На правах рукописи
Масалыкина Яна Павловна
ПОЛИГИПОВИТАМИНОЗ (А,С,Е) НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ: ЭТИОЛОГИЯ, ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ, КОРРЕКЦИЯ ПРЕПАРАТАМИ БЕТАВИТОНА 16.00.01 – диагностика болезней и терапия животных Автореферат
диссертации на соискание ученой степени
кандидата ветеринарных наук
Белгород 2009
Работа выполнена на кафедре диагностики болезней, терапии, акушерства и хирургии ФГОУ ВПО «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия» Научный руководитель – доктор ветеринарных наук, профессор
Яковлева Елена Григорьевна
Официальные оппоненты: Никулин Иван Алексеевич, доктор
ветеринарных наук, профессор;
Сноз Григорий Васильевич, доктор
ветеринарных наук, профессор. Ведущая организация – Курский научно-исследовательский институт
агропромышленного производства.
Защита состоится « » ________________ 2009 г.в______ часов на заседании диссертационного совета Д 220.004.01 при ФГОУ ВПО «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия» по адресу: 308503, Белгородская область, п. Майский, ул. Вавилова, д.1. /Тел./факс – (4722) 39-22-62.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО
«Белгородская государственная сельскохозяйственная академия»
Автореферат разослан « »______________2009 г.
Ученый секретарь
диссертационного совета Ю.Н. Литвинов 1. Общая характеристика работы
Актуальность темы. Производство сельскохозяйственной продукции не-возможно без стабильного развития животноводства и, прежде всего, скотоводства. Поэтому в последнее время в хозяйствах различных форм собственности уделяется большое внимание разведению высокопродуктивных пород крупного рогатого скота и особенно организации выращивания молодняка для ремонта стада (С.С. Абрамов, 1990; А.Г. Шахов, 1997, 2000, 2003; В.П. Буркат, 1998; В.И. Левченко, В.В. Сахнюк, О.В. Чуб с соавт., 2000).
Однако недостаток кормов и низкое их качество, несоблюдение научно обоснованной структуры рационов приводят к глубоким нарушениям в организме животного всех видов обмена веществ, что влечёт за собой ослабление естественной резистентности и снижение продуктивности. От таких животных снижается выход приплода, а выживший молодняк подвержен частым заболеваниям уже в первые недели жизни и нередко погибает.
Так, в 2002 году только незаразными болезнями переболели 5193,6 тыс. телят, что составило 78,6% к приплоду, пали 9,9%; из общего числа павшего крупного рогатого скота доля телят составила 98,2%, в т. ч. по причине желудочно-кишечных болезней – 53,6% (А.Г. Шахов, 2003).
По данным ветеринарных лабораторий дефицит жизненно важных веществ в организме чаще всего сопровождается скрытым нарушением обменных процессов. Типичные для дефицита того или иного нутриента симптомы не выражены. Диагноз заболевания на этой стадии можно поставить лишь специальными и, в частности, лабораторными методами исследования (В.С. Бузлама, 1990; С.П. Качанов, 1991; М.М. Колодько, 1995; С.П. Кулаченко, Э.С. Коган, 1997; М.Е. Павлов, 1997, 2001; Д. Майер, Д. Харви, 2007, и др.). К таким заболеваниям относятся А, С, Е-гиповитаминозы.
Методы диагностики и профилактики А, С и Е-гиповитаминозов у коров и телят до одномесячного возраста обстоятельно изучены и освещены в литературе (В.К. Назаров, 1957; Р.Ш. Кабиров, 1963; А.А. Душейко, 1975, 1989; И.Я. Конь, А.О. Натансон, 1980; Г.А. Щуревич, 1985; В.В. Сахнюк, 1996; М.Е. Павлов, 1997, 1998, 1999, 2000, 2001; В.И. Левченко, 1998; И.П. Кондрахин, 2000, и др.). Однако остаётся неясным ряд вопросов относительно доз и методов применения новых водорастворимых форм витаминов А и Е для телят. Кроме того, развитие полиморбидности внутренних патологий у животных (И.С. Дудко, В.И. Левченко, В.В. Сахнюк, 1986, 1997; И.П. Кондрахин, 1998; М.Е. Павлов, 1998, 1999, 2000) обусловливает необходимость разработки и применения композиционных препаратов, которые оказывают на организм разностороннее лечебное либо профилактическое влияние. К одному из таких препаратов относится водорастворимый препарат «Бетавитон», в составе которого содержится β каротин, витамины С и Е. В литературе имеются сведения по применению этого препарата с целью стимуляции роста, лечения и профилактики А-гиповитаминозов у птиц (О.В. Мерзленко, 1991; Л.В. Резниченко, В.Н. Позднякова, А.Р. Мерзленко, 1998, 2000), свиней (П.П. Антоненко, 1998; Р.А. Мерзленко, 2000), кроликов (Г.В. Васильченко, 2005). Были предприняты попытки использования его телятам при диспепсиях (А.И. Масяев, 2000) и в период перевода их на растительный корм (Р.В. Анисько, 2004). Некоторые исследователи считают, что β-каротин не всасывается в желудочно-кишечном тракте телят первых дней жизни (А.И. Свеженцов, 2002). В связи с изложенным представляет интерес изучить эффективность бетавитона при комплексном (А, С, Е) гиповитаминозе у телят.
Цель исследования – экспериментально обосновать возможность применения водорастворимых форм β-каротина и витамина Е в составе бетавитона для профилактики и лечения А, С, Е-гиповитаминозов у новорожденных телят.
Для достижения цели на разрешение были поставлены следующие задачи:
провести клинические исследования и выявить степень витаминной обеспеченности коров-матерей (в период их стельности) и полученных от них новорожденных телят;
изучить изменения клинического и гематологического статуса, показателей А, С, Е- витаминного обмена у телят в молозивный период;
сравнить показатели морфологического и биохимического состава крови, уровня естественной резистентности и витаминной обеспеченности у клинически здоровых телят и гипотрофиков;
определить влияние бетавитона на клинически здоровых телят и гипотрофиков;
дать сравнительную оценку витаминизирующего влияния бетавитона и его усовершенствованной для лечения полигиповитаминозов (А,С,Е) формы – бетавитона С.
Научная новизна работы. Впервые определена доступность и биотрансформация в витамин А β-каротина из водорастворимой формы у новорожденных клинически здоровых телят и гипотрофиков. Выявлен полиморбидный характер заболеваний новорожденных телят, при которых сочетаются А, С, Е-гиповитаминоз, гипопластическая анемия и гепатопатия. Клинико-лабораторным исследованием обоснован подход к профилактике и лечению А, С, Е-гиповитаминозов путем изменения соотношения компонентов в бетавитоне и предложен его новый вариант – бетавитон С, действие которого проверено на телятах. Установлен синергизм в биодоступности между аскорбиновой кислотой, с одной стороны, и витаминами А и Е – с другой.
Практическое значение результатов работы. Доказано, что определенное количество каротина, обнаруживаемое в сыворотке крови новорожденных телят, имеет низкое информативное значение для оценки состояния А-витаминного обмена, поэтому ранняя диагностика полигиповитаминоза А, С, Е возможна только путем определения содержания витаминов в сыворотке крови.
Обоснованы доза и способы применения комплексного водорастворимого препарата «Бетавитон» и его нового варианта «Бетавитона-С».
Результаты наблюдений, изложенные в диссертационной работе, использованы для составления временного регламента по применению препарата.
Апробация результатов исследования. Материалы исследования были представлены на следующих научных и научно-практических конференциях:
9-й межгосуд. межвуз. науч.-практич. конф. «Новые фармакологические средства в ветеринарии» (СПб, 1997);
междунар. координац. совещ. «Экологические проблемы патологии, фармакологии и терапии животных» (Воронеж, 1997);
2-5-й междунар. науч.-произв. конференциях «Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения» (Белгород, 1998, 1999, 2000, 2001);
междунар. науч. конф. «Проблеми зооiнженерii та ветеринарноi медицини» (Харькiв, 2001).
Основное содержание работы опубликовано в 8 статьях, в т.ч. в издании перечня ВАК, рекомендованного для публикации материалов диссертационных работ (Уч. записки Казан. госуд. акад. ветеринарной медицины, Казань, 2008).
Объем и структура рукописи. Диссертация изложена по стандартной схеме на 132 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 21 таблицей, 8 рисунками. Библиографический список включает 361 источник, в т.ч. 77 – на иностранных языках.
Основные положения, выносимые на защиту. Низкое содержание в кормах Cu, Zn и Co, легкопереваримых углеводов и каротина при избытке протеина и наличии в силосе масляной кислоты являются причиной полиморбидной патологии, выявляющейся у стельных коров.
Полиморбидная патология у коров сопровождается гипопротеинемией и альфа-глобулинемией, повышением в общем белке доли бета-глобулинов, снижением коллоидной устойчивости белков сыворотки и низким содержанием в крови витаминов А, С и Е.
Телята от полиморбидно-больных коров имели признаки гипотрофии, скрытые формы А,С,Е-гиповитаминоза и анемии, более низкие гематологические и иммунологические показатели.
Бетавитоном и особенно бетавитоном-С можно уже в первые 12 сут после рождения улучшать витаминную обеспеченность организма, корректировать низкие гематологические и иммунологические показатели, стимулировать прирост живой массы телят и профилактировать их желудочно-кишечные расстройства. Полученные результаты свидетельствуют о биологической доступности для новорожденных телят β-каротина из его водорастворимой лекарственной формы. 2. Материал и методы исследования
Работа выполнялась в течение 1998-2008 гг. на кафедре диагностики болезней, терапии, акушерства и хирургии Белгородской ГСХА с использованием животных, принадлежащих учхозу «Центральное», а также хозяйствам «Тихая Сосна», «Большевик», им. Ленина, «Красногвардейское», «Родина», «Восход» Красногвардейского района Белгородской области. Объектом исследований были коровы (49 гол.) и телята (230 гол.).
Рис. 1 - Схема и объем проведенных исследований
Для изучения эффективности бетавитона и бетавитона-С были сформированы опытные и контрольные группы телят. Телятам опытных групп препарат применяли в суточной дозе 5 мл на протяжении первых семи суток жизни. Контрольные группы телят витаминных препаратов не получали. Эффективность препарата оценивали по изменениям содержания витамина А, каротина, витаминов С и Е в сыворотке крови телят. Кровь для исследований брали перед началом опыта, на 6-е и 9-е сутки и через 7 суток после последнего введения препаратов.
В крови определяли: содержание гемоглобина – путём лизиса эритроцитов 0,04%-ным раствором аммиака с последующей колориметрией на ФЭК-2М (Б.И. Антонов, 1991; Е.Б. Бажибина, А.В. Коробов с соавт., 2004), число эритроцитов и лейкоцитов – на аппарате ГЦМК-3, СОЭ – по Панченкову, гематокритное число – унифицированным методом с помощью микроцентрифугирования. Лейкограмму выводили путём подсчёта популяций лейкоцитов в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимза (А.А. Кудрявцев, Л.А Кудрявцева, 1974). Рассчитывали также среднее содержание гемоглобина в одном эритроците (СГЭ) (Б.И. Антонов, 1991; Е.Б. Бажибина, А.В. Коробов с соавт., 2004).
В сыворотке крови учитывали: общий белок и его фракции (Лаб. методы исследования в клинике, 1987), альбумин-глобулиновое соотношение и глобулиновый индекс, коллоидную стойкость белков – по пробе Вельтмана (Лаб. методы исследования в клинике, 1987), содержание витаминов А – по О. Бессею в модификации В.И. Левченко с соавт. (1998), С – по Климову, Е – по Биеру, меди, цинка и железа – методом атомноабсорбционной фотометрии.
Фагоцитарную активность нейтрофилов крови определяли методом В. Ю. Чумаченко (1975), лизоцимную и бактерицидную активность сыворотки – по Ю. М. Маркову с соавт. (1974), сумму иммуноглобулинов – цинксульфатным методом (Лаб. методы исследования в клинике, 1987).
Обработка полученного цифрового материала проводилась на персональной ЭВМ с применением программы статистической обработки Н.Н. Григорова (1996). Достоверность разницы определялась по аргументу Стьюдента (td). Достоверной считали разницу между сравниваемыми величинами при p ≤0,05 (Г.Ф. Лакин, 1973). Экономическую эффективность по применению препарата «Бетавитон» рассчитывали по общепринятым методикам (Ветеринарное законодательство, 2002; И.Н. Никитин, 2006). 3. Результаты исследования
3.1. Врачебная оценка кормления и результаты клинико-лабораторного исследования стельных коров
Изучалось состояние обмена веществ у коров в последнюю треть их стельности и определялась его зависимость от условий кормления.
Установлено, что принятое в хозяйствах кормление коров рассчитано на годовую продуктивность 3000 кг молока при массе тела животных 500 кг и не отвечает особенностям их обмена веществ и потребностям. Рацион стельных сухостойных коров недостаточен по кормовым единицам, сухому веществу, крахмалу, сахару, сырой клетчатке, кальцию, фосфору, меди, цинку, марганцу, кобальту, каротину и витамину Е, хотя был перегружен протеином и обменной энергией. Сахаро-протеиновое отношение его составило 0,49, а отношение кальция к фосфору – 2:1. Кукурузный силос и сенаж из люцерны, которые входили в состав рациона, содержали соответственно 0,18+0,02 и 0,06+0,04% масляной кислоты.
У коров, находящихся на таком несбалансированном кормлении, визуально общее состояние было удовлетворительным, но при более глубоком клиническом исследовании выявлены латентно протекающие заболевания: миокардиодистрофия (8,2%), гипотония преджелудков (16,3%), гепатодистрофия (20,4%), ожирение (18,4%).
Лабораторными анализами установлено, что у 20,4% коров от числа обследованных нитропруссидные пробы Розера с мочой были положительны, что в сопоставлении с клиническими признаками подтверждает заболевание этих коров хроническим кетозом. В сыворотке крови обнаружены снижение общего белка и его фракции α-глобулинов, увеличение фракции β-глобулинов и укорочение коагуляционной ленты Вельтмана.
У всех коров, особенно у больных, был установлен низкий уровень в крови кобальта, марганца, меди и цинка. Так, в сравнении с минимальными показателями физиологической нормы в крови клинически здоровых коров кобальта содержалось меньше на 6,67, марганца – на 32,73, меди – на 5,55, цинка – на 3,40%, тогда как у больных коров эта разница составляла 49,33; 43,87; 21,15 и 11,57 %. 3.2. Динамика клинических и гематологических показателей в молозивный период у телят от клинически здоровых и больных коров
Масса тела телят, которые родились от больных коров, была ниже по сравнению с телятами от клинически здоровых матерей (рис.2).
Рис. 2 - Масса тела новорождённых телят, кг.
Первый столбец диаграммы – телята от здоровых коров, второй – от больных. Сосательный рефлекс проявлялся слабо. Подкожный жировой слой незначителен. Видимые слизистые оболочки бледные. Сердцебиение усилено, дыхание поверхностное. Температура тела в пределах общепринятых показателей нормы. Шестеро из этих телят на вторые-третьи сутки после рождения заболели диспепсией, которая сопровождалась угнетением общего состояния, частым выделением каловых масс, признаками обезвоживания, легким вздутием живота и болезненностью при его пальпации, периодическими коликоподобными проявлениями при нормальной температуре тела. Назначенное лечение по принятым в хозяйствах схемам обеспечивало выздоровление животных.
При анализе морфологических показателей крови телят выявлено, что у гипотрофиков 3-суточного возраста по сравнению с клинически здоровыми телятами число эритроцитов было ниже на 18,5% (p < 0,05), но уже на 6-е, 9-е и 12-е сут жизни это различие сглаживалось (5,2; 7,5 и 6,0%, p > 0,05).
Выведенная нами лейкограмма для клинически здоровых телят и гипотрофиков показывает, что у гипотрофиков доля нейтрофилов была снижена в 3 суточном возрасте на 8,6 (p < 0,01), в 6-суточном – на 13,7 (p < 0,001),в 9 суточном – на 13,4 (p < 0,01)%. Доля лимфоцитов оказалась повышенной на 9,9; 10,2; 12,9 и 8,4% соответственно (во всех случаях p < 0,01-0,001). Был снижен процент эозинофилов и моноцитов. Данные по гемоглобину отражены на диаграмме (рис.3).
Рис. 3 - Содержание гемоглобина в крови телят, мг/100 мл.
Обозначения: светлые столбцы диаграммы – у клинически здоровых телят,
темные – у гипотрофиков. Как видно на диаграмме, в первые 3 и 6 сут после рождения содержание в крови гемоглобина было выше у клинически здоровых телят, в последующие 9 и 12 сут наблюдалась обратная картина. Различия по содержанию в сыворотке крови общего белка и его фракций, каротина и витаминов А, С и Е представлены в табл.1.
Как видно из данных таблицы, на протяжении всего периода новорождённости содержание общего белка у гипотрофиков поддерживалось на более низком уровне (ниже на 6,0-12%, p < 0,001). Гипопротеинемия за весь период наблюдения не исчезала и даже несколько углублялась, тогда как разница в доле альбуминов в белке немного уменьшалась (с 21,4% до 16,4-18,0).
Доля α-глобулинов в белке была существенно выше. Изменения в содержании фракции γ-глобулинов были эпизодическими и не столь выраженными. Общая тенденция этих изменений – небольшое снижение доли γ-глобулинов в общем белке (на 2,5-15,1%), подтверждённое статистически только на 6-е сут жизни (на 15,1%, p < 0,01). |