Отчет о выполнении 1 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г. Исполнитель: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный университет им. Х. М. Бербекова»

Скачать 1.04 Mb.

Название	Отчет о выполнении 1 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г. Исполнитель: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный университет им. Х. М. Бербекова»
страница	8/18
Дата публикации	24.01.2015
Размер	1.04 Mb.
Тип	Отчет

100-bal.ru > Право > Отчет

1 ... 4 5 6 7 8 9 10 11 ... 18

4.3 Методы окраски тканевых структур гематоксилином и эозином

Для определения влияния различных концентраций молибдена на гистоструктуру тонкого кишечника, поджелудочной железы и печени использовали метод окраски тканевых структур гематоксилином и эозином. Кусочки органов маркировали и фиксировали в 10%-ном нейтральном формалине в течение 12 часов. Затем промывали проточной водой в течение 20 часов, обезвоживали в спиртах нарастающей концентрации и заливали в парафин.

Срезы готовили санным микротомом типа МС-2 толщиной 5 мкм. Окраску срезов проводили кислым гематоксилином по Эрлиху и эозином по общепринятой методике (Лилли, 1969). Этот метод самый распространенный в гистологической практике, так как благодаря удачному сочетанию красителей позволяет получить общее представление о состоянии исследуемых органов и тканей.

4.4 Методы исследования функциональной активности тонкого кишечника по Уголеву

При изучении сорбционной способности слизистой тонкого кишечника, ферментативной активности амилазы поджелудочной железы и состояния пристеночного пищеварения при действии применяемых в опытах доз молибдена была использована вытяжка из свежей ткани поджелудочной железы. Для ее приготовления сначала готовили гомогенат из кусочков железы весом 1 г (у крыс), 0,5 г (у мышей) и соскоба 12-перстной кишки. Гомогенат разбавляли бикарбонатным буфером, содержащим 0,85% поваренной соли (рН=7,5), в соотношении 1:5. Фильтровали через четыре слоя марли и фильтрат использовали вместо поджелудочного сока. Для контрольных опытов вытяжку инактивировали путем кипячения.

Опыты по изучению влияния молибдена на «полостное» и «пристеночное» пищеварение проводились по общепринятой методике А.М. Уголева (1960 а, б) с использованием «живой» кишки и ТХУ-модели. Для этого кусочки тонкой кишки многократно промывали охлажденным до 3 5°С физиологическим раствором, выворачивали и фиксировали лигатурами на стеклянной палочке и сразу же использовали для исследования «пристеночного» пищеварения в качестве «живой» кишки. Для изготовления ТХУ-моделей часть промытого кишечника опускали в 10% раствор ТХУ на 1,5 2 часа. Обработанную кишку в течение 2 суток отмывали в многократно меняемом растворе Рингера, разрезали на кусочки 1 см² и использовали в опытах для изучения сорбционной способности слизистой тонкого кишечника. В качестве субстрата в экспериментах использовали 1% раствор крахмала на растворе Рингера (рН=7,5). Условия в пробирке максимально приближены условиям in vivo.

Были поставлены 4 серии опытов по 25 проб в каждой.

Первая серия — контрольная. К 5 мл 1% раствора крахмала добавляли 2 мл инактивированной (кипяченой) вытяжки.

Вторая серия имитировала полостное пищеварение. К 5 мл раствора крахмала добавляли 2 мл свежей вытяжки.

В третьей серии изучали влияние «живой» кишки на гидролиз крахмала in vitro. К 5 мл раствора крахмала добавляли 2 мл свежей вытяжки и кусочек тонкой кишки.

В четвертой серии изучали сорбционные свойства слизистой тонкого кишечника. К 5 мл раствора крахмала добавляли 2 мл свежей вытяжки и кусочек ТХУ-модели кишки.

Все пробы одновременно инкубировали в течение 40 минут при температуре 38°С. Затем удаляли кусочки кишечника из пробирок третьей и четвертой серии и центрифугировали при 5000 об/мин в течение 5 10 мин. (пока центрифугат не получался совершенно прозрачным). О степени гидролиза крахмала судили по количеству глюкозы в пробах, которое определялось поляриметрическим методом с помощью поляриметра П-161. Методика основана на том, что глюкоза в растворе вращает плоскость поляризации света вправо. При этом угол вращения плоскости поляризации пропорционален содержанию глюкозы в растворе (Л.В. Козловская, 1975).

Для анализа прозрачный центрифугат наливали в трубку поляриметра длиной 18,94 см, накрывали шлифованным стеклом, плотно завинчивали и помещали в аппарат. По интенсивности затемнения правой половины поля зрения поляриметра определяли угол отклонения поляризованного луча, что выражается в градусах шкалы прибора. Угол отклонения в 1° соответствует 1% глюкозы. Этим способом удобно определить большие концентрации глюкозы в растворе.

1 ... 4 5 6 7 8 9 10 11 ... 18

Похожие:

	Отчет о выполнении 1 этапа Государственного контракта № п 716 от... Исполнитель: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный...		Отчет о выполнении 1 этапа Государственного контракта № П1084 от... Исполнитель: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный...
	Отчет о выполнении 1 этапа Государственного контракта № П869 от 18... Исполнитель: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный...		Отчет о выполнении 1 этапа Государственного контракта № П1676 от... Исполнитель: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный...
	Отчет о выполнении 1 этапа Государственного контракта №14. 740. 11.... Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный университет...		Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П782 от 24... Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный университет...
	Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П371 от 07... Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный университет...		Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта №16. 740. 11.... Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный университет...
	Отчет о выполнении 4 этапа Государственного контракта №14. 740. 11.... О выполнении 4 этапа Государственного контракта №14. 740. 11. 1071 от 24. 05. 2011 г		Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта №14. 740. 11.... «Московский государственный университет экономики, статистики и информатики (мэси)»
	Отчет о проделанной работе Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский государственный...		Программа (мероприятие): Федеральная целевая программа «Научные и... Исполнитель: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Кабардино-Балкарский государственный...
	Программа (мероприятие): Федеральная целевая программа «Научные и... Исполнитель: федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кабардино-Балкарский...		Отчет о выполнении 1 этапа Государственного контракта №16. 740. 11.... Программа (мероприятие): Федеральная целевая программа «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013...
	Отчет по исполнению I этапа Государственного контракта №05. 043.... Исполнитель (Поставщик): Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования города Москвы...		Отчет по исполнению I этапа Государственного контракта №05. 043.... Исполнитель (Поставщик): Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования города Москвы...

Школьные материалы