Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России»

Скачать 1.02 Mb.

Название	Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России»
страница	5/12
Дата публикации	27.05.2015
Размер	1.02 Mb.
Тип	Отчет

100-bal.ru > Биология > Отчет

1 2 3 4 5 6 7 8 9 ... 12

Глава 2 Изучение антиоксидантных свойств штаммов Staphylococcusaureus в процессе взаимодействия бактерий с лейкоцитом (факторы устойчивости к кислородзависимому механизму фагоцитоза)

Для выяснения влияния каталазы бактерий на процесс взаимодействия микроорганизма с фагоцитом исследовали особенности продукции кислородных радикалов лейкоцитами при их активации штаммами с разной активностью этого фермента.

При непосредственном добавлении суспензии стафилококков к лейкоцитам крови доноров происходит генерация АФК даже в отсутствии опсонинов. Однако штаммы с разной каталазной активностью различались по способности стимулировать люминол-зависимую ХЛ.

В тоже время мы не наблюдали различий между ними при измерении люцигенин-зависимой ХЛ и скорости генерации супероксидного радикала (по восстановлению цитохрома с) (таблица 8).

Сопоставление полученных данных позволило выявить закономерность: низкая каталазная активность сочеталась с высоким люминольным ответом, а высокая каталазная активность с низкими значениями люминольной ХЛ.
Таблица 8 - Данные о каталазной активности различных штаммов Staphylococcusaureus и их способности стимулировать генерацию активных форм кислорода лейкоцитами.

№ штамма	Каталазная активность, ед/20млн бактерий	Интенсивность люминол-зависимого ХЛ ответа, относительно спонтанной величины ХЛ	Скорость генерации супероксидного радикала, мкМ/мин	Интенсивность люцигенин-зависимого ХЛ ответа, относительно величины спонтанной ХЛ
241	4,9±0,5	1,1±0,1	0,46±0,01	2,3±0,3
242	5,1±0,5	1,3±0,1	0,49±0,01	2,8±0,1
548	0,5±0,1	2,9±0,5	0,44±0,01	2,7±0,1
556	0,0	5,9±0,3	0,42±0,01	2,2±0,7

Учитывая данные о том, что лейкоциты сами обладают каталазой [23] и для вычленения каталазного эффекта бактерий и клеточных элементов крови, провели эксперименты с оценкой влияния различных концентраций, как лейкоцитов, так и бактерий на разложение перекиси водорода (рисунки 1 и 2). Обнаружено, что эффект повышения концентраций бактерий превосходит таковой у лейкоцитов, в связи с чем можно сделать вывод о превалирующем действии каталазы бактерий при взаимодействии «микроб-лейкоцит».

Поскольку величина ответа, оцениваемого люминольной ХЛ, отражает суммарную продукцию радикалов лейкоцитами (в том числе, и гидроксильного), можно предположить связь между этим показателем и эффективностью внутриклеточного киллинга стафилококков фагоцитами.

Рисунок 1 – Эффект концентрации стафилококков в смеси стафилококков с лейкоцитами на разложение перекиси водорода лейкоцитами.

Рисунок 2 – Эффект концентрации лейкоцитов в смеси стафилококков с лейкоцитами на разложение перекиси водорода стафилококками.

Глава 3 Исследование роли антиоксидантных свойств штаммов Staphylococcusaureus в процессе взаимодействия бактерий с лейкоцитом (факторы устойчивости к кислородзависимому механизму фагоцитоза)

Известно, что первичными бактерицидными факторами, выделяемыми фагоцитами, являются перекись водорода и продукты ее свободнорадикального разложения, такие как гипохлорит и гидроксильный радикалы [24,25,26]. Стафилококки приспосабливаются выживать в среде с повышенной концентрацией перекиси водорода путем индукции генов раннего ответа на окислительное повреждение [27]. Белковыми продуктами этих генов являются, среди прочих, фермент каталаза, разлагающий перекись водорода до нейтральных продуктов: воды и молекулярного кислорода и фермент супероксид дисмутаза, разлагающая супероксид анион радикал до молекулярного кислорода.

Можно предположить, что одним из эффективных способов защиты бактериальных клеток в процессе фагоцитоза, является синтез антиоксидантных ферментов. В настоящей части работы была изучена как способность штаммов S.aureus активировать генерацию АФК лейкоцитами, так и способность разлагать перекись водорода in vitro.

Исследовали три группы штаммов S.aureus: штаммы, выделенные из крови (20) у больных с генерализованной инфекцией; штаммы, выделенные из раневого отделяемого (20) у больных с хирургическими инфекциями мягких тканей и штаммы, выделенные при исследовании микрофлоры зева (20) у больных с лакунарной ангиной.

Каталазная активность была выявлена у всех штаммов, выделенных из крови (100%), у 80% штаммов, выделенных их раневого отделяемого и у 70% штаммов из зева (таблица 9).

При количественной оценке каталазной активности бактерий обнаружено, что наиболее высокая активность фермента наблюдалась у штаммов, выделенных из крови (4,0-5,1 ед\20млн), штаммы выделенные из раневого отделяемого и зева обладали примерно одинаковой каталазной активностью (2,2-2,5 ед\20млн и 2,3-2,7 ед\20млн, соответственно) (рисунок 3).
Таблица 9 - Частота выделения каталазоактивных штаммов, выделенных из разных источников.

Источник выделения	Частота выделения каталазоактивных штаммов
Источник выделения	Абсол. число	%
Зев	14	70%
Раневое отделяемое	16	80%
Кровь	20	100%

Рисунок 3 - Каталазная активность штаммов S.aureus, выделенных из разных источников, (ед/10⁶ бактерий).

1 2 3 4 5 6 7 8 9 ... 12

Похожие:

	Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы		Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы
	Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы		Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы
	Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы		Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы
	Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы		Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы
	Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы		Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы
	Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы		Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования
	Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... Санкт-петербургский государственный электротехнический университет «лэти» им. В. И. Ульянова (ленина)		Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования
	Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования		Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... «Разработка новых методов индивидуальной коррекции сводно-радикального статуса при бактериальных инфекциях»

Школьные материалы