Клинико-иммунологические особенности хронического вирусного гепатита с при hcv-моноинфекции и hcv-hiv-коинфекции
Скачать 326.81 Kb.
|
На правах рукописи Романенко Олег Михайлович КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ХРОНИЧЕСКОГО ВИРУСНОГО ГЕПАТИТА С ПРИ HCV-МОНОИНФЕКЦИИ И HCV-HIV-КОИНФЕКЦИИ 14.00.10 – инфекционные болезни 14.00.14 – патологическая физиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Казань - 2005Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении дополнительного профессионального образования «Казанская медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию». Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор Диляра Кабировна Баширова доктор медицинских наук, профессор Анатолий Павлович Цибулькин Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Диляра Шакировна Еналеева доктор медицинских наук, профессор Рустэм Салахович Фассахов Ведущая организация: Санкт-Петербургская военно-медицинская академия. Защита состоится «___»______________2005 г. в_____ часов на заседании диссертационного совета Д.208.034.01 Государственного образовательного учреждения высшего образования «Казанский государственный университет академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (420012, г. Казань, ул. Бутлерова, 49). С диссертацией можно ознакомится в научной библиотеке ГОУ ВПО «Казанская медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» по адресу: 420012, г.Казань, ул. Бутлерова, 49). Автореферат разослан «___»_________________2005 г. Ученый секретарь Диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор В.Х. Фазылов ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы. В последние 10 лет HCV-инфекция становится ведущей среди всех вирусных гепатитов в виду высокой частоты хронизации, возможных исходов в цирроз и гепатоцеллюлярную карциному (Ивашкин В.Т., 1997; Сологуб Т.В., 1997; Соринсон С.Н., 1998; Блохина Н.П., 2002; Еналеева Д.Ш., Фазылов В.Х., Созинов А.С., 2003 и др.). По данным многочисленных авторов частота инфицированности HCV-инфекцией превышает 3% населения планеты, представляет собой вирусную пандемию и 4-5 раз превышает число инфицированных вирусом HIV (Бобкова М.Р., 2002; Lavanchy D., Memahon B., 2000; Rondot-Thoraval F., 2000). Хотя пути трансмиссии обоих вирусов одинаковы, процент одновременного инфицирования вирусами HCV и HIV колеблется значительно от 15 до 90% в зависимости от пути инфицирования. Наиболее высокие проценты коинфицирования регистрируются при парентеральном пути заражения у потребителей инъекционных наркотиков (Шахгильдян И.В., 2003; Кравченко А.В., 2003; Покровский В.В., 2004). Клинический спектр вирусного гепатита С гетерогенный, часто включает асимптомные и субклинические формы болезни. Однако, при наличии неблагоприятных кофакторов в виде ВИЧ инфекции, течение болезни может приобретать более агрессивный характер. Установлено, что коинфицирование вирусами HCV и HIV в значительной степени утяжеляет течение вирусного гепатита С и ускоряет процессы фиброзирования печени и развития цирроза (AlloryY., 2000; Winnock. M., 2004; Soto B., Sanchez-Quijano A., Rodrigo L. et al., 1997; Soriano V., 2002; Gregory Dore, Joe Sasadeusz, 2005). Влияние HCV на течение ВИЧ-инфекции до настоящего времени является дискутабельным (Кравченко А.В., 2002).Отдельные авторы полагают, что наличие хронического гепатита С не отражается отрицательно на течении ВИЧ-инфекции (Zilberberg H., Stanislas Pol, Valerie Thiers et al., 2000). Вместе с тем большинство исследователей считают, что частота развития СПИДа и летального исхода, обусловленного так называемыми «СПИД-индикаторными» заболеваниями, существенно выше у лиц со смешанной инфекцией (Hayashi N., Mita E., 1999; Piroth L., Duong M., Qnantin C. et al., 1998; Маурицио Боначини, 2004). Более того, у больных смешанной инфекцией увеличение числа CD4-лимфоцитов после начала высокоактивной антиретровирусной терапии менее значимо, чем у пациентов только с ВИЧ-инфекцией (Greub G., Lebergerber B., Battegay M. et al., 2000). Вирусные гепатиты также влияют на течение ВИЧ-инфекции, приводя в частности, к уменьшению количества Т-хелперов/ индукторов (Кожевникова Г.М., Ющук Н.Д., 1998; Ивашкин В.Т., Маммаев С.Н., Лукина Е.А. и др., 2001). Иммуносупрессия, связанная с ВИЧ-инфекцией не может не сказываться на течение и клинические проявления HCV-инфекции. Точно также состояние печени не может не отражаться на функциональных показателях иммунитета и эффективности лечения ВИЧ-инфекции (Бобкова М.Р., 2002; Волчкова Е.В., 2004). Многими учеными доказано, что в формировании различных вариантов течения и исходов НCV инфекции важная роль принадлежит состоянию иммунной системы пациента. Однако до настоящего времени нет единого мнения о механизмах специфического иммунного ответа не только при коинфекции, но и моноинфекции HCV. Следует отметить, что существуют некоторые противоречия в вопросах, связанных с корреляцией спектра антител и определением стадии или прогноза заболевания. Выше изложенное послужило основанием для выполнения настоящей работы. Цель исследования - выявление клинико-биохимических и иммунологических особенностей течения хронического вирусного гепатита С при HCV- моно- и HCV-HIV-коинфекции. Задачи исследования:
Научная новизна. Впервые на основе расширенного спектра методов определения специфических анти-HCV IgM и IgG антител даны сравнительные характеристики клинико-биохимических и иммунологических показателей в периоды обострения и ремиссии у больных хроническим вирусным гепатитом С. Доказана возможность у больных хроническим вирусным гепатитом С при HCV-HIV коинфицировании формирования ремиссии процесса только на основании клинико-биохимических показателей, при сохранении иммунологической активности. Впервые использована модификация метода иммуноблотинга для количественной оценки уровня специфических анти-HCV IgM и IgG антител как в свободном виде, так и в виде специфических циркулирующих иммунных комплексов. На основании современных иммунологических методик охарактеризовано состояние гуморального иммунитета у больных хроническим вирусным гепатитом С в динамике заболевания. Доказано длительное сохранение функционального полноценного гуморального иммунитета у больных хроническим вирусным гепатитом С при моноинфицировании. Впервые даны качественные и количественные характеристики состояния гуморального иммунитета к различным антигенам вируса гепатита С при HIV-формируемом иммунодефиците. Практическая значимость. Апробированы и внедрены комплексные клинико-биохимические и иммунологические методики оценки фаз обострения и ремиссии у больных хроническим вирусным гепатитом С при HCV-моно- и HCV-HIV-коинфицировании. Модифицированы и рекомендованы к практическому применению методы количественной оценки уровня специфических анти-HCV антител на основе использования иммуноблоттинга третьего поколения. Оценены иммуногенность (способность к выработке специфических антител) и антигенность (способность взаимодействовать со специфическими антителами с формированием циркулирующих иммунных комплексов) основных структурных и неструктурных антигенов вируса гепатита С. Доказаны высокие иммуногенные и антигенные потенции у core- и NS3 антигенов вируса гепатита С. Доказана возможность ошибочной оценки в диагностике фаз обострения на фоне иммунодефицита у больных хроническим вирусным гепатитом С при HCV-HIV-коинфицировании. Положения, выносимые на защиту: 1. Клинико-лабораторные сдвиги при хроническом вирусном гепатите С в периоды обострений однотипны в группах HCV-моно и HCV-HIV-коинфициро-ванных больных и характеризуются признаками поражения гепатоцитов на фоне стимуляции образования IgM и IgG классов антител ко всем изучаемым структурным и неструктурным антигенам вириона. 2. Клинико-биохимическая ремиссия хронического вирусного гепатита С часто, особенно в группах с длительным течением заболевания и у HCV-HIV-коинфицированных больных, формировалась без развития сопутствующей иммунологической ремиссии. 3. Модифицированные методы количественного учета выраженности реакций иммуноблоттинга позволили охарактеризовать не только степень иммуногенности отдельных белковых компонентов вируса гепатита С, но и их активность в формировании специфических циркулирующих иммунных ком-плексов. 4. Развитие иммунодефицита у больных хроническим вирусным гепатитом С при HCV-HIV-коинфицировании сочетается с подавлением иммунного ответа, проявляющегося не только в способности к образованию сывороточных антител, но и участию последних в образовании циркулирующих иммунных комплексов. Внедрение результатов исследования. Результаты исследований внедрены в практическую деятельность гепатологического отделения Городской инфекционной клинической больницы г. Казани, РЦПБ СПИД и ИЗ МЗ РТ, в учебном процессе кафедры инфекционных болезней ГОУ ДПО «Казанская государственная медицинская академия ФА З и СР». Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на: V Российской научно-практической конференции: Гепатит В, С и Д (Москва, 2003), на Ш съезде иммунологов и аллергологов СНГ (Сочи, 2000),VШ съезде Итало-Российского общества по инфекционным болезням (С-Петербург, 2002);Научно-практической конференции с международным участием по инфекционным болезням (Харьков, 2003); pасширенного заседания предметно-проблемной комиссии КГМУ «Инфекционные болезни»» с участием сотрудников кафедры инфекционных болезней, клинической лабораторной диагностики, фтизиатрии и пульмонологии, аллергологии и иммунологии, эпидемиологии и дезинфектологии КГМА ГОУ ДПО «Казанская государственная медицинская академия ФА З и СР» (Казань, 2005). Публикации. По материалам диссертации опубликовано 13 научных работ. Структура и объём диссертации. Диссертация изложена на 116 страницах машинописного текста, состоит из введения, литературного обзора, 4-х глав собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, включающего 94 отечественных и 73 зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 4 рисунками и 18 таблицами. Содержание работы Материалы и методы исследования Для выполнения поставленных задач в течение 1999-2003 гг. на базе отделения вирусных гепатитов городской клинической инфекционной больницы №1 им. проф. А.Ф. Агафонова и Республиканского центра по профилактике и борьбе со СПИДом и ИЗ МЗ РТ обследован 151 больной хроническим вирусным гепатитом С: с HCV-моноинфекцией было 46 пациентов, с HCV-HIV-коинфекцией – 105 человек. Среди обследованных больных было 139 мужчин (92,05%) и 12 женщин (7,95%). Больные микст-гепатитами в группы исследования не включались. Диагноз ХВГС устанавливали на основании клинико-эпидемиологиче-ских и лабораторных данных. У всех больных ВГС был верифицирован обнаружением маркеров HCV-инфекции – анти-HCV IgM, IgG методом ИФА, определением РНК – HCV в плазме крови методом ПЦР. Изучение количественного содержания спектра анти-HCV, циркулирующих в свободном и связанном виде в ЦИК проводили методом иммуноблоттинга. В ходе наших исследований были использованы методы определения различных показателей функциональной активности печени (определение уровня общего билирубина и его фракций, активности аминотрансфераз, тимоловой пробы, протромбинового индекса, белковых фракций). Всем больным проведено ультразвуковое исследование печени. Определение активности гепатоцеллюлярных ферментов (гамма-глюта-милтранспептидазы, щелочной фосфатазы) проводились на базе лаборатории РЦПБ СПИД и ИЗ МЗ РТ с использованием многоканального фотометра FP-901 M фирмы «Лабсистемс». У всех пациентов многократно изучали показатели периферической крови с подсчетом форменных элементов. Иммунологические исследования включали количественное определение субпопуляций лимфоцитов CD4, CD8, используя моноклональные антитела. Сывороточные иммуноглобулины А, М, G определяли методом турбидиметрии на биохимическом анализаторе ФП-901М по методике Т.И. Лукичевой и др. (1991), Н.М. Кудряшовой и др. (1993). Диагностика ВИЧ-инфекции у всех обследованных устанавливался после скринингового, референтного и экспертного исследований на наличие специфических антител к ВИЧ в ИФА и иммуноблоте. Молекулярно-биологическая диагностика ВИЧ-инфекции проводилась методом полимеразной цепной реакции. Исследование спектра анти-HСV в сыворотках крови проводили методом ИФА на тест-системах «РекомбиБест анти-ВГС» ЗАО «Вектор-Бест» с последующим определением спектра антител к структурным и неструктурным белкам HCV в иммуноблоте «INNO-LIATM HCV Ab III update» фирмы «INNO GENETICS» (Бельгия). Денситометрию стрипов иммуноблота проводили в отраженном свете на сканере SHARP JX-330 «Pharmacia Biotech» (Швеция). При оптимизации метода получения ЦИК из сывороток крови использовали следующие концентрации полиэтиленгликоля с молекулярным весом 6000 (ПЭГ-6000): 7%, 14% и 21%, которые служили для определения содержания ЦИК различной молекулярной массы по оптической плотности (Герасимов И.Г., Зоркова Е.В, 2001). Антитела к вирусу гепатита С определяли с использованием иммуноблот тест-системы 3-го покoления INNO-LIA™ HCV Ab III update фирмы Innogenetics (Бельгия) на стрипах с линейно нанесенными на нейлоновую мембрану серологически информативных синтетическими конформационных аналогов эпитопов вируса. Результаты реакции оценивали визуально и инструментально в отраженном свете на сканере Sharp Jx-330 c использованием программы Image Master 10 Prime, версия 3,00 (Pharmacia Biotech). Интенсивность окрашенных полос (количественный анализ сканированных фракций) выражалась в оптических единицах плотности (Pixel). Полученные результаты обрабатывали с использованием программы Microsoft Exсel и представляли в виде табличных данных и линейных графических изображений. Циркулирующие иммунные комплексы исследовали методом преципитации полиэтиленгликолем – 6000 по M. Dygeon и др. (1977). Статистическая обработка данных производилась на персональном компьютере IBM HC «Pentium», с использованием программ «MS Excel-97» и программы «Статис-Мед». При этом использовались параметрические методы оценки результатов – вычисление средней арифметической (М), среднеквадратического отклонения, средней ошибки средней арифметической (m). Оценка различий между сопоставляемыми группами по избранным критериям осуществлялась по критерию Стьюдента. Достоверность изменений признавалась при вероятности ошибки р меньше или равно 0,05. Результаты собственных исследований и их обсуждение Периоды обострения у больных ХВГС как при HCV-моноинфициро-вании, так и при HCV-HIV-коинфицировании характеризовались достаточной скудностью клинической симптоматики с преимущественно неспецифической (внепеченочной) картиной проявления. Однако, если признаки увеличения печени и слабость встречались примерно с одинаковой частотой в обеих группах (от 70 до 85%), то для моноинфицированных больных ХВГС более типичным были боли в правом подреберье и постоянная желтушность склер (таблица 1). У коинфицированных больных особенность клинической картины формировали симптомы типичные, прежде всего, для HIV инфицирования. Это были лимфаденопатия, различные высыпания на коже и слизистых, а также эпизоды лихорадки и диарреи. Частота и выраженность их проявления имели связь со стадией развития ВИЧ-инфекции. Тем не менее, отклонения биохимических показателей в периоды обострения заболевания в обеих изучаемых группах практически не различались между собой и были связаны с увеличением активности цитолитических форм энзимов (АлАТ и АсАТ) на фоне незначительного увеличения концентрации билирубина (таблица 2). Таблица 1 Частота проявлений клинических симптомов у больных в фазу обострения хронического вирусного гепатита С с HCV-моноинфекцией и HCV-HIV-коинфекцией (в %)
|
Добавить документ в свой блог или на сайт
Похожие:
 | Циррозы печени. Осложнения циррозов печени В редких случаях возможна непосредственная эволюция острого вирусного гепатита, осложненного массивными печеночными некрозами, в... |  | Выявление и клиническая оценка hgv-инфекции у больных парентеральными... Выявление и клиническая оценка hgv-инфекции у больных парентеральными вирусными гепатитами – hbv, hcv и hbv/hcv |
| Клинико-лабораторные и иммунологические особенности острых гепатитов... А. А. Ключарева, Белорусская медицинская академия последипломного образования, кафедра инфекционных болезней | | Особенности клинической картины и лечения hcv-инфекции у пожилых Защита диссертации состоится “ 25 ” ноября 2005 г в 13. 00 на заседании диссертационного совета д 850. 002. 01 при Центральном научно-исследовательского... |
| Особенности течения вирусного гепатита с у больных гемофилией | | Клинико-биохимические и иммунологические особенности развития легочной... Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский... |
| Клинико-морфологические особенности первого триместра беременности... Программа секции «волейбол» адресована: детям – подросткам, обучающимся в 8-11ом классе моу «Большетарховская осш», проживающих в... | | Клинико-иммунологические характеристики традиционной и инновационной... Тема урока: Закрепление, совершенствование и учёт выполнения гимнастических упражнений |
| Реферат Хроническое заболевание печени и гепатоцеллюлярная карцинома,... Иммунотерапия хронического гепатита в анти-hbv вакцинами: от настоящего к будущему | | Клинико-иммунологические сопоставления больных эпилепсией В 1997, группа ученых исследовала 135 человек с эпилепсией. Больше чем 80 этих людей имели один или более дефектов в их клеточной... |
| Эпидемиологические особенности и вакцинопрофилактика гепатита а в крупном промышленном регионе | | Клинико-функциональные особенности и оптимизация диагностических... Работа выполнена в гбоу впо «Самарский государственный медицинский университет Минздравсоцразвития России» |
| Клинико-эпидемиологическая оценка эффективности вакцинации против... Работа выполнена в Государственном учреждении инфекционной клинической больнице №1 Комитета здравоохранения Москвы и в Государственном... | | Нарушения мозгового кровообращения при опухолях головного мозга Клинико-диагностические особенности с кровоизлиянием в опухоль головного мозга в зависимости от её гистологической структуры 55 |
| Реферат по курсу “ ” Тема: “Гепатит формы b и С.” А и В, стало очевидным существование еще нескольких вирусных гепатитов, которые стали называть гепатитами ни А, ни В. В 1989 г удалось... | | Клинико-морфологические особенности доброкачественных полиповидных... О душе. Но все, чтобы ни представлялось необходимым исследовать, мы будем обсуждать, насколько способны, с помощью ума и доказательства,... |
