Научно-организационные основы эпидемиологического надзора за природно-очаговыми и особо опасными вирусными инфекциями в восточ­ной сибири

Серологический мониторинг природных очагов арбовирусных инфекций Серологический мониторинг природных очагов арбовирусных инфекций (клещевой энцефалит, Инко, Гета и Батаи). Трудности осуществления эпидемиологического надзора за арбовирусными инфекциями в Восточной Сибири, связанные с выявлением случаев заболеваний, обусловили применение комплексного подхода к серологическому мониторингу, основанному на одновременном скрининге широкого спектра арбовирусов. На его основе получены сведения об иммунной прослойке к арбовирусам у людей и сельскохозяйственных животных на различных административных территориях Восточной Сибири, различающихся по ландшафтно-климатическим условиям, что позволяет выделить их в зоны разного уровня риска (рис. 2 А и Б.); дана оценка нап- А Б Республика Саха (Якутия) Республика Саха (Якутия) Республика Саха (Якутия) Иркутская область Иркутская область Красноярский край Иркутская область Рис. 2. Иммунная прослойка среди населения (А) и сельскохозяйственных животных (Б) в Иркутской области, Республиках Саха (Якутия), Бурятия, Красноярском крае к арбовирусам Инко, Гета и Батаи. Примечание: -Инко; - Гета; - - Батаи; - КЭ. Показатель иммунной прослойки: 30 и выше; до30; до 20; до 10 %%. ряженности гуморального иммунитета к арбовирусам у крупного рогатого скота (КРС) в разных природных очагах; изучена динамика естественной иммунизации у КРС, выпасавшегося в очагах арбовирусных инфекций. При изучении популяционного иммунитета к арбовирусам у населения Иркутской области, Республик Саха, Бурятия и УОБАО повсеместно выявлена иммунная прослойка к вирусам КЭ, Инко, Гета и Батаи. Ее величина варьировала в разных административных субъектах, территориях и отдельных населенных пунктах и зависела от ландшафтно-климатических условий и численности кровососущих членистоногих. Показано наличие сочетанных природных очагов вирусов КЭ, Инко, Гета и Батаи почти на всех обследованных территориях. Величина иммунной прослойки населения к вирусу КЭ в административных субъектах находилась в пределах 21,5 % (Республика Бурятия) – 29,5 % (Иркутская область). Наибольший уровень наблюдали в Тункинском районе Республики Бурятия – 47,3 ± 2,9 %. Установлена территориальная неоднородность проявления активности арбовирусов. Наиболее широко распространен вирус Инко, его активность выше на северных территориях региона. Более высокие показатели характерны для плоскогорных участков в пределах подзон средней и южной тайги (Казачинско-Ленский и Усть-Илимский районы Иркутской области, пригородные зоны гг. Красноярск и Иркутск, Междуречье Алдана и Лены) с достаточно высокой численностью комаров родов Aedes и Сulex. В каждом из административных субъектов можно выделить участки территорий, отличающихся по показателям иммунной прослойки. Наибольшая частота вируснейтрализующих антител у населения выявлена к вирусу Инко (самый высокий уровень иммунной прослойки у населения Алданского улуса: в разные годы он составлял 30,5 ± 4,0 - 50,3 ± 3,0 %%), а наименьшая – к Гета (1,1 ± 0,7 % в Накынском улусе) и Батаи (0,7 ± 0,5 %) в Тункинском районе Республики Бурятия). На некоторых участках иммунная прослойка не установлена: к вирусу Батаи - в Накынском улусе, Заларинском, Эхирит-Булагатском и Заларинском районах Иркутской области; к вирусу Гета - в Баяндаевском районе. У КРС из Кяхтинского района (Республика Бурятия) не обнаружены антитела к вирусу Батаи. Эпидпотенциал природных очагов вирусов Батаи и Гета в таежном и таежно-степном ландшафтах исследованных районов Восточной Сибири значительно ниже. В тоже время процент серопозитивных особей КРС к вирусам Гета и Батаи выше на юге Иркутской области. Впервые обнаружены вируснейтрализующие антитела к вирусу КЭ у КРС в Усть-Кутском районе Иркутской области. Результаты серологического обследования населения и сельскохозяйственных животных в районах с различными ландшафтными и природно-климатическими условиями несколько различались, но в большинстве случаев коррелировали с численностью и особенностями состава переносчиков, что согласуется с экологическими предпосылками существования природных очагов арбовирусных инфекций. Изучение напряженности гуморального иммунитета к арбовирусам у КРС показали его неоднородность на разных участках (табл. 4) Наиболее высокие титры антител к вирусу Инко отмечены в Якутии в Междуречье Алдана и Лены – СГТ составил 5,83 ± 0,31. Достаточно высокий уровень СГТ отмечен и в пригородных зонах гг. Красноярск и Иркутск, причем СГТ выше к вирусу Батаи. Здесь же выявлены наиболее высокие титры антител, в отдельных случаях достигавшие 1:1280 - 1:2560. Таблица 4 Напряженность популяционного иммунитета в реакции нейтрализации в (log 2) к арбовирусам у КРС с разных территорий Восточной Сибири Арбовирусы Территория Пригородная зона г. Иркутска Пригородная зона г. Красноярск Междуречье Алдана и Лены Остров Ольхон озера Байкал абс. СГТ* абс. СГТ абс. СГТ абс. СГТ Инко 27 5,2 ± 0,1 9 5,5 ± 0,2 12 5,8 ± 0,3 5 4,5 ± 0,2 Гета 11 4,8 ± 0,1 5 5,3 ± 0,0 6 4,3 ± 0,0 4 5,0 ± 0,2 Батаи 25 5,9 ± 0,2 2 6,7 ± 0,6 12 4,8 ± 0,1 4 5,0 ± 0,2 КЭ 84 6,6 ± 0,2 20 7,9 ± 0,4 1 6,1±0,0 0 0 Примечание: СГТ – средний геометрический титр Наше предположение о том, что результаты обследования телят могут быть применены при изучении эпидемической активности очага в конкретный сезон, не подтвердилось. Изучение динамики естественной иммунизации у КРС, выпасавшегося в очаге арбовирусных инфекций, показало, что особенностью естественной иммунизации коров при контакте с вирусами КЭ, Инко, Гета и Батаи является непродолжительность сохранения вируснейтрализующих антител, уровень которых на протяжении осенне-зимних месяцев заметно уменьшается и может полностью утратиться. С точки зрения эпидемиологического надзора за КЭ данные серологического обследования населения эндемичных территорий позволяют судить об активности природного очага и могут быть использованы при планировании профилактических мероприятий. Серологическая разведка циркуляции возбудителей геморрагической лихорадки с почечным синдромом и лихорадки Западного Нила. Несмотря на наличие природных очагов хантавирусов, а, возможно, и вируса Западного Нила, их распространение на территории Восточной Сибири практически не изучено. С 1995 по 2008 гг. нами обследовано 1546 мелких млекопитающих более 20 видов, относящихся к трем отрядам, 6 семействам и 13 родам, отловленных на территориях Красноярского и Забайкальского краев, Республик Саха (Якутия), Бурятия, УОБАО и Иркутской области, расположенных в следующих ландшафтных зонах: таежной, смешанных и широколиственных лесов, лесостепной и степной. Анализ результатов обследования мелких млекопитающих в ИФА показал, что на территории Восточной Сибири антиген хантавирусов обнаружен у восьми видов мелких млекопитающих: красной и красно-серой полевок (Республика Саха), узкочерепной полевки, полевки-экономки, азиатской лесной мыши, мыши полевой и серой крысы (Иркутская область), узкочерепной полевки и мыши домовой (Забайкальский край). В Иркутской области в пробах легких мелких млекопитающих, отловленных в 2006 г. в верховьях реки Умга (Заларинский район), антиген хантавирусов выявлен в среднем в 11,2 ± 3,3 % проб. Наибольший показатель зараженности наблюдали среди полевок-экономок - 16,6 ± 7,5 %. Довольно высокая частота зараженности выявлена и у узкочерепных полевок - 11,36 ± 4,7 %. В двух пробах от узкочерепных полевок в ОТ-ПЦР обнаружена РНК хантавирусов. В Забайкальском крае антиген хантавирусов выявлен в Забайкальском районе в легких двух видов грызунов – мыши домовой и узкочерепной полевки, РНК хантавирусов выявлена в одной пробе от джунгарского хомячка. Изучение иммунитета к вирусу ГЛПС у населения региона (выборочно у населения Республики Саха (Якутия) и Бурятия (Кяхтинский район) показало отсутствие серопозитивных лиц. Серологическое обследование 108 жителей двенадцати деревень Заларинского района (Иркутская область) выявило трех (2,7 %) сероположительных на ГЛПС с титрами 1:32. Анализ проб сывороток крови, поступивших от 16 больных с подозрением на ГЛПС из лечебных учреждений гг. Иркутск, Ангарск, Усть-Илимск, Чита и Улан-Удэ, показал наличие антител к вирусу ГЛПС в титрах 1:128 у больного, прибывшего из Саратовской области и 1:1024 у проживающего в Забайкальском крае. Результаты серологического обследования населения, проживающего на территории Восточной Сибири, свидетельствуют о циркуляции в регионе возбудителя лихорадки Западного Нила. Антитела обнаружены в среднем у 3 % населения, причем, у пациентов неврологических стационаров достоверно чаще – у 12-18 %. Впервые обнаружены антитела к вирусу ЗН у населения в Алданском улусе (Республика Саха), Эхирит-Булагатском районе УОБАО, Заларинском районе Иркутской области, Прибайкальском, Баргузинском и Кяхтинском районах Республики Бурятия. Для установления возможной роли вируса ЗН в инфекционной патологии населения в период активности кровососущих членистоногих в 2005-2007 гг. проведены сероэпидемиологические исследования среди больных, в том числе и амбулаторных, обратившихся за медицинской помощью с жалобами на высокую температуру, упорные головные боли и другие проявления, включая менингиты и энцефалиты. При исследовании в 2005 г. в опытную группу включены 65 больных, поступивших в апреле-июне для стационарного лечения в Иркутскую областную клиническую инфекционную больницу (ОКИБ) с подозрением на КЭ и другие нейроинфекции. Контрольную группу составили 78 пациентов поликлиник, обратившихся за медицинской помощью по поводу заболеваний, не связанных с поражением нервной системы. Частота положительных находок в ИФА к вирусу ЗН в опытной группе составила 12,3 ± 4,3 %, а в контрольной – 2,6 ± 1,8 % (р<0,05). Антитела к вирусу ЗН во всех случаях (кроме одного из поликлиники) обнаружены в сыворотках крови, не содержащих вируснейтрализующие антитела к вирусу КЭ. В одном случае выявлена сероконверсия к вирусу ЗН во второй сыворотке у больного с окончательным диагнозом ОРВИ. В 2006 г. обследовано на наличие антител к вирусу ЗН еще 94 пациента ОКИБ с подозрением на КЭ, и положительный результат получен у 17 из них (18,0 ± 4,0 %). В контрольной группе (пациенты Центра профилактики клещевых инфекций, n = 112), антитела к вирусу ЗН обнаружены в 3,2 ± 1,7 %, что достоверно меньше, чем в группе пациентов инфекционной больницы (р<0,05). В 2007 г. обследовано 92 пациента ОКИБ, поступивших в августе-сентябре. Сероположительными к вирусу ЗН оказались 14 (15,2 ± 3,7 %). В контрольной группе, состоящей из 95 жителей Заларинского района Иркутской области (сыворотки крови собраны в сентябре) антитела к вирусу ЗН обнаружены в трех пробах (3,1 ± 1,8 %), что также достоверно ниже, чем в группе пациентов ОКИБ (р<0,05). Таким образом, у пациентов инфекционного стационара с неврологической симптоматикой антитела к ВЗН обнаруживались в 4-5 раз чаще, в сравнении с амбулаторными пациентами. Результаты наших исследований позволяют высказать предположение о существовании в Восточной Сибири природных очагов ЛЗН и этиологической роли вируса ЗН в патологии населения. Изучение свойств популяции вируса кле­щевого энцефалита в региональных природных очагах Свойства штаммов вируса клещевого энцефалита, изолированых из иксодовых клещей (на примере Приангарья, 1995-1998 гг.). Одним из критериев, позволяющим выявить гетерогенность вирусной популяции, является способность вируса к репродукции в тех биологических системах, в которых он не размножался при первичной изоляции. Осуществляли это путем смены систем культивирования. Из ИФА-положительных клещей и ИФА-отрицательных пулов клещей были изолированы штаммы вируса КЭ, отнесенные в соответствии с применяемыми системами изоляции в семь групп. При выделении все изоляты (63) прошли два-три пассажа на культуре клеток или НБМ. Анализ результатов сме­ны систем культивирования показал, что изоляты, выделенные от клещей и пулов клещей только в культуре клеток при температуре 37 °С, не адаптировались к культуре клеток при 28 °С на Таблица 5 Результаты перевода изолятов в системы, отличные от систем первичной изоляции Смена системы первичной изоляции Изоляты из ИФА-положительных клещей Изоляты из ИФА-отрицательных пулов клещей Всего исследовано Положительный результат % Всего исследовано Положительный результат % КК с37 на 28 °С 9 0 0 4 0 0 КК с 37 °С на НБМ 14 7 50 11 5 45,4 КК с28 на 37 °С 10 0 0 6 0 0 КК с 28 °С на НБМ 23 9 39,1 13 2 15,4 Примечание: КК – культура клеток; НБМ – новорожденные белые мыши протяжении трех пассажей, т.е. все они имеют селективное преимущество при размножении в клеточной культуре. Отрицательный результат получен и при переводе штаммов с 28 на 37 °С (табл. 5). При смене системы культивирования с культуры клеток на НБМ положитель­ный результат получен у 16 из 37 (43,2 %) ИФА-положительных и у семи из 24 (29,1 %) ИФА-отрицательных изолятов. Причем, при смене систем культивирования с культуры клеток на НБМ больше положительных результатов получено для штаммов, изолированных при 37 °С, чем при 28 °С. За 1995-1998 гг. изучения очагов клещевого энцефалита в Иркутском, Ольхонском, Слюдянском и Эхирит-Булагатском районах Иркутской области нами выделено 130 штаммов от иксодовых клещей: /. persulcatus (123), D. silvarum (2) и D. nuttalli (5). У 25 штаммов изучена вирулентность вируса для беспородных белых мышей при внутримозговом и подкожном способах введения материала. При внутримозговом заражении показатели вирулентности варьировали в пределах 5,09-10,0 lg ЛД 50/мл и подкожном - 3,60-9,16 lg ЛД 50/мл (титр 3,60 lg ЛД 50/мл выявлен только у одного штамм при внутримозговом заражении, титр 5,09 lg ЛД 50/мл - у одного штамма при подкожном заражении). Индекс инвазивности (ИИ) – в пределах 0,13-3,0 При экстраневральном введении высокая вирулентность (выше 8,0 lg ЛД 50/мл) выявлена у 10 штаммов. ИИ у них находился в пределах 0,15-1,5 lg ЛД 50/мл - Средние ве­личины титров при церебральном заражении составили 8,12 ± 0,23, при перифе­рическом - 7,34 ± 0,28 lg ЛД 50/мл. Средний показатель ИИ = 0,77 ± 0,15. Таким образом, большинство (92 %) изученных штаммов высоковирулентны как при внутримозговом, так и подкожном введении вируса (ИИ <2,0), один штамм оказался умеренно вирулентным (ИИ = 3,06). Штаммы обладали выраженной гетерогенно­й гемагглютинирующей активностью, вызывая агглютинацию гусиных эритроцитов в условиях оптимума рН 6,2 при 4 °С в пределах 1:20-1:640. Свойства штаммов вируса клещевого энцефалита, изолированных от людей, умерших от клещевого энцефалита (на примере Забайкальского края, 1995-2003 гг.). Для изучения этиологической структуры очаговых форм КЭ, заканчивающихся летальным исходом, в Забайкальском крае впервые с применением молекулярно-биологических методов изучена представительная группа штаммов вируса КЭ, выделенных от 13 умерших людей с энцефаломиелитической, менингоэнцефаломиелитической, менингополиомиелитической формами КЭ. Штаммы изолированы на НБМ, зараженных пробами из разных от­делов головного (11), спинного (1) мозга и трупной крови (1). Результаты изучения вирулентности для беспородных белых мышей массой 6-8 г показали, что большинство штаммов высоковирулентны как при внутримозговом, так и подкожном введении вируса (ИИ<2,0) и только один штамм (653) – умеренновирулентный (ИИ = 3,0). Различия в способности преодолевать гематоэнцефалитичесий барьер у изученных штаммов разных подтипов вируса КЭ не установлены. Штаммы независимо от подтиповой принадлежности агглюти­нировали эритроциты гуся в зоне рН 5,8-6,2. Титры гемагглютинина колебались от 1:40 до 1:1280. Преобладали штаммы со средними титрами. Исключение со­ставил штамм 102 (дальневосточный подтип), у которого отсутство­вали гемагглютинирующие свойства. Это один из немногочисленных антигенно-дефектных изолятов вируса КЭ, с которыми связывают развитие серонегативных форм инфекции (Погодина В.В. и др., 1992). Все изученные штаммы проявляли цитопатическое действие на культуре клеток СПЭВ, но в то же время различались по сро­кам деструкции монослоя и степени его выраженности. Молекулярно-генетическая характеристика штаммов вируса клещевого энцефалита. Нами охарактеризована структура вирусной популяции в Приангарье по результатам ретроспективного генотипирования 47 изолятов вируса КЭ, выделенных в 1995-2005 гг. из клещей, собранных на территории Иркутского (46) и Ольхонского (1 изолят) районов Приангарья и 1 штамма, выделенного из пробы головного мозга от больной К., умершей от КЭ (Иркутская область). Генотипирование штаммов методом ПЦР в режиме реального времени с гибридизационно-флюоресцентной детекцией с генотипоспецифическими зондами показало абсолютное преобладание сибирского подтипа: из 47 изолятов 41 (87,2 %) принадлежит к сибирскому, два (4,2 %) – к дальневосточному подтипам и четыре (8,5 %) содержат смесь вирусов двух генотипов в различной концентрации – микст-штаммы (табл. 6). Таблица 6 Результаты генотипирования штаммов вируса клещевого энцефалита, изолированных из иксодовых клещей, собранных на территории Приангарья в 1995-2005 гг. Место сбора клещей Год Количество генотипированных штаммов Генотип сибирский дальне- восточный микст Байкальский тракт 1995 20 17 1 2 1996 2 2 - - 1997 4 2 1 1 1998 2 2 - - 2005 9 9 - - Тихонова падь 1995 2 2 - Голоустненский тракт 1995 2 2 - - 1997 1 1 - - Утулик 1996 3 3 - - 107 км. КБЖД 1995 1 1 - - Ольхонский район 1995 1 - - 1 Всего (%) 47 41 (87,2 ) 2 (4,2) 4 (8,5) Полученные сведения являются новыми доказательствами ранее описанного (Верхозина М.М. и др., 2007) преимущественного распространения в Приангарье сибирского подтипа вируса КЭ. В Забайкальском крае от больных, умерших от очаговых форм КЭ, изолировано 13 штаммов вируса. Генотипированием установлено наличие среди них штаммов вируса КЭ дальневосточного (8 штаммов) и сибирского (4 штамма) подтипов. Один штамм (штамм 29) охарактеризован как микст - содержал участки генома дальнево­сточного и сибирского подтипов. В результате впервые проведенного комплексного изучения биологических, в том числе и молекулярно-генетических свойств штаммов вируса КЭ, выделенных от умерших больных показано, что в Забайкальском крае заболевания КЭ обусловлены двумя самостоятельными подтипами вируса – дальневосточным и сибирским. Оба подтипа вызывают развитие очаговых форм болезни с летальным исходом. Очаговые формы связаны и с микст-штаммами вируса КЭ. Таким образом, на основе генотипирования 61 штамма охарактеризована структура популяции вируса КЭ, циркулирующего в Приангарье и Забайкалье в 1995-2005 гг. Структура популяции сформирована на основе сибирского и дальневосточного генотипов с абсолютным доминированием сибирского генотипа (87 %) в Приангарье (Иркутский район) и напротив, доминированием в Забайкалье дальневосточного генотипа (61,5 %). Показано, что в очаге совместной циркуляции разных подтипов появляются микст-штаммы вируса КЭ, в которых сочетаются генетические признаки сибирского и дальневосточного подтипов; впервые в природном очаге в Приангарье изолированы четыре таких штамма, а в Забайкалье – один.

Похожие:

	Научные, методические и организационные основы мониторинга устойчивости... Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Нижегородская государственная...		Проблема вирусов в наше время очень актуальна. Она привлекает внимание... Меня привлекла эта тема, потому что сейчас тысячи людей заражены такими опасными вирусами заболеваниями как спид, рак, но и не только...
	Инструкция по правилам отбора,хранения и доставки материала для микробиологического... Медико-тактическая характеристика эпидемических очагов. Клиника, диагностика и лечение больных особо опасными инфекциями. Характеристика...		Приказ Роспотребнадзора от 18. 04. 2011 n 385 о совершенствовании... Во исполнение решения коллегии Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 01. 04....
	Доклад об осуществлении государственного контроля (надзора) в сфере... Санкт- петербурга ежегодно оздоравливаются в летних оздоровительных учреждениях, в связи с ограниченностью территории города Санкт-...		Презентация учебного проекта «Природно-ресурсный потенциал Западной Сибири» ...
	Первый московский государственный медицинский университет имени И. М. Сеченова Тема: «Введение в гигиену питания. Основные направления государственного санитарно-эпидемиологического надзора в области гигиены...		Контрольные вопросы для подготовки к занятию и к самостоятельной работе на занятии по теме Тема: «Введение в гигиену питания. Основные направления государственного санитарно-эпидемиологического надзора в области гигиены...
	Геморрагические лихорадки группа острых арбовирусных инфекций, общей... Геморрагические лихорадки являются природно-очаговыми заболеваниями. Резервуаром вирусов в природе служат различные млекопитающие,...		Муниципальное бюджетное общеобразовательное учреждение В целях четкой организации труда сотрудников и обучающихся школы, соблюдения требования санитарно-эпидемиологического надзора
	Отчет о научно-исследовательской работе по теме: «Методические и... Отчет по нир «Методические и организационные основы аудита высшими органами государственного финансового контроля информационных...		Рекомендации по проведению противоэпидемических (профилактических)... Рекомендации разработаны отделом эпидемиологического надзора Управления Роспотребнадзора по Хабаровскому краю, 2012г
	Российская федерация Министерства общего и профессионального образования РФ и мко, предложений центра государственного санитарно- эпидемиологического...		Учебно-методический комплекс дисциплины «Теоретические основы эпидемиологического... ...
	Приказ по центру образования №363 Во исполнение нормативных документов Министерства общего и профессионального образования РФ и мко, предложений центра государственного...		Гигиена питания Освоение методик организации и проведения государственного санитарно эпидемиологического надзора, санитарно эпидемиологических экспертиз,...