Биодеструкция зубных протезов из полимерных материалов (экспериментальное исследование) 14. 01. 14 Стоматология

Рис.4. Ультратонкие срезы Staphylococcus aureus: а – контрольный препарат, б – после инкубации с «Денталур», частицы пластмассы в области расслоения клеточной стенки, в – частицы пластмассы на поверхности клеточной стенки и внутри цитоплазмы. При биодеструкции, обусловленной синегнойной палочкой, характерным являлось образование большого числа разных размеров частиц в виде отдельных крошек и их скоплений. При большем увеличении скопления крошек представляли собой конгломераты из частиц пластмассы и биопленки (Рис. 5 а, б). Кроме этого, на гладкой поверхности в участках, прилежащих к краю образцов «Денталур», «Фторакс» и «Пластмасса бесцветная», появлялся своеобразный рельеф в виде гребней, расположенных в форме «звездочек» (Рис. 5 в). В области гребневидных дефектов поверхности происходило образование углублений, трещин, фенестрация поверхности и десквамация частиц пластмассы. (Рис. 5 г). б а в г Рис. 5. Биодеструкция базисных пластмасс под действием Pseudomonas aeruginosa: а,б - образование «крошек» на поверхности пластмассы (а- х60), (б - х5000), в – образование «звездочек» (х500), г – углубления, трещины, фенестрация поверхности (х14000). Следует также отметить появление на поверхности дефектов в виде царапин. При большем увеличении царапины представляли собой участки слущивания материала пластмасс в виде тонких пластин, причем образовавшаяся поверхность после слущивания выглядела как поверхность скола в контрольных препаратах, то есть была практически гладкой. На поздних сроках инкубации во всех исследованных образцах пластмассовых зубных протезов выявлялись ярко выраженные дефекты поверхностей: трещины на периферии образцов, образование обширных участков слущивания в виде пластин и, вследствие этого, формирование практически идеально гладкой поверхности, глубокие дефекты в виде борозд с большим количеством слущенных частиц и фрагментами биопленки (Рис. 6 а,б,в,г,д,е). а в б г д е Рис. 6. Образование различных дефектов на поверхности базисных пластмасс после инкубации с микроорганизмами: а – дефекты поверхности в виде царапин (х500); б – большее увеличение (х8000) – видно слущивание пластинок пластмассы; в - фрагменты практически идеально гладкой поверхности после слущивания частиц пластмассы (х8000); г – глубокие борозды (х5000); д, е – глубокие трещины и сколы частиц по периферии образца с фрагментами биопленки (д – х3000, е – х8000). Исследование осадка культур бактерий, инкубированных с базисными пластмассами, показало наличие в биомассе бактерий наличие слущенных с поверхности пластмасс частиц (Рис.7а,б). а б Рис.7. Наличие слущенных с поверхности пластмасс частиц - интеграция частиц полиуретана в биомассу стафилококков. а – х8000, б - х50000. После инкубации полиуретановой пластмассы «Денталур» и полиметилметакрилатных пластмасс («Фторакс» и «Пластмасса Бесцветная») с Enterococcus faecium повреждений поверхности, аналогичных тем, что были выявлены на поверхности этих пластмасс при взаимодействии со стафилококками и синегнойной палочкой, обнаружено не было. При взаимодействии всех изученных пластмасс с Candida albicans разрушение материалов происходило уже на стадии адгезии к поверхности единичных хламидоспор или их скоплений. В местах контакта с поверхностью пластмассы были выявлены трещины и углубления (Рис.8). На поверхности материалов формировались мелкие округлые частицы, которые можно рассматривать как результат взаимодействия гриба с пластмассами. Эти же частицы обнаруживались на хламидоспорах, псевдогифах и псевдомицелии. Как результат этих процессов на поверхности пластмассы образовывалось множество углублений, по размерам сопоставимых с описанными выше частицами (Рис.8г). При росте гриба частицы пластмассы «отрывались» псевдогифами от поверхности, при этом формировался глубокий дефект в виде эрозии (Рис.8д). В мицелии обнаруживалось большое количество частиц пластмасс (рис.8е,ж). В осадке культуры Candida albicans, полученном после инкубации с образцами пластмасс в течение 1,5 мес. обнаруживались конгломераты, состоящие из псевдогифов, бластоспор и хламидоспор с включениями крупных частиц пластмасс (Рис.9). б а в г е д ж Рис. 8. Изменение поверхности «Денталур» при колонизации Candida albicans: а– единичная хламидоспора (24 час инкубации) (х40000); б– скопление хламидоспор с частицами на их поверхности. Образование дефектов в поверхности (7 дней инкубации) (х8000); в - хламидоспоры и псевдогифы (х10000); г – множество мелких частиц пластмассы (1,5 мес инкубации) (х20000); д - отрыв частицы пластмассы от образца пседогифами (1,5 мес инкубации) (1000); е,ж– частицы пластмассы в псевдомицелии гриба (1,5 мес инкубации) (е – х40000, ж – 20000). б а Рис. 9. Препарат осадка культуры Candida albicans после 1,5 мес инкубации с образцами пластмасс: а - «Денталур» (х8000) и б - «Фторакс» (х12000) Включения крупных частиц пластмассы ↑ в массу хламидоспор. В контрольных образцах полиуретана после резки ионным пучком поверхность среза была гладкой (Рис. 10а), в то время как в опытных образцах, на поверхности которых была сформирована биопленка (1,5 мес инкубации со стафилококками), рельеф периферийного участка среза приобретал зубчатый профиль, а поверхность среза выглядела как «кружево», и толщина этого слоя составляла примерно 2- 5 мкм. (Рис. 10 б,в). а б в Рис.10. Поверхность контрольного препарата «Денталур». а - гладкая поверхность среза (х12000); б, в - образцы «Денталур», инкубированные со стафилококком в течение 1,5мес. Подповерхностные изменения в виде «кружева» (б- х16000, в- х12000). В контрольных препаратах всех изученных базисных пластмасс влияния LB-бульона и фиксирующих растворов на структуру поверхностей выявлено не было. Анализ площади биобрастания образцов изученных пластмасс при инкубации с культурами стафилококка, синегнойной палочки показал отсутствие существенной разницы по этому показателю (Рис.,11,12,13,14,15). Исходя из полученных данных, можно говорить о том, что оптимальный период профилактики биобрастания, сопровождающегося разрушением базисных пластмасс, находится в интервале от 48 часов до 14 суток до формирования зрелых биопленок. Таким образом, этот метод оценки биобрастания зубопротезных материалов может быть использован для скрининга новых материалов, устойчивых к биообрастанию и оценки действия различных способов эрадикации микроорганизмов с поверхности искусственных зубопротезных материалов. Рис.11. Динамика обрастания биоплёнкой Staphylococcus aureus поверхностей базисных пластмасс. Рис.12.Динамика обрастания биоплёнкой Pseudomonas aeruginosa поверхностей базисных пластмасс. Рис.13. Динамика обрастания биоплёнкой гладкой поверхности образцов базисной пластмассы "Фторакс" микроорганизмами. Рис.14. Динамика обрастания биоплёнкой гладкой поверхности образцов базисной пластмассы "Денталур" микроорганизмами. Рис.15. Динамика обрастания биоплёнкой гладкой поверхности образцов "Пластмасса бесцветная". Было показано, что обработка образцов съемных пластмассовых зубных протезов ультразвуком в водной среде является эффективным способом борьбы с микроорганизмами, колонизирующими их поверхность, поскольку удаляет адгезированные микроорганизмы и биопленки (Рис.16). б а в г е д Рис. 16. Эффективность профилактики биодеструкции зубных протезов из полиуретана «Денталур»: а - поверхность «Денталур» после инкубации со St. аureus (1,5 мес) (х100); б – после обработки ультразвуком в течение 3 мин (х20000); в - обрастание биопленкой (Ps. aerugenosa) поверхности «Денталур» (1,5 мес) (х8000); г - после обработки ультразвуком в течение 3 мин (х20000); д - колонизация и формирование биопленки Candida albicans (1,5 мес) на поверхности «Денталур» (х4000); е - после обработки ультразвуком в течение 3 мин (х2000). Выводы Современными методами электронной микроскопии в эксперименте убедительно доказано явление биодеструкции образцов съемных зубных протезов из пластмасс: «Денталур», «Фторакс», «Пластмасса бесцветная» под действием микроорганизмов полости рта (Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans). Динамика колонизации образцов базисных зубных протезов на ранних сроках максимальна для грибов Candida albicans, минимальна для Enterococcus faecium. Степень микробного обрастания образцов съемных зубных протезов к 1,5 мес инкубации практически одинакова у Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa и гриба Candida albicans. Enterococcus faecium на этом сроке инкубации выявляется на поверхности образцов в виде единичных микроколоний. Степень деструкции поверхности полированных образцов базисов пластмассовых зубных протезов зависит от срока инкубации, вида микроорганизма, химической природы базисной пластмассы. Данные о внутреннем строении образцов базисных пластмасс, полученные с помощью резки ионным пучком в сканирующем электронном микроскопе Quanta 200 3D – свидетельствуют о распространении биодеструкции с поверхности материала вглубь - в подповерхностный слой. Очаги персистенции микроорганизмов локализуются в дефектах поверхности (трещинах и кавернах) образцов базисов зубных протезов, а десквамированные частицы полимера с локализованными на них биоплёнками могут приводить к диссеминации инфекционных агентов. Применение сканирующего электронного микроскопа Quanta 200 3D в комплексе с трансмиссионным электронным микроскопом Jeol 100B позволило выявить поглощение десквамационных частиц базисных пластмасс Staphylococcus aureus. Установлено, что применение ультразвуковой очистки образцов базисов зубных протезов является эффективным способом профилактики колонизации их микроорганизмами и, соответственно, их биодеструкции.

Похожие:

	Экспериментальное обоснование применения временныхнесъемных зубных... Для общества вопрос о знании этих социальных институтов и умении направлять их развитие имеет первостепенное значение уже потому,...		Сныткин Владислав Анатольевич Обоснование применения пластиночных... Ена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Московский государственный медико-стоматологический...
	Российской Федерации Государственное бюджетное образовательное учреждение... Ортопедическое лечение дефектов твердых тканей зубов и зубных рядов несъемными конструкциями зубных протезов		Характеристика и свойства конструкционных полимерных материалов Наверно, каждая хозяйка мечтает обставить комнаты красивой, прак­тичной мебелью. Но мало кто знает, при помощи каких материалов она...
	Клинико-экспериментальное применение зубных эликсиров для лечения... Российской Федерации от 17. 12. 2012 №1069н «Об утверждении случаев, в которых возможна сдача крови и (или) ее компонентов за плату,...		Методические указания по выполнению реферата по дисциплине "процессы... Методические указания предназначены в помощь студентам при выполнении реферата по дисциплине "Процессы соединения, сборки и ремонта...
	Клинико-организационные аспекты использования цельнокерамических... Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Московский государственный...		Методические указания по выполнению рефератов по дисциплине "Механика... Методические указания предназначены в помощь студентам при выполнении рефератов по дисциплине "Механика деформирования и разрушения...
	Методические указания по выполнению рефератов по дисциплине "Механика... Методические указания предназначены в помощь студентам при выполнении рефератов по дисциплине "Механика деформирования и разрушения...		Совершенствование методов диагностики и эндодонтического лечения... Методические рекомендации предназначены для медицинских работников, оказывающих первичную медико-санитарную помощь: врачей стоматологического...
	Методические указания по выполнению рефератов по дисциплине "Физика... Методические указания предназначены в помощь студентам при выполнении рефератов по дисциплине "Физика и химия процессов получения...		Рабочая учебная программа дисциплины протезирование зубных рядов Фгос впо по направлению подготовки (специальности) 060201- стоматология, утвержденному приказом №16 Министерства образования и науки...
	Разработка полимерного низкочастотного виброизолятора с квазинулевой жесткостью Проведено аналитическое исследование разрабатываемого виброизолятора, его изготовление и экспериментальное исследование. Частота...		Содержание Тюленёва А. Н., Осипенко М. А., Няшин Ю. И. экспериментальное и теоретическое исследование процесса иммобилизации микроорганизмов...
	Исследовательская работа Автор работы Экспериментальное исследование, направленное на определение оптимального конструктора веб-сайта в школьных условиях		Синергетическая модель концепта «жизнь»: экспериментальное исследование Работа выполнена на кафедре английского языка Тверского государственного университета