Антимикробная активность препарата Миковелт и его применение при дерматомикозах и раневых инфекциях животных

к тест-штаммам бактерий (капельный метод) Культура тест-штамма Экспери-мент Экспозиция, мин 1 2 3 5 10 15 30 E.coli 11229 опыт + - - - - - - контроль + + + + + + + S.aureus 6538 опыт + - - - - - - контроль + + + + + + + P.aeruginosa 15412 опыт + - - - - - - контроль + + + + + + + B.cereus 10702 опыт + + - - - - - контроль + + + + + + + C.sporogenes 272 опыт + + - - - - - контроль + + + + + + + Примечание: «–» - отсутствие роста бактерий; «+» - наличие роста бактерий. Использование чашечного (диско-диффузного) метода определения бактерицидной активности Миковелта позволило определить зоны отсутствия роста культур тест-штаммов бактерий под действием препарата (табл. 8). Таблица 8. Зоны ингибирования роста культур тест-штаммов бактерий препаратом Миковелт (диско-диффузный метод) Культура тест-штамма Зона отсутствия роста, мм Escherichia coli 11229 14,50,1 Staphylococcus aureus 6538 20,60,6 Pseudomonas aeruginosa 15412 21,90,2 Bacillus cereus 10702 11,60,5 Clostridium sporogenes 272 12,50,2 Из данных таблицы следует, что Миковелт проявил наиболее высокую антибактериальную активность в отношении стафилококка и синегнойной палочки, часто осложняющих течение раневого процесса у животных. Также высокой активностью Миковелт обладал в отношении эшерихий, бацилл и клостридий (рис. 4-6). Рис. 4. Антимикробная активность Миковелта в отношении Pseudomonas aeruginosa а) б) Рис. 5. Антимикробная активность Миковелта в отношении Staphylococcus aureus (а) и Escherichia coli (б) а) б) Рис. 6. Антимикробная активность Миковелта в отношении Bacillus cereus (а) и Clostridium sporogenes (б) При высевах из зон ингибирования роста бактерий были получены отрицательные результаты. Таким образом, Миковелт обладает бактерицидной активностью в отношении культур тест-штаммов Escherichia coli 11229, Staphylococcus aureus 6538, Pseudomonas aeruginosa 15412, Bacillus cereus 10702 и Clostridium sporogenes 272 при экспозиции 1-3 мин. Коэффициент эффективности бактерицидного действия Миковелта составил 100%. 2.2.1.2. Определение противогрибковой активности Миковелта в отношении дрожжеподобных грибов рода Candida Противогрибковую активность Миковелта in vitro оценивали в отношении 24 - часовой культуры тест-штамма Candida albicans 10231. Исследования проводили качественными методами: суспензионный, капельный и чашечный (диско-диффузный). При использовании суспензионного метода готовили взвесь культуры тест-штамма кандиды с концентрацией не менее 2 млрд. микробных клеток в 1 мл суспензии по стандарту мутности. По 1 мл микробной суспензии вносили в пробирки с 5 мл Миковелта и выдерживали в течение 1, 2, 3, 5, 10, 15 и 30 мин. Для контроля взвесь тест-культуры смешивали со стерильной водопроводной водой. Через каждое время экспозиции в пробирку вносили универсальный нейтрализатор и через 10 мин. из микробной суспензии с Миковелтом делали посевы в МПБ и на МПА. Посевы помещали в термостат при 30°С на 24 ч. Затем проводили учет результатов исследований на наличие или отсутствие роста кандид. При капельном методе определения противогрибковой активности Миковелта на МПА в чашках Петри делали газон из культуры кандид. На поверхность газона в центре чашки Петри наносили 0,05 мл Миковелта, выдерживали в течение 1, 2, 3, 5, 10, 15 и 30 мин. Затем из места контакта газона кандид с Миковелтом через определенное время экспозиции делали высев в МПБ с последующим пересевом на МПА. Посевы помещали в термостат при 30°С и проводили учет результатов исследований через 24 часа на наличие или отсутствие роста кандид. При чашечном (диско-диффузном) методе определения противогрибковой активности Миковелта изготавливали бумажные диски, которые смачивали Миковелтом и высушивали. На МПА в чашках Петри делали газон из кандид и на поверхность газона в центре чашки Петри наносили бумажный диск с Миковелтом. Посевы помещали на 24 часа в термостат при 30°С, затем определяли зону отсутствия роста тест-штамма вокруг бумажного диска, пропитанного Миковелтом. Все исследования проводили в трехкратной повторности. С помощью качественного суспензионного метода было ус­тановлено, что Миковелт вызывает полную гибель культуры тест-штамма кандид при всех испытуемых экспозициях (табл. 9). Таблица 9. Определение противогрибковой активности Миковелта по отношению к тест-штамму Candida albicans 10231 суспензионным методом Экспозиция, мин Опыт Контроль 1 - + 2 - + 3 - + 5 - + 10 - + 15 - + 30 - + Примечание: «–» - отсутствие роста бактерий; «+» - наличие роста бактерий. Как следует из данных таблицы, кандиды погибали в присутствии Миковелта уже через 1 мин. экспозиции. Во всех контрольных пробах наблюдался рост изучаемой культуры тест-штамма. При использовании капельного метода определения противогрибковой активности, Миковелт оказывал фунгицидное действие на кандиды в месте контакта при экспозиции 3 мин. (табл. 10). Таблица 10. Определение противогрибковой активности Миковелта по отношению к тест-штамму Candida albicans 10231 капельным методом Экспозиция, мин Опыт Контроль 1 + + 2 + + 3 - + 5 - + 10 - + 15 - + 30 - + Примечание: «–» - отсутствие роста бактерий; «+» - наличие роста бактерий. Использование чашечного (диско-диффузного) метода определения противогрибковой активности Миковелта позволило определить зоны отсутствия роста культуры тест-штамма Candida albicans 10231 под действием Миковелта (табл. 11). Таблица 11. Зоны ингибирования роста культуры тест-штамма Candida albicans 10231 препаратом Миковелт в сравнительном аспекте Культура тест-штамма Зона отсутствия роста, мм Candida albicans 10231 24,80,2 Escherichia coli 11229 14,50,1 Staphylococcus aureus 6538 20,60,6 Pseudomonas aeruginosa 15412 21,90,2 Bacillus cereus 10702 11,60,5 Clostridium sporogenes 272 12,50,2 Из данных таблицы следует, что Миковелт проявил наиболее высокую антимикробную активность в отношении кандид (рис. 7). Рис. 7. Зоны отсутствия роста C.albicans 10231 в присутствии Миковелта При высевах из зон ингибирования роста кандид были получены отрицательные результаты. В контрольных чашках рост кандид был обильным (рис. 8). Рис. 8. Рост C.albicans 10231 в контрольной пробе Таким образом, Миковелт обладает противогрибковой активностью в отношении культуры тест-штамма Candida albicans 10231, при экспозиции 1-3 мин. Коэффициент эффективности фунгицидного действия Миковелта составил 100%. 2.2.1.3. Определение противогрибковой активности Миковелта методом двукратных серийных разведений в жидкой среде Противогрибковую активность Миковелта in vitro изучали также методом двукратных серийных разведений в жидкой среде Сабуро. Готовили два параллельных ряда разведений Миковелта в пробирках с жидкой средой Сабуро, в которые засевали культу­ры тест-штаммов грибов (T.verrucosum 480, T.violaceum 11, T.mentagrophytes 210, M.gypseum 37, M.canis 474, M.lanosum 22, E.rubrum 64, A.niger 9642, плесневые грибы Cladosporium spp., Mucor spp.). Засеянные пробирки помещали в термостат при 27°С на 14 дней. Чув­ствительность грибов к препарату определяли его минимальной дозой, при ко­торой роста грибов не наблюдалось. Разведение препарата производили методом последовательных разведений. Для этого, жидкую среду Сабуро разливали стерильно, по 3 мл в каждую пробирку; в первую про­бирку ряда наливали 4,5 мл Миковелта. Всего в ряду было 10 пробирок, из них послед­няя была контрольная. В качестве стандартной навески брали 100 мг субстанции Велтон – действующего вещества препарата, растворяли его в 10 мл изопропилового спирта, а затем добав­ляли 90 мл дистиллированной воды. Таким образом, исходное разведение содержало испытуемый препарат в концентрации 10000 мкг/мл. Затем 0,5 мл этого разведения вно­сили в первую пробирку ряда (с 4,5 мл среды), разводя тем самым концен­трацию препарата еще в 10 раз. Следовательно, первая пробирка ряда со­держала 1000 мкг/мл испытуемого препарата. В дальнейшем из первой пробирки пипеткой отбирали 3 мл раствора препарата и переносили его во вторую пробирку, тщатель­но перемешивали, снова брали 3 мл раствора и переносили его в третью пробирку и т.д. Из предпоследней пробирки 3 мл выливали в сливную чашку. В последнюю пробирку, как и в контрольные, препарат не вносили. Таким образом, в каждом ряду первые пробирки содержали по 2 мл раствора, а все последующие — по 3 мл. В каж­дой последующей пробирке концентрация препарата уменьшалась вдвое. При этом получался ряд следующих разведений, мкг/мл — 1000; 500; 250; 125; 62,5; 31,2; 15,0; 7,5; 3,8; 1,9. Параллельно пробиркам с разведениями препарата Миковелт брали аналогичное разведениям препарата количество контрольных пробирок с жидкой средой Сабуро, куда препарат не вносили. Культуры тест-штаммов грибов засевали на агар Сабуро и культивировали в термостате при 27°С 28 дней, затем газон смывали жидкой средой Сабуро. Для точного учета вносимой культуры гриба в раствор препарата определя­ли концентрацию гриба по бактериальному стандарту мутности, учитывая, что величина грибковых эле­ментов примерно в 10 раз превышает величину бактерий (например, 1 млрд. микробных тел в 1 мл по стандарту соответствуют 100 млн. гриб­ковых тел в 1 мл). Общая концентрация грибковых элементов во взвеси составила 100 млн.г.т./мл. Пипеткой, объемом 1 мл, вносили по 1 капле взвеси гриба в каждую пробирку с разведенным препаратом, вклю­чая контрольную, тщательно перемешивали и помеща­ли в термостат при 27°С на 14 дней. В контрольные пробирки также вносили культуру тест-штамма гриба. Через 14 дней пробирки извлекали из термостата и учитывали наличие или отсутствие роста грибов в пробирках с различными разведениями препарата. Полученные результаты исследований представлены в табл. 12. Таблица 12. Результаты изучения противогрибковой активности

Похожие:

	План исследования «применение препарата "эндонорм"® в терапии узлового и многоузлового эутиреоидного зоба»		Конспект открытого урока «Применение координатно векторного метода при решении задач С2» Продолжить знакомство с Красной книгой, расширить и углубить знания детей о животных и растениях, встречающихся в нашей местности,продолжить...
	Тема: Обобщение и систематизация знаний по теме «Атмосфера» Развивать самостоятельную познавательную активность уч-ся; умение быстро и логически мыслить, умение применять полученные знания...		Тема: Обобщение и систематизация знаний по теме «Атмосфера» Развивать самостоятельную познавательную активность уч-ся; умение быстро и логически мыслить, умение применять полученные знания...
	Учитель задает вопросы командам по очереди (1 вопрос 1 балл) Развивать самостоятельную познавательную активность уч-ся; умение быстро и логически мыслить, умение применять полученные знания...		Бионормализующее действие препарата пдс при восстановлении воспроизводительной... Д 220. 004. 01 при фгоу впо «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия» по адресу: 308503
	Лечебная и профилактическая эффективность сахаптина при ассоциированных... Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология		Программы дисциплин электротехника введение краткая характеристика... Электрическое поле и его основные характеристики. Электропроводность. Электрический ток и его разновидности. Характеристики тока....
	Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... «Разработка новых методов индивидуальной коррекции сводно-радикального статуса при бактериальных инфекциях»		Технология объяснительно-иллюстрированного обучения Термин "технология" заимствован из зарубежной методики, где его используют при описании по-разному организованных процессов обучения....
	Осложнения беременности при острых респираторных вирусных инфекциях... О душе. Но все, чтобы ни представлялось необходимым исследовать, мы будем обсуждать, насколько способны, с помощью ума и доказательства,...		Программа вступительного экзамена по географии программ а План и карта. Понятие о горизонте. Способы ориентирования на местности. Компас и его применение при ориентировании
	ПРИМЕНЕНИЕ КОМПЬЮТЕРНЫХ ТЕХНОЛОГИЙ ПРИ ПОДГОТОВКЕ К Экзаменам ДОКЛАД “ПРИМЕНЕНИЕ КОМПЬЮТЕРНЫХ ТЕХНОЛОГИЙ ПРИ ПОДГОТОВКЕ К ЕГЭ ФИЗИКЕ” Подготовил учитель физики Кюкяйской СОШ		Урок в 6А классе по теме: «Задачи на нахождение дроби от числа и числа по его дроби.» Цели: закрепить и обобщить правила нахождения дроби от числа и числа по значению его дроби; показать применение правил при решении...
	Тема урока: Векторная графика и ее применение. Тип урока Продолжить знакомство с Красной книгой, расширить и углубить знания детей о животных и растениях, встречающихся в нашей местности,продолжить...		Ферментативный гидролизат красной смородины, его биохимическая характеристика... Данная программа проводится при сотрудничестве Международного центра японского языка Японского Фонда и аспирантуры Института политических...