Скачать 493.9 Kb.
|
Результаты и их обсуждение Одной из целей данного исследования было изучение изменений в интактных МПД кроликов при моделировании дегенерации в других дисках опытных животных Из литературы известно, что диски кроликов, в основном ПЯ, подвергаются определенным возрастным изменениям. При этом происходит уплотнение матрикса ПЯ. У 4-5 летних животных изменения МПД достигают степени дегенерации. Известно также, что у человека выраженные возрастные изменения МПД, начинаются уже со второго десятилетия жизни. В наших исследованиях у контрольных животных в возрасте 6-7 месяцев, а также в интактных дисках опытных животных, через 6 недель после начала эксперимента в подавляющем числе дисков изменения отсутствуют. ФК сохраняет характерную ламеллярную структуру, а ПЯ свой рыхлый матрикс. Макроскопически этому соответствуют плотное слоистое ФК и мягко-упругое полупрозрачное ПЯ с четкой границей между ними. Начиная с 10-ой недели опыта и до его окончания через 40 недель, гистологически постепенно нарастали дистрофические и некротические изменения в ПЯ: все большее замещение НХК хондроцитоподобными клетками, уплотнение матрикса вокруг кластеров, уменьшение содержания протеогликанов, некроз клеток, появление бесклеточных участков и очагов зернистого распада ткани (клеток и коллагеновых волокон). Во внутреннем слое ФК возникают очаги перестройки ткани с исчезновением ламеллярной структуры. Развиваются дистрофия и некроз части хондроцитов. В гиалиновом слое ЗП появляются небольшие очаги деструкции. Подобные изменения структуры дисков в среднем выражены сильнее в МПД каудального полюса поясничного отдела позвоночника (L6-L7 и L7-S1), чем в дисках краниального полюса. Все эти изменения, однако, не достигают степени разрушения ПЯ, которое, в основном, сохраняет свою нативную кластерную структуру и не трансформируется в фиброзный хрящ. Гистологические изменения подтверждаются макроскопическим исследованием: постепенно нарастающим диффузным и очаговым помутнением ПЯ и менее четкой границей между ФК и ПЯ в ряде дисков, особенно на поздних сроках. Моделирование дегенеративных изменений в МПД (независимо от одного или двух последовательных проколов ФК) ведет к значительно более выраженным изменениям диска, чем вышеописанные изменения интактных дисков. В местах проколов на наружной поверхности ФК уже через 6 недель возникают остеофиты; в последующем они лишь постепенно созревают от преимущественно хрящевой (гиалиновый и фиброзный хрящ) до преимущественно костной структуры путем энхондральной оссификации хряща. Следует отметить, что остеофиты по данным литературы являются непременной и важной составляющей дегенеративно-измененных дисков у человека при остеохондрозе, а также при экспериментальном моделировании. Наиболее важные изменения при использованной нами модели дегенерации возникают в ПЯ и внутреннем слое ФК. Эти изменения обнаруживаются уже через 6 недель после начала опыта и постепенно прогрессируют вплоть до его окончания (40 недель). Уже в 6 недель в половине дисков (4 из 8) ПЯ и внутренний слой ФК полностью замещаются фиброзным хрящом, в котором отсутствует ламеллярная структура. Наряду с отдельными некротизированными клетками бывшего ПЯ в этом хряще преобладают активные хондроциты, синтезирующие коллаген и протеогликаны, формирующие волокнистый матрикс. В других дисках ПЯ сохраняется, но частично некротизируется, частично в нем происходит замещение НХК на ХПК, которые затем либо некротизируются, либо дифференцируются в хондроциты. Так как в этот период во внутреннем слое ФК преобладают дистрофические процессы, и отсутствует пролиферация хондроцитов, можно считать, что основным источником клеток, формирующих новообразованный фиброзный хрящ, являются ХПК пульпозного ядра, а не клетки ФК. Макроскопически этому соответствует разная степень уплотнения, диффузного или очагового помутнения ПЯ и исчезновения границы между ФК и ПЯ. В последующие сроки (10, 18, 32 и 40 недель) процесс замещения ПЯ и внутреннего слоя ФК фиброзным хрящом усиливается. Из 26 дисков на эти сроки только в 5-ти оставались фрагменты ПЯ с признаками некроза клеток в кластерах и формированием ободка сгущенного матрикса вокруг них, очагами зернистого распада матрикса, отложением солей извести, бесклеточными полями рыхлого матрикса. В большинстве дисков ПЯ и внутренний слой ФК полностью замещены фиброзным хрящом. Это свидетельствует о начинающейся дистрофии хрящевой ткани, которая прогрессирует в дальнейшем. Мы обозначаем это явление как вторичную дистрофию ПЯ по сравнению с первичной дистрофией, возникающей в первый месяц после прокола ФК. С 18-ой недели усиливаются дистрофические и некротические изменения в фиброзном хряще; помимо некроза клеток появляются очаги зернистого распада матрикса. В отдельных дисках возникают мелкие щели (трещины) и полости в замещенном ПЯ, а также крупные щели, отделяющие ЗП от измененной ткани диска. Часть щелей заполняется зернистыми массами тканевого распада. Это свидетельствует о том, что именно деструкция в диске является причиной образования щелей. Наиболее часто щели в новообразованном фиброзном хряще и между ЗП и диском обнаруживаются через 32-40 недель после начала опыта. В эти же сроки максимально усиливаются дистрофия и некроз клеток фиброзного хряща, увеличиваются поля бесклеточной ткани и зернистого распада. Следует отметить также своеобразное изменение архитектоники ФК в дегенеративно измененных дисках, которое начинается уже с 10-ой недели в части дисков и усиливается в следующие сроки уже во всех дисках. Ламеллы среднего слоя ФК и той части внутреннего слоя, которая еще не подверглась структурной реорганизации, разрыхляются, расщепляются и приобретают извитую форму. При этом ламеллы, ранее имевшие строго циркулярную форму, на вентральном и спинальном полюсе совершают обратный изгиб в сторону центра, т. е. к внутренней области, занятой новообразованным фиброзным хрящом. Это происходит, вероятно, потому, что ПЯ с его уникальной гелеобразной, насыщенной жидкостью, упругой структурой, трансформируясь в фиброзную структуру, уже не давит на ламеллы ФК, а напротив, уменьшаясь в объеме, как рубцовая ткань, ведет к ретракции ткани. Подобное же переориентирование силовых напряжений ведет к отрыву диска от ЗП в участках, где ПЯ ранее наиболее близко подходило к ЗП и где потом формируются щели. Нативная структура ФК и ПЯ при отсутствии сосудов в диске обеспечивает питание ткани путем диффузии питательных веществ и кислорода из сосудов костной ткани позвонков и ЗП. В новых условиях при фиброзировании ПЯ, отрыве диска от ЗП, изменении архитектоники и биомеханической функции диска диффузия питательных веществ затруднена, что и является основной причиной вторичных дистрофических изменений в дегенеративном диске. Следует также обратить внимание на выраженные изменения в гиалиновом слое ЗП, которые начинаются уже с 6-ой недели и затем усиливаются: некроз, деструкция, кальциноз, оссификация, истончение и фрагментация гиалинового хряща, сопровождаемые репаративной реакцией. К 40-ой неделе в части дисков в ЗП остаются лишь отдельные фрагменты хряща, окруженные костной тканью. Эти изменения, очевидно, индуцируются резким снижением амортизирующей функции диска при фиброзировании ПЯ, но, в свою очередь, влияют на биомеханику и питание диска. Подобные изменения, особенно оссификация ЗП, были отмечены при моделировании дегенеративных изменений в МПД у кроликов, а также при старении и дегенерации МПД у человека. Изменение архитектоники ламелл и разрыхление коллагенового каркаса ФК ведет к ослаблению биомеханической прочности ФК. В условиях использованной нами экспериментальной модели это не приводило к образованию протрузий и грыж (во многом из-за быстрого фиброзирования ПЯ), но в патологии человека эти осложнения остеохондроза являются важнейшими в его клинических проявлениях. Дегенеративно-измененные диски (модель) через 32 и 40 недель после начала опыта А – диск L4-L5 (один прокол), срок 32 недели. ПЯ, замещённое фиброзным хрящом. Справа – участок уплотнения, слева – разрыхления матрикса. Хондроциты дистрофически изменённые и не активные. х 400. Б – диск L2-L3 (один прокол), срок 40 недель. Граница внутреннего и среднего слоя ФК, в середине участок некроза и разрыхления с образованием трещин. х 200. В – диск L3-L4 (один прокол), срок 40 недель. В центре небольшой фрагмент гиалинового хряща (стрелка), остающегося после резорбции гиалинового слоя ЗП. х 200. Г – диск L2-L3 (два прокола), срок 40 недель. Фокус зернисто-вакуольной деструкции ткани в среднем слое ФК. х 400. Таким образом, изученная нами на кроликах модель дегенерации МПД по своим морфологическим проявлениям весьма близка к остеохондрозу человека и может быть адекватно использована для изучения механизма действия различных лечебных факторов, в том числе лазерно-индуцированной реконструкции МПД. Экспериментальная модель дегенерации межпозвонковых дисков у кроликов с помощью одного или двух последовательных проколов фиброзного кольца дает результаты, близкие к остеохондрозу человека. Наблюдались некроз и деструкция ткани пульпозного ядра, которое замещается фиброзным хрящом с постепенным развитием в нем вторичных дистрофических и некротических изменений. Возникает дезорганизация и последующая реорганизация внутреннего и среднего слоев фиброзного кольца с расщеплением ламелл, их ретракцией, разрыхлением коллагеновых волокон. Одновременно наступает деструкция гиалинового хряща замыкательной пластинки с частичным отрывом ее от фиброзной капсулы, в местах проколов формируются остеофиты. В интактных дисках опытных животных (особенно ближайших с дегенеративно-измененными) в результате нестабильности позвоночника возникают изменения в виде дистрофии и некроза нотохордальных клеток и замещения их хондроцитоподобными, частичной деструкции ткани пульпозного ядра, но без замещения его фиброзным хрящом. Гистологическое и гистохимическое изучение показывает, что в сравнительно поздних сроках (1 и 3 месяца после операции) в МПД протекают морфологические изменения, которые независимо от режима лазерного излучения (ЛИ) являются стандартными (стереотипными) реакциями на параметры ЛИ и возникновение некротических изменений в ранних стадиях. Анализ морфологических проявлений (как макро, так и микро) позволяет судить о динамике этих стереотипных, но связанных между собой процессов как в ПЯ, так и в ФК. В ПЯ образовавшиеся участки некроза постепенно уменьшаются в размерах за счет двух основных процессов: сжатия объема некротических очагов, которые теряют упругость, обусловленную специфической структурой матрикса и кластерного строения клеток. Вместе с этим теряет упругость и все ПЯ (степень этого зависит от величины некроза ткани). С эти связана разная степень уплощения, уменьшения и смещения ядра, которое испытывает в связи с потерей упругости повышенное давление со стороны ФК (концентрические) и тел позвонка (уплощающие); прорастание в некротическую ткань пролиферирующих и постепенно созревающих хондроцитов, источниками которых являются как выжившие и способные к пролиферации недифференцированные клетки, ядра нотохордального и хрящеподобного типа (естественно, это клетки, находящиеся вне кластеров или вышедшие из них при дезорганизации кластера), так и недифференцированные клетки гиалиновой прослойки замыкающей пластинки. Возможен и рост клеток из внутренних слоев, где также существуют недифференцированные клетки. Все эти клетки постепенно замещают некротическую ткань, секретирующие коллагенолитические и муколитические ферменты (коллагеназы, агреканазы и др.) и одновременно продуцируя новый матрикс (коллагены и агреканы). Этот процесс происходит очень медленно, т.к. в хряще отсутствуют макрофаги. Поэтому даже через 3 месяца в ПЯ при некоторых режимах ЛИ еще остаются небольшие участки некроза, которые, видоизменяясь, приобретают гранулярную структуру. В конечном результате участки некроза замещаются тканью, неспецифичной для пульпозного ядра:
Одновременно в сохранивших жизнеспособность участках ПЯ также происходят существенные изменения. В кластерах идет смена клеточного состава от преимущественно нотохордальных до преимущественно хондроцитоподобных клеток (в норме вторые являются продуктами дифференцировки первых). Это происходит либо потому, что нотохордальные клетки более чувствительны к ЛИ, поэтому быстрее погибают или дегенерируют, либо в новых условиях изменения механических функций ПЯ происходит их быстрая дифференцировка в ХПК. Клеточные кластеры уменьшаются в размерах как за счёт гибели части клеток, так и за счёт изменения матрикса. Эти изменения имеют разный характер. Местами матрикс разрыхляется и в нём даже появляются каналовидные структуры. Но в основном, особенно происходит очаговое, а затем диффузное уплотнение матрикса, вплоть до участков его гемогенизации. По-видимому, это связано с компактизацией коллагеновых и протеогликановых компонентов, но не исключён их повышенный синтез или изменения соотношения между типами коллагена и протеогликанов и, наконец, структуры аггреканов, что приводит к понижению гидратации ПЯ. К 3 месяцу матрикс на больших участках сохранённой ПЯ приобретает зернистую структуру (в норме сетчато-ячеистая), что говорит о значительных изменениях в коллаген-протеогликановых комплексах. Особо следует отметить образование уже к месячному сроку концентрических «луковичных» структур плотного матрикса вокруг остающихся кластеров. Это может быть также связано с повышением синтеза коллагена и ПГ. Можно расценить это как компенсаторно-приспособительную, защитную реакцию кластеров в изменившихся условиях. Но нельзя исключить, что это может играть роль в «удушении» и постепенном исчезновении кластеров, которое мы наблюдали. При этом в самих кластерах происходит дезинтеграция, разобщение клеток внутрикластерным образованием широких матриксных перегородок между клетками. В конечном счёте и в сохранившихся поначалу участках ПЯ постепенно идёт гибель кластеров, уплотнение, фибриллизация и местами гомогенизация матрикса. В этих условиях жизнеспособные и способные к пролиферации клетки становятся отдельными несвязанными элементами и начинают свою новую функцию: строительство фиброзно-гиалинового хряща. Клетки эти имеют другую программу и дифференцируются в хондроциты. ПЯ приобретает часто мозаичную картину: в ней перемежаются участки фиброзно-гиалинового и гиалинового хряща, «луковичных» структур, зернистого матрикса. Соотношение этих структур зависит от применённого режима ЛИ. Лазерное облучение, режим № 2, 90 суток. А. Остеофит, состоящий из костной ткани, окруженной гиалиновым хрящом на вентральной поверхности диска. Граница остеофита с наружными ламеллами ФК. Б. ПЯ. Общий вид. Практически полное замещение фиброзным и фиброзно-гиалиновым хрящом. Участок ткани с зернистой структурой матрикса и единичными кластерами ХПК (вверху). Г-Э, ув. 100х. В. ПЯ, центральная часть. Фиброзно-гиалиновый хрящ с переходом в гиалиновый. Г-Э, ув. 400х. Г. ФК, средний слой, вентральная сторона диска. Нарушения архитектоники ламелл. Зоны уплотнения и разрыхления ткани. Вверху - клетки с лакунами (участки трансформации в гиалиновый хрящ). Г-Э, ув. 200х. В ФК основные изменения разыгрываются во внутренних и переходных слоях, где в ранней стадии были наибольшие некротические и дистрофические изменения. В меньшей степени они имеются в среднем слое ФК. Изменения начинаются с пролиферации активных гипертрофированных хондроцитов с большим количеством изогенных групп, часто крупных. Хондроциты организуют участки некроза, которые в поздних сроках (особенно в 3 месяца) уже видны крайне редко и не на всех режимах и замещают их неламмелярным фиброзным хрящом, но чаще фиброзно-гиалиновым хрящом. Гиалиновый хрящ развивается реже на границе ПЯ или вблизи гиалиновой прослойки ЗП. Следует отметить, что фиброзно-гиалиновая трансформация усиливается в 3 месяца по сравнению с 1 месяцем после операции и развивается диффузно при некоторых режимах как на вентральной части диска (со стороны прокола), так и на спинальной противоположной стороне, а также в каудальном и краннальном направлении. В образовании фиброзно-гиалинового хряща во внутренних отделах ФК источником, вероятно, являются недифференцированные хондроциты этого отдела ФК, на границе с гиалиновой прослойкой – клетки прослойки. В наружной трети ФК изменения, как правило, незначительны. У части животных видны участки некрозов и реже щели, которые связаны с механическими изменениями при проколах. Как правило, такие некрозы остаются до 3 месяцев без выраженной окружающей продифференциальной реакции хондроцитов и без резорбции и организации, что лишний раз указывает на значение ЛИ в регенеративных процессах. На наружной стороне ФК в местах прокола часто развиваются остеофиты. Это связано с повреждением соединительной ткани вокруг диска и наружной пластины диска. В этих участках начинается рост провизорной соединительной ткани, затем фиброзно-гиалиновая и гиалиновая трансформация, затем обызвествление этих участков и наконец формирование костной ткани, отделённый от диска прослойкой гиалинового хряща. На 1 месяце эти процессы только начинаются, а в 3 месяца остеофиты являются частым явлением при обоих режимах, особенно при 2-м режиме. Вышеописанные процессы в ПЯ и ФК при разных режимах ЛИ происходят с различной скоростью, но в одном направлении, поэтому к 3 месяцам различие между режимами уменьшается. Тем не менее совокупность макроскопического описания и математического анализа макроскопических показателей дисков и их морфологического анализа позволяет высказать предположение, что наиболее приемлемым для клиники является режим №2 при котором ПЯ и внутренний слой ФК в наибольшей степени трансформируется в фиброзно-гиалиновый и гиалиновый хрящ. Режим №1 дал неплохие результаты, но он в меньшей степени способствует фиброзно-гиалиновой трансформации ПЯ и действует более медленно в этом направлении, чем режим №2. Клиническое исследование |
I. общая характеристика работы актуальность темы исследования Продолжить воспитание чувства ответственности за состояние окружающей среды и бережного отношения ко всему живому | Общая характеристика работы актуальность темы исследования Российской Федерации (далее упк рф). В 2002 г заключено и ратифицировано Соглашение между данными государствами по вопросам юрисдикции... | ||
Общая характеристика работы актуальность исследования Не менее актуальной является проблема, касающаяся стремления женщин-предпринимателей сотрудничать друг с другом | Общая характеристика работы Актуальность исследования Актуальность исследования определяется современными тенденциями в системе каникулярного отдыха и оздоровления детей, возникающими... | ||
Общая характеристика работы Актуальность тематики. Проблема безопасности человека в космосе до недавнего времени ограничивалась вопросами безопасности при околоземных... | Общая характеристика работы актуальность проблемы Рекомендовано Государственным комитетом Российской Федерации по высшему образованию в качестве учебника для студентов высших учебных... | ||
Темы по физиологии на 4 семестр 8 Общая характеристика системы пищеварения; сравнительная характеристика полостного и пристеночного пищеварения; пищеварение в различных... | Актуальность работы Выбор темы исследования и актуальность работы... «Речевой этикет» разработана на основе авторской программы по русскому языку для общеобразовательных учреждений. 5-11 классы: (автор-составитель... | ||
Темы рефератов по возрастной психологии для студентов 1 курса спецотделения Введение: смысл введение- в чем актуальность темы (соц запрос, научная актуальность- решение проблемы позволяет уточнить механизмы... | Характеристика учителей по категориям Общая характеристика Муниципального общеобразовательного учреждения Мостовинской средней общеобразовательной школы | ||
Знаменитые геодезисты Введение — излагается цель и задачи работы, обоснование выбора темы и её актуальность. Объём: 1 страница | Актуальность темы дипломной работы Цель дипломной работы дать оценку современного состояния и развития ипотечного кредитования в Республике Казахстан. Для достижения... | ||
Общая характеристика моу сош №53 Основные направления работы школы по сохранению физического и психологического здоровья школьника | 2. Характеристика профессиональной деятельности выпускника ооп бакалавриата 7 Общая характеристика вузовской основной образовательной программы высшего профессионального образования (бакалавриат) 5 | ||
1. рефераты должны быть представлены не позднее объявленного срока Реферат состоит из введения, основной части, заключения. Во введении, автор должен раскрыть актуальность темы, состояние или историю... | 1. Общая характеристика общеобразовательного учреждения Я представляю Вашему вниманию результаты работы нашего педагогического коллектива за 2012/13 учебный год |