили по результатам хроматографического анализа ловастатина и метаболита в контрольных смесях. Для этого были приготовлены калибровочные стандартные растворы ловастатина и метаболита в интактной сыворотке крови с концентрацией препарата 5; 10; 25; 50; 75 и 100 нг/мл. Приготовленные образцы стандартных растворов обрабатывали и анализировали по методике, описанной выше. По результатам анализа, на основе измерений площадей хроматографических пиков, был построен калибровочный график. Измеренные значения концентраций были линейны во всем исследованном диапазоне (0-100 нг/мл), и график представлял прямую линию (коэффициент корреляции г2=0,9974 для ловастатина, и г2=0,9983 для метаболита). Точность разработанной методики составила: для ловастатина – 3,8 %, а для метаболита 4,5 %. Воспроизводимость метода находится в пределах 88-96% от номинальной концентрации для ловастатина и 94-107% - для его метаболита. Заключение. Разработанная методика определения ловастатина и его метаболита методом ВЭЖХ отличается высокой точностью и воспроизводимостью. T.V. Motalova, M.N. Migileva development of methods FOR DETERMINING lovastatin and its metaboliteS IN PLASMA BY HIGH PERFORMANCE Liquid chromatography (HPLC) In order to establish bioequivalence of generic and original medicines lovastatin developed a technique of high performance liquid chromatography and characterized by high accuracy and reproducible. Keywords: lovastatin, high performance liquid chromatography (HPLC), УДК: 616.379-008.64:577.17.049 А.Б.Муравьева НЕДОСТАТОК МАКРО- И МИКРОЭЛЕМЕНТОВ КАК ОДИН ИЗ ПРИЗНАКОВ ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТИ К САХАРНОМУ ДИАБЕТУ ГБОУ ВПО «Ставропольская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения РФ, Ставрополь, Россия Жизненно необходимые (эссенциальные) микроэлементы оказывают действие на организм в основном опосредованно, управляя деятельностью гормонов, ферментов, белков, жиров, углеводов, витаминов и прочих биологически активных веществ. Это управление осуществляется за счет поддержания определенных концентраций необходимых микроэлементов в организме и тканях. Любое изменение концентрации того или иного эссенциального микроэлемента может привести к развитию целого ряда заболеваний [2]. Было проведено много исследований, которые подтвердили, что на течение и лечение сахарного диабета значительное влияние оказывают такие химические элементы как: натрий, калий, цинк, хром, медь и железо. Цель исследования: на модели аллоксан-индуцированного сахарного диабета изучить сдвиги в содержании макро- и микроэлементов. Материалы и методы исследования. Опыты были проведены на лабораторных мышах. Экспериментальных животных (n=30) делили на три группы (по 10 в каждой). Первая группа – интактные животные, вторая – мыши, которым вводили физиологический раствор, и третья группа – животные, которым путем однократного подкожного введения аллоксана тетрагидрата в дозе 150мг/кг был вызван аллоксановый диабет. На 15 сутки наблюдения у животных, декапитировав, забирали кровь для определения содержания макро- (Na, K, Ca) и микро- (Zn, Fe, Cu) –элементов атомно-адсорбционным методом. Статистическую обработку полученных результатов проводили параметрическим методом с использованием t-критерия Стьюдента. Результаты и их обсуждения. Изучение элементного статуса в крови животных показало, что на 15-е сутки после введения аллоксана наблюдалось понижение уровня натрия до 170,87±7,031 ммоль/л (в контроле 192,43±1,274 ммоль/л); калия 1,947±0,11 ммоль/л (в контроле 1,95±0,166 ммоль/л) и цинка до 16,275± 0,880 мкмоль/л (в контроле 24,58± 1,61 мкмоль/л). При этом отмечалось повышение концентрации железа до 53,580 ±1,903 мкмоль/л (в контроле 41,39 ±0,432 мкмоль/л) и кальция до 5,24 ±0,06 моль/л (в контроле 1,71 ±0,064 моль/л) в крови мышей с аллоксановым диабетом (таблица). Это объясняется тем, что при сахарном диабете возникает дефицит цинка в организме, так как он является необходимым элементом для синтеза и секреции инсулина, а также пищеварительных ферментов поджелудочной железы. При дефиците цинка задерживается рост, нарушается обмен веществ, возникает инсулиновая недостаточность [1]. Известна также физиологическая роль цинка как антиоксиданта, предохраняющего клетку от свободных радикалов, образующихся в результате перекисного окисления липидов. Возникновение таких радикалов приводит ко многим заболеваниям, сопровождающим сахарный диабет. Цинк поддерживает кислотно-щелочной уровень в крови и других жидкостях, он необходим для правильной работы предстательной железы [5]. Таблица Содержание микро- и макроэлементов в сыворотке крови у мышей с аллоксановым диабетом
Значительное изменение содержания натрия может быть связано с нарушением водно-солевого обмена, дисфункцией коры надпочечников и гипофиза. Это явление встречается при сахарном диабете, гипонатриемия возможна из-за уменьшения реабсорбции натрия почечными канальцами (снижение активности ферментов в канальцах) [3]. Незначительное понижение уровня калия в организме обычно приводит к изменению функции почек и истощению функции надпочечников, риску нарушения обменных процессов и проводимости в миокарде, нарушению регуляции артериального давления, иногда — сахарному диабету. Дефицит калия снижает работоспособность, замедляет заживление ран, ведет к неправильной нервно-мышечной проводимости [1]. Проведенный анализ крови животных с аллоксановым диабетом указал также на количественный сдвиг между эссенциальными элементами. Так, содержание меди 8,335±0,309 мкмоль/л оказалось ниже контрольных значений (9,070±0,152 мкмоль/л) из-за развития окислительного стресса. Медь является кофактором фермента супероксиддисмутазы, участвует в антиоксидантной системе защиты организма от окислительного стресса [6]. Из литературных данных известно, что при сахарном диабете может повышаться уровень железа, так как оно может играть роль промотора перекисного окисления липидов [6]; и кальция, что связано с положительным влиянием кальция на свёртывание крови. Кальций способствует уменьшению проницаемости стенок кровеносных сосудов и является необходимым элементом для нормального функционирования мышц. Мало того, он оказывает еще и противовоспалительное действие [4]. Заключение: проведенные исследования показали, что нарушение содержания микро- и макроэлементов в организме может говорить о признаках сахарного диабета. Нарушения биоэлементного обмена неблагоприятно отражаются на течении и исходе сахарного диабета, поэтому целесообразно включать в комплексное исследование больных, склонных к сахарному диабету, одновременное определение калия, натрия, кальция, магния, железа, цинка и меди с последующей их коррекцией. Литература
A.B. Muravieva Insufficiency of macro and microelements as one of the signs of predisposition to diabetes mellitus Biochemical processes in the human organism depend on minerals which are the components of the biologically active substances. Many diseases are associated with insufficient amount of definite macro and microelements in the human organism. The balance of microelements may be destroyed at insufficient or abundant presence of them in the organism. Introduction of insufficient or removal of abundant amount of elements restores the health and viability of the human organism. Key words: macro-microelements, diabetes mellitus. УДК 615.1(075.8) С.С. Наумов Нейропсихотропные и хронотропные свойства адаптогенных средств ГБОУ ВПО «Ставропольская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения РФ, Ставрополь, Россия Введение. Средства растительного (женьшень, родиола, элеутерококк и др.) и гормонального (мелатонин) происхождения обладают адаптогенной активностью (Арушанян Э.Б., 2007; Арушанян Э.Б., Бейер Э.В., 2009; Sánchez-Barceló E.J. et al., 2010). Указанные обстоятельства побуждают провести сравнительную оценку профиля нейропсихотропной активности веществ такого рода в опытах на животных и исследованиях на людях с оценкой их свойств в разные фазы суточного цикла. Цель исследования. В опытах на животных и в исследованиях на здоровых добровольцах провести сравнительную оценку спектра нейропсихотропной и хронотропной активности адаптогенных средств растительного (тонизид, элеутерококк, билобил) происхождения и мелаксена – препарата эпифизарного гормона мелатонина, а также определить возможность нейропротективного действия адаптогенов на моделях органической церебральной патологии. Материал и методы исследования. Опыты выполнены на 182 белых нелинейных крысах – самцах массой 200-250 г. Животные были ранжированы на несколько групп: с введением за 30 мин до тестирования тонизида – комплексного препарата растительных адаптогенов (200 мг/кг, Биолит, Россия, здесь и в дальнейшем вещества вводили внутрибрюшинно в течение 7 дней) – 40 крыс, билобила (100 мг/кг, КРКА, Словения) – 20 крыс, мелаксена (1 мг/кг, фирма Unipharm, USA) – 40 крыс и физиологического раствора (контроль) – 32 крысы. В свою очередь, каждая группа была разделена на две подгруппы в зависимости от времени введения лекарственных средств и времени тестрирования: утреннюю (с 7.00 до 9.00), и вечернюю (с 19.00 до 21.00). У 60 животных воспроизводили экспериментальный ГИ по методу А.Н. Макаренко и соавт. (2002). У 40 животных моделировали острую ЧМТ с использованием модели «ударного ускорения» (Белошицкий В.В., 2005), после которой животные были разделены на 4 группы (по 10 в каждой), с введением мелаксена и тонизида. Инъекции начинали уже через 2 ч после операции в период так называемого «терапевтического окна». С целью выявления хронобиологических особенностей церебральной патологии все хирургические манипуляции выполняли в разное время суток - утром (с 7.00 до 8.00) и вечером (с 19.00 и до 20.00). Эффекты препаратов регистрировали на 1-й, 3-й и 7-й дни после начала хронического введения. Для изучения нейропсихотропной активности веществ в работе использованы стандартные психофармакологические тесты: "открытое поле" (ОП), «Приподнятый крестообразный лабиринт» (ПКЛ), «Условная реакция пассивного избегания» (УРПИ) (Хабриев Р.У. и др., 2005). Неврологический статус животных оценивали по Международной шкале Neurological Severity Scores (NSS), предложенной для лабораторных животных (крыс) (Салмина А.Б. и др., 2007). Учитывали также влияние препаратов на выживаемость крыс, регистрируя их гибель в течение 7 дней после операции. При статистической обработке результатов пользовались t- критерием Стьюдента и парным критерием Стьюдента, критерием Уилкоксона, однофакторным дисперсионным анализом, критерием Манна-Уитни (пакет программ BIOSTAT для статистического анализа). |
Похожие:
 | 616. 831 005. 1 + 616. Работа выполнена в гоу впо «Пензенский государственный университет» и гоу впо «Московский государственный медико-стоматологический... | | На правах рукописи удк: 616. 716. 1-053. 31/7-071. 3 Нувахов Натан... «Технология изделий легкой промышленности» и 262200. 62 «Конструирование изделий легкой промышленности» |
| Методическая разработка конференция «Здоровье нации будущее России» Дмитрик Тамара Андреевна, методист. Адрес: 140408 г. Коломна ул. Гагарина д. 3 кв. 142 д т. 616-45-70 мб 8-963-645-46-22 | | Руководство для врачей москва «медицина» 1997 ббк 54. 5 К. 28 Удк 616-036. 882-08: 615. 816 03 Данное руководство. Авторы располагают более чем 20-летним опытом исследований и практической работы, основанным на применении ивл... |
| Учебно-методическое пособие для клинических интернов и ординаторов,... Тлиш М. М., Карташевская М. И., Глузмин М. И., Лебедев П. В., Ларин Ф. И., Жукова Л. А волошин Р. Н.; под редакцией В. В. Лебедева;... | | На доклад предоставляется 10 минут, презентации оформлять в формате ms power Point Республиканская научно-практическая конференция молодых ученых с международным участием |
| И. В. Крылова московская детская больница имени Н. Ф. Филатова исторический... Московская детская больница имени Н. Ф. Филатова (исторический очерк). — М.: Медицина, 2004. — 352 с.: ил. I8Вn 5-225-04817-Х |  | Vi научная медицинская конференция студентов и молодых ученых с международным... Ов и молодых ученых с международным участием на английском языке «Актуальные вопросы медицины», которая состоится 25 апреля 2014... |
| Методические рекомендации Казань 2007 ббк 56. 6я73 удк 616. 31 (075.... Печатается по решению Центрального координационно-методического совета Казанского государственного медицинского университета | | Xх І і международная научно-практическая конференция для студентов,... Хіі международная научно-практическая конференция для студентов, аспирантов и молодых ученых |
| Xх І і международная научно-практическая конференция для студентов,... Хіі международная научно-практическая конференция для студентов, аспирантов и молодых ученых | | Xх І і международная научно-практическая конференция для студентов,... Хіі международная научно-практическая конференция для студентов, аспирантов и молодых ученых |
| 10-я российская конференция с международным участием В рамках конференции предполагается проведение школы молодых ученых и конкурса на лучший доклад среди молодых ученых | | Конкурса Международная научно-практическая конференция молодых ученых «Теория и практика формирования коммуникативной культуры: традиции и... |
| Xх І международная научно-практическая конференция для студентов,... Хі международная научно-практическая конференция для студентов, аспирантов и молодых ученых | | Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием ... |
