Антимикробная активность препарата Миковелт и его применение при дерматомикозах и раневых инфекциях животных
Скачать 2.1 Mb.
|
в контрольной пробе (12 сутки культивирования)   Рис. 10. Колония гриба Trichophyton verrucosum 480 на агаре Сабуро в контрольной пробе (14 сутки культивирования)  Рис. 11. Колонии гриба Trichophyton mentagrophytes 210 на агаре Сабуро в контрольной пробе (8 сутки культивирования)  Рис. 12. Рост Microsporum canis 474 на агаре Сабуро в контрольной пробе (14 сутки культивирования)  Рис. 13. Рост Microsporum gypseum 37 на агаре Сабуро в контрольной пробе (10 сутки культивирования)  Рис. 14. Рост Epidermophyton rubrum 64 на агаре Сабуро в контрольной пробе (14 сутки культивирования)  Рис. 15. Рост Mucor spp. на агаре Сабуро в контрольной пробе (14 сутки культивирования)  Рис. 16. Рост Aspergillus niger 9642 на агаре Сабуро в контрольной пробе (14 сутки культивирования) Таким образом, Миковелт обладает высокой противогрибковой активностью in vitro в отношении культур тест-штаммов T.verrucosum 480, T.violaceum 11, T.mentagrophytes 210, M.gypseum 37, M.canis 474, M.lanosum 22, E.rubrum 64, A.niger 9642 и плесневых грибов Cladosporium spp. и Mucor spp. Коэффициент эффективности фунгицидного действия Миковелта составил 100%. 2.2.2. Определение острой и хронической токсичности препарата Миковелт на организм лабораторных животных Экспериментальные исследования по определению острой и хронической токсичности Миковелта проводили согласно «Методическим указаниям по оценке токсичности и опасности дезинфицирующих средств» (2002) и в соответствии с методическими указаниями «О порядке испытания новых дезинфицирующих средств для ветеринарной практики» (1987). Токсичность Миковелта изучали на белых мышах, белых крысах, морских свинках и кроликах. Целью исследований являлось изучение острой и хронической токсичности препарата при поступлении его в желудок и через органы дыхания, изучение местно-раздражающего действия на кожу и слизистые оболочки глаз, кожно-резорбтивного и аллергенного (сенсибилизирующего) действия. В остром опыте устанавливали параметры токсичности и среднюю летальную дозу, в хроническом опыте определяли наличие явлений кумуляции или привыкания, скармливая переносимую дозу препарата с кормом в течение длительного времени. Для определения влияния препарата на гомеостаз и жизненные функции организма у экспериментальных животных определяли биохимические показатели крови до и после постановки опыта, проводили морфологические исследования паренхиматозных органов. В острый и хронический опыты подбирали клинически здоровых, половозрелых животных обоего пола. Перед началом опыта животных выдерживали в карантине не менее 14 суток, ведя за ними ежедневные клинические наблюдения. Слабых животных из опытных и контрольных групп исключали. Результаты изучения воздействия препарата на организм животных при пероральном применении. Исследования острой токсичности Миковелта при введении в желудок проводили на белых половозрелых мышах. Было сформировано 4 группы животных-аналогов, 3 опытные и 1 контрольная, по 10 голов в каждой. Миковелт вводили животным опытных групп в желудок с помощью металлического зонда в дозах 4000, 5000 и 6000 мг/кг (по действующему веществу). Дозы исчисляли в мг действующего вещества на 1 кг массы тела животного. Для удобства составляли дозировочную таблицу (табл. 13). Учитывали объем вводимой в желудок животных жидкости с тем расчетом, чтобы он не превышал 1 мл. Таблица 13. Расчет доз Миковелта для белых мышей при пероральном введении для определения показателя ЛД50
Животным контрольной группы аналогично вводили физиологический раствор. Перед введением растворов препарата животных не кормили в течение 3-4 часов и такое же время выдерживали после введения препарата. Состояние животных оценивали сразу после введения Миковелта в течение первого дня и далее каждые сутки в течение 14 дней. Результаты исследований представлены в табл. 14. Таблица 14. Результаты острого опыта при введении препарата Миковелт в желудок белым мышам
Было установлено, что при введении различных концентраций Миковелта белым мышам в желудок клинической картины отравления и гибели животных не наблюдалось, а ЛД50 Миковелта составляет более 6000 мг/кг. Согласно «Классификации опасности веществ по степени воздействия на организм», которая входит в ГОСТ 12.1.007-76, препарат Миковелт при введении в желудок относится к 4 классу малоопасных веществ. Острая токсичность препарата при парентеральном введении. Острую токсичность Миковелта при парентеральном введении исследовали на белых мышах при введении им препарата в брюшную полость. Было сформировано 4 группы животных-аналогов, 3 опытные и 1 контрольная, по 10 голов в каждой. Препарат вводили стерильной иглой в брюшную полость в дозах 4000, 5000 и 6000 мг/кг. Животным контрольной группы аналогично вводили физиологический раствор. У животных контролировали возможные клинические признаки интоксикации и гибель в течение первых суток и далее до 14-го дня включительно. Результаты исследований представлены в таблице 15. Таблица 15. Результаты острого опыта при введении Миковелта в брюшную полость белым мышам
В результате проведенных исследований было установлено, что при введении Миковелта в брюшную полость мышам в дозах от 4000 до 6000 мг/кг клинической картины отравления и гибели животных не наблюдалось. Величина ЛД50 Миковелта составила более 6000 мг/кг, что по классификации опасности веществ по степени воздействия на организм соответствует 4 классу малоопасных веществ. Изучение токсичности препарата при ингаляционном воздействии. Исследования острой ингаляционной опасности Миковелта проводили на 20 белых мышах, помещенных в герметичный эксикатор. За сутки до опыта, в эксикатор был внесен готовый к применению раствор Миковелта в чашке Петри. Затем в эксикаторы помещали животных на 2 часа. Контрольные животные находились в эксикаторе, в который помещали чашку Петри с дистиллированной водой. Наблюдение за животными проводили в течение экспозиции Миковелта и после окончания его ингаляционного воздействия в течение 3 сут. Животных обследовали сразу после окончания воздействия препарата по показателям состояния нервной системы: суммационно-пороговому показателю (СПП), спонтанно-двигательной активности (СДА), вертикальной двигательной активности (ВДА), норковому рефлексу (метод открытой площадки), а также по частоте дыхания (ЧД). Было установлено, что состояние подопытных животных за все время воздействия Миковелта не отличалось от контрольных. Клинических признаков отравления и гибели животных не наблюдалось (табл. 16). Таблица 16. Показатели состояния белых мышей после однократного ингаляционного воздействия Миковелта
Как следует из данных табл. 16, достоверных изменений показателей состояния белых мышей в опытной группе не отмечено, они соответствуют данным в контрольной группе животных. Таким образом, по ингаляционной опасности в насыщающих концентрациях средство Миковелт относится к 4 классу малоопасных веществ. Учитывая назначения и область применения Миковелта, ингаляционная опасность его маловероятна. Изучение местно-раздражающего действия. Местно-раздражающее действие Миковелта изучали при воздействии препарата на неповрежденную и поврежденную кожу, а также слизистую оболочку, конъюнктиву и роговицу глаз животных. Исследования проводили на белых мышах, белых крысах, морских свинках и кроликах. Определение острой токсичности препарата на неповрежденную кожу. Испытание проводили на 3 кроликах, не использовавшихся ранее в других опытах. За сутки до начала опыта в области спины кроликов выстригали шерсть на участке площадью 8х9 см. На подготовленный участок кожи с помощью стеклянной пипетки наносили Миковелт в количестве, равномерно покрывающем весь выстриженный участок, и слегка втирали препарат в кожу животного этой же пипеткой. Для контроля одному кролику на аналогично подготовленный участок кожи спины наносили такое же количестве водопроводной воды. Аппликацию Миковелта и воды проводили однократно и наблюдали за животными в течение 14 дней. Животных содержали в индивидуальных клетках. Было установлено, что Миковелт не вызывает гибели экспериментальных животных при данном способе аппликации. Симптомов интоксикации у животных в течение всего срока наблюдения не отмечалось. Таким образом, Миковелт при нанесении на кожу животных не проявляет острой токсичности, что соответствует 4 классу опасности по ГОСТ 12.1.007-76. Определение местно-раздражающего действия препарата на неповрежденную кожу. Испытание проводили на 6 кроликах с непигментированной кожей. За сутки до начала опыта на крупе кроликов выстригали шерсть на участке размером 5x5 см. На подготовленный участок кожи животного с помощью пипетки наносили 1,0 мл Миковелта, равномерно распределяя его по всей поверхности опытного участка, и слегка втирали в кожу той же пипеткой. Для контроля этим же кроликам на аналогично подготовленный участок кожи крупа, с противоположной стороны наносили такое же количестве водопроводной воды. Аппликацию Миковелта и воды проводили однократно и многократно (по 3 кролика на каждый опыт). Реакцию кожи при однократном нанесении препарата регистрировали через 2, 4 и 8 часов экспозиции. При многократном использовании Миковелт наносили на кожу животным 1 раз в день ежедневно в течение 14 дней. Перед каждым нанесением препарата опытный участок кожи обмывали теплой водой с помощью ватного тампона и высушивали чистой марлевой салфеткой. Животных содержали в индивидуальных клетках и крепили на шею воротники из пластика, предотвращающие слизывание препарата. Оценку функционального состояния кожи в процессе опыта выражали в баллах по проявлению степени эритемы и отека (изменению толщины кожной складки). Выраженность эритемы определяли визуально и с помощью колориметрической линейки Суворова С.И., а величину отека определяли, измеряя толщину кожной складки при помощи толщинометра TP-1-10. Результаты исследований представлены в таблицах 17 и 18. Таблица 17. Оценка функционального состояния кожи кроликов при однократной аппликации Миковелта
Было установлено, что у всех кроликов, которым Миковелт наносили однократно, изменения на коже не отмечались, отеки и утолщения кожной складки отсутствовали. Таблица 18. Оценка функционального состояния кожи кроликов при многократной аппликации Миковелта
При многократном воздействии Миковелтом на кожу кроликов в течение 14 дней наблюдалась слабая эритема (1 балл), интенсивность отека составила 0,3 мм по утолщению кожной складки после 5-7 аппликаций. Таким образом, на неповрежденную кожу экспериментальных животных Миковелт при однократном применении не оказывал токсического и местно-раздражающего действия, а при многократном использовании вызывал слабую эритему. Определение токсического и местно-раздражающего действия Миковелта на скарифицированную кожу. Исследования проводили на белых крысах и кроликах. Перед экспериментом животным выстригали шерсть в области спины, с двух сторон чуть ниже позвоночника для моделирования опытного и контрольного участков кожи. Кожу на контрольном и опытном участках повреждали инъекционной иглой, нанося неглубокие царапины в виде сетки. Белым крысам в количестве 10 голов Миковелт наносили на поврежденный и неповрежденный участки кожи дважды в день в течение 14 дней, равномерно пропитывая препаратом всю обрабатываемую поверхность. Контрольный участок кожи обрабатывали стерильной водой. За животными вели ежедневные наблюдения. Результаты обследования животных представлены в таблице 19. Таблица 19. Результаты обследования крыс после повторного накожного нанесения Миковелта на скарифицированную кожу
Примечание: во всех случаях Р > 0,05. Было установлено, что повторные аппликации Миковелта на поврежденную кожу белых крыс не осложняли заживление искусственно нанесенных ран. Заживление на опытных участках кожи у животных отмечалось на 3-5 сутки, в то время, как на контрольных участках видимые признаки заживления наблюдались на 7-9 дни исследований. У Миковелта был обнаружен неожиданный побочный эффект - препарат в 8 раз ускорял рост волос, в сравнении с контролем, и способствовал восстановлению волосяных луковиц у животных. В остром опыте на кроликах изучали местно-раздражающее действие Миковелта с аппликацией под повязку на 24 часа по методу Драйзе. На опытные и контрольные участки скарифицированной кожи кроликов под компресс помещали марлевую салфетку, пропитанную Миковелтом. На контрольный участок кожи под компресс также помещали марлевые салфетки, пропитанные физиологическим раствором. Оценку местно-раздражающего действия препарата проводили через 2, 4 и 8 часов экспозиции, с учетом цвета, тургора, эластичности кожи, возникновения отека, гиперемии, шелушения. По окончании экспозиции на обоих участках кожи кроликов не отмечалось признаков раздражающего действия Миковелта. Таким образом, при однократном и многократном применении на поврежденную кожу экспериментальных животных Миковелт не оказывал токсического и местно-раздражающего действия. Препарат ускорял процессы заживления ран в 2 раза и способствовал росту волос. Определение раздражающего действия препарата на глаза животных. Исследования местно-раздражающего действия на глаза проводили на кроликах породы шиншилла. В опыте было использовано 3 кролика, которым в конъюнктиву правого глаза закапывали Миковелт в количестве 2 капель. Левый глаз у кроликов был контрольным. Реакцию слизистой оболочки опытного глаза, века и роговицы регистрировали сразу после воздействия и в течение 7 дней наблюдения и учитывали в баллах. Баллы суммировались и оценка проводилась по выраженности раздражающего действия препарата на глаза, по соответствующей классификации, которая включает 5 классов опасности (табл. 20). Таблица 20. Оценка раздражающего действия Миковелта на глаза кроликов
Было установлено, что Миковелт не оказывает раздражающего действия на роговицу, при воздействии препарата на коньюнктиву наблюдалась слабая ее гиперемия без выделений, которая исчезала у всех кроликов через 1-2 дня. Наблюдение в течение недели не выявило никаких изменений, выделения отсутствовали. Роговица у всех опытных животных не изменялась, оставаясь прозрачной, конъюнктивит не развивался. Суммарный балл составил от 1 до 3. Таким образом, согласно «Классификации опасности веществ по степени воздействия на организм» по ГОСТ 12.1.007-76, препарат Миковелт при воздействии на слизистые оболочки, роговицу и коньюнктиву глаз животных относится к 4 классу малоопасных веществ. Изучение кожно-резорбтивного действия. Задачей данного этапа исследований являлось получение альтернативного ответа о возможности развития интоксикации организма при контакте Миковелта с кожей экспериментальных животных. Исследования проводили в соответствии с методическими указаниями «Оценка воздействия вредных химических соединении на кожные покровы и обоснование предельно допустимых уровней загрязнения кожи» (1980). В качестве подопытных животных использовали белых мышей, поверхность кожи которых не имела каких-либо признаков повреждения. Было создано 2 группы животных - опытная и контрольная, по 10 голов в каждой. За день до опыта хвосты мышей тщательно отмывали теплой водой с мылом и обтирали мягкой марлевой салфеткой. Животных опытных и контрольных групп помещали в клетки с изолированными секциями, позволяющими фиксировать каждое животное в строго определенном положении. Хвосты мышей опытной группы погружали на 2/3 их длины, что соответствует 5% общей поверхности тела, в пробирки с Миковелтом, а хвосты животных контрольных групп помещали в пробирки с водопроводной водой. Клетки устанавливали на край термостатированной бани (29±1°С) таким образом, чтобы пробирки были погружены в воду. По истечении 2-часовой экспозиции кожу хвоста каждого животного обмывали проточной, теплой водой и обтирали марлевой салфеткой. Было установлено, что у мышей после однократной обработки кожи Миковелтом признаки токсического эффекта отсутствовали - изменений в поведении животных не наблюдалось, все системы организма экспериментальных животных функционировали нормально. Исследования продолжили в течение 20 дней, ежедневно погружая хвосты животных опытных групп в Миковелт на 2 часа и оценивая клиническое состояние животных. В результате проведенных исследований было установлено, что при многократной обработке Миковелтом 5% кожного покрова животных интоксикации организма не происходит. Таким образом, наноструктурированный препарат Миковелт не обладает кожно-резорбтивным действием. Изучение сенсибилизирующих свойств. Исследование сенсибилизирующего действия Миковелта проводили на морских свинках при комплексном накожном и внутрикожном воздействии. Было создано 2 группы животных – опытная и контрольная, по 5 голов в каждой. У животных выстригали шерсть на спине и опытным свинкам ежедневно наносили на кожу по 1 мл Миковелта в течение 20 дней. Морским свинкам контрольной группы аналогично на кожу наносили дистиллированную воду. Через 20 дней эксперимента у этих же свинок на кожу выстриженного участка инъекционной иглой наносили царапины в виде сетки и однократно наносили на поврежденную поверхность кожи 1 мл Миковелта. Состояние животных оценивали через 2 и 24 часа экспозиции. На основании проведенных исследований было установлено, что через 2 часа экспозиции у животных опытных групп отсутствовала аллергическая реакция на препарат быстрого типа. Через 24 часа не наблюдалось аллергической реакции замедленного типа. Кроме специфического кожного теста, о сенсибилизации препарата Миковелт судили также и по неспецифическим показателям, упределяя уровень гистамина и эозинофилов в периферической крови морских свинок (табл. 21). Таблица 21. Результаты оценки неспецифических показателейсенсибилизации морских свинок Миковелтом
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Похожие:
 | План исследования «применение препарата "эндонорм"® в терапии узлового и многоузлового эутиреоидного зоба» | | Конспект открытого урока «Применение координатно векторного метода при решении задач С2» Продолжить знакомство с Красной книгой, расширить и углубить знания детей о животных и растениях, встречающихся в нашей местности,продолжить... |
| Тема: Обобщение и систематизация знаний по теме «Атмосфера» Развивать самостоятельную познавательную активность уч-ся; умение быстро и логически мыслить, умение применять полученные знания... |  | Тема: Обобщение и систематизация знаний по теме «Атмосфера» Развивать самостоятельную познавательную активность уч-ся; умение быстро и логически мыслить, умение применять полученные знания... |
| Учитель задает вопросы командам по очереди (1 вопрос 1 балл) Развивать самостоятельную познавательную активность уч-ся; умение быстро и логически мыслить, умение применять полученные знания... | | Бионормализующее действие препарата пдс при восстановлении воспроизводительной... Д 220. 004. 01 при фгоу впо «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия» по адресу: 308503 |
| Лечебная и профилактическая эффективность сахаптина при ассоциированных... Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология | | Программы дисциплин электротехника введение краткая характеристика... Электрическое поле и его основные характеристики. Электропроводность. Электрический ток и его разновидности. Характеристики тока.... |
| Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... «Разработка новых методов индивидуальной коррекции сводно-радикального статуса при бактериальных инфекциях» | | Технология объяснительно-иллюстрированного обучения Термин "технология" заимствован из зарубежной методики, где его используют при описании по-разному организованных процессов обучения.... |
| Осложнения беременности при острых респираторных вирусных инфекциях... О душе. Но все, чтобы ни представлялось необходимым исследовать, мы будем обсуждать, насколько способны, с помощью ума и доказательства,... | | Программа вступительного экзамена по географии программ а План и карта. Понятие о горизонте. Способы ориентирования на местности. Компас и его применение при ориентировании |
| ПРИМЕНЕНИЕ КОМПЬЮТЕРНЫХ ТЕХНОЛОГИЙ ПРИ ПОДГОТОВКЕ К Экзаменам ДОКЛАД “ПРИМЕНЕНИЕ КОМПЬЮТЕРНЫХ ТЕХНОЛОГИЙ ПРИ ПОДГОТОВКЕ К ЕГЭ ФИЗИКЕ” Подготовил учитель физики Кюкяйской СОШ | | Урок в 6А классе по теме: «Задачи на нахождение дроби от числа и числа по его дроби.» Цели: закрепить и обобщить правила нахождения дроби от числа и числа по значению его дроби; показать применение правил при решении... |
| Тема урока: Векторная графика и ее применение. Тип урока Продолжить знакомство с Красной книгой, расширить и углубить знания детей о животных и растениях, встречающихся в нашей местности,продолжить... | | Ферментативный гидролизат красной смородины, его биохимическая характеристика... Данная программа проводится при сотрудничестве Международного центра японского языка Японского Фонда и аспирантуры Института политических... |
