Отчет о выполнении 1 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г. Исполнитель: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный университет им. Х. М. Бербекова»

Скачать 1.04 Mb.

Название	Отчет о выполнении 1 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г. Исполнитель: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный университет им. Х. М. Бербекова»
страница	11/18
Дата публикации	24.01.2015
Размер	1.04 Mb.
Тип	Отчет

100-bal.ru > Право > Отчет

1 ... 7 8 9 10 11 12 13 14 ... 18

4.11 Определение Т3

Принцип метода: «T₃ – ИФА» является одностадийным, конкурентным, твердофазным иммуноферментным методом. Тест разработан на основе высокоспецифических очищенных моноклональных антител к Т₃. Используемые образцы, калибровочные пробы и контрольную сыворотку инкубируют в одну стадию с шариками, полигаптеном (конъюгат Т₃ с белком) и конъюгатом моноклональных анти - Т₃антител с пероксидазой хрена. Во время инкубации анти – Т₃антитела связываются либо с Т₃ на шариках, либо с Т₃из образца калибровочной пробы или контрольной сыворотки. После промывки шарики инкубируют с рабочим раствором субстрата (тот же состав, что и при определении ТТГ). Развивающаяся голубая окраска находится в прямой зависимости от количества связанного анти - Т₃конъюганта пероксидазы (Sterling at all.,1977). Интенсивность окраски, образующейся в результате ферментативной реакции, оценивается при 450 нм и находится в обратной зависимости от концентрации Т₃ в образце.

4.12 Определение Т4

Принцип метода: «Т₄– ИФА» является одностадийным, конкурентным, твердофазным иммуноферментным методом, с помощью которого определяют как связанную, так и свободную формы тироксина. Исследуемые образцы, калибровочные пробы и контрольную сыворотку инкубируют в одну стадию с шариками, покрытыми ковалентно связанными с белком-носителем Т₄ и конъюгантом моноклональных мышиных анти -Т₄ антител с пероксидазой хрена. Во время инкубации вещества, содержащиеся в диссоциирующем буфере, высвобождают связанный Т₄, который конкурирует с иммобилизированным на шарике определенным количеством Т₄ за связывание с ограниченным количеством анти - Т₄антител конъюганта. После промывки шарики инкубируют с рабочим раствором субстрата. Развивающаяся окраска находится в прямой зависимости от количества связанного анти - Т₄ конъюганта пероксидазы. Интенсивность окраски оценивается при 450 нм и находится в обратной зависимости от концентрации Т₄ в образце (Sterlingk at all. 1971г.).

Поскольку определяемые прибором концентрации лежат в интервале от 0 до 300 нг, а в образцах концентрация гораздо больше, анализ проводили при 10 кратном разбавлении образца с последующим пересчетом.

4.13 Определение концентрации гемоглобина

Гемоглобинцианидный метод с применением ацетонциангидрина. Принцип метода. Гемоглобин при взаимодействии с железосинеродистым калием (красная кровяная соль) окисляется в метгемоглобин (гемоглобин), образующий с ацетонцеангидрином окрашенный цианметгемоглабин (гемоглобинцианит), интенсивность окраски которого пропорционально концентрации гемоглобина.

Методика. Оптическую плотность опытной пробы после 10 минутного стояния измеряют, сравнивая с холостой пробой на медицинском колориметре при длине волны 500-560 нм (зеленый светофильтр) в кювете с толщиной слоя 1 см.

Холостая проба трансформирующий раствор или вода. Оптическую плотность стандартного раствора измеряют при тех же условиях, что и опытную пробу. Содержание гемоглобина рассчитывают по калибровочному графику, построенному на основании стандартного раствора гемоглобинцианида, или по формуле:

НЬ (г%) = Еоп/Ест СК 0,001

где Eon - экстинкция опытной пробы;

Ест - экстинкция стандартного раствора;

С - концентрация гемоглобина в стандартном растворе (мг%);

К - коэффициент разведения крови ;

0,001 - коэффициент для пересчета миллиграмм-процентов в грамм проценты.

Для перевода концентрации гемоглобина в единице системы СИ (ммоль/л) содержание гемоглобина в грамм процентах умножают на 0,6206.

4.14 Определения количества эритроцитов

Принцип метода. Подсчет эритроцитов в 1 мкл крови при постоянном её разведении и определенном объеме счетной камеры.

Методика. Счетная камера и специальное шлифованное покровное стекло должны быть сухими и чистыми. Шлифованное стекло притирают к камере таким образом, чтобы появились радужные кольца (только при этом условии будут соблюдены необходимая высота и объём камеры). Перед заполнением счетной камеры содержимое пробирки несколько раз перемешивают, затем концом круглой стеклянной палочки берут из пробирки, наклоняя её, каплю крови и поднося к краю шлифованного стекла камеры. Если для заполнения камеры одной капли крови недостаточно, добавляют ещё одну каплю.

После заполнения камеру оставляют на 1 минуту в состоянии покоя для оседания форменных элементов. Затем подсчитывают эритроциты при малом увеличении микроскопа (объектив- 8Х, окуляр- 10Х или 15Х) в затемнённом поле зрения (с прикрытой диафрагмой или при опущенном конденсоре) в 5 больших квадратах (расчерченных на 16 малых), расположенных по диагонали.

По правилам, подсчитывать следует эритроциты, лежащие внутри маленького квадрата, а также находящиеся на левой и верхней его линиях. Эритроциты расположенные на правой и нижней линиях квадрата не учитывают.

Расчет количества эритроцитов в 1 мкл крови определяют по следующей формуле:

Х= а × 4000 × 200/80

Где Х- количество эритроцитов в 1 мкл;

а - количество эритроцитов в 80 малых квадратов;

80 - количество сосчитанных малых квадратов (5 16=80);

200 - степень разведения крови;

4000 - множитель, приводящий результат к объему 1 мкл крови, так как объём малого квадрата- 1/4000 мкл.

Практически количество эритроцитов, подсчитанное в 80 малых квадратах умножают на 10 000.

Для пересчета числа эритроцитов в единице системы СИ-Т (тэра) в 1л.- полученную цифру нужно умножить на 106.

1 ... 7 8 9 10 11 12 13 14 ... 18

Похожие:

	Отчет о выполнении 1 этапа Государственного контракта № п 716 от... Исполнитель: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный...		Отчет о выполнении 1 этапа Государственного контракта № П1084 от... Исполнитель: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный...
	Отчет о выполнении 1 этапа Государственного контракта № П869 от 18... Исполнитель: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный...		Отчет о выполнении 1 этапа Государственного контракта № П1676 от... Исполнитель: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный...
	Отчет о выполнении 1 этапа Государственного контракта №14. 740. 11.... Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный университет...		Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П782 от 24... Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный университет...
	Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П371 от 07... Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный университет...		Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта №16. 740. 11.... Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный университет...
	Отчет о выполнении 4 этапа Государственного контракта №14. 740. 11.... О выполнении 4 этапа Государственного контракта №14. 740. 11. 1071 от 24. 05. 2011 г		Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта №14. 740. 11.... «Московский государственный университет экономики, статистики и информатики (мэси)»
	Отчет о проделанной работе Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный...		Программа (мероприятие): Федеральная целевая программа «Научные и... Исполнитель: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Кабардино-Балкарский государственный...
	Программа (мероприятие): Федеральная целевая программа «Научные и... Исполнитель: федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский...		Отчет о выполнении 1 этапа Государственного контракта №16. 740. 11.... Программа (мероприятие): Федеральная целевая программа «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013...
	Отчет по исполнению I этапа Государственного контракта №05. 043.... Исполнитель (Поставщик): Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования города Москвы...		Отчет по исполнению I этапа Государственного контракта №05. 043.... Исполнитель (Поставщик): Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования города Москвы...

Школьные материалы