Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России»

. Подгруппа больных с одонтогенными околочелюстными флегмонами. Больные с одонтогенными околочелюстными флегмонами были подразделены в свою очередь на подгруппы в зависимости от глубины поражения мягких тканей: флегмоны одного клетчаточного пространства, двух клетчаточных пространств, трех и более клетчаточных пространств. В зависимости от распространенности гнойно-воспалительного процесса изменялась интенсивность радикалообразования. Впервые сутки наблюдения фагоциты больных продуцировали внеклеточно превышающие норму количества супероксидноганиона-радикала и оксида азота (рисунок 3). Таблица 37 -Радикалообразующая способность нейтрофилов больных с одонтогенными околочелюстными флегмонами в динамике инфекционного процесса (x±m). Нейтрофилы периферической крови Число боль -ных Восстановление цитохрома с, нМ\мин Концентрация нитратов\нитритов в 1мл плазмы, (мкМ) 1* 2 5 7 14 1* 2 5 7 14 Флегмоны 1 клетчаточно-го пространств 32 7,5± 0,21 6,5±0,11,3 5,8± 0,31,,3 4,2±0,21,3 2,5± 0,42,3 60,0±2,21 51,0±6,21 49,0±5,51 25,0±3,01,3 16,0±3,52,4 Флегмоны 2 клетчаточных пространств 15 8,3± 0,21 7,5±0,51,4 6,7± 0,31 5,0±0,41,3 3,0± 0,21,3 78,±3,01 68,±3,01,3 70,±1,21 40,±5,51,3 20,±2,21,3 Флегмоны 3 и более клетчаточных пространств 9 9,0± 0,51 8,7±0,21 7,3±0,21,3 6,4±0,31 4,5± 0,21,4 85,0±0,51 75,0±2,51,2 60,0±0,21,4 37,0±6,01,3 27,0±4,21 Здоровые доноры 30 1,3 ±0,5 - - - - 10 ±2,5 - - - - *- дни пребывания в стационаре 1-p<0,01, 2- p<0,05 – относительно показателей здоровых доноров 3- p<0,01, 4- p<0,05 – относительно показателей предыдущего периода измерения (сутки). В группе больных с флегмонами с распространенностью гнойно-воспалительного процесса на 3 и более клетчаточных пространства количество супероксид аниона, продуцируемого нейтрофилами и количество нитрат\нитритов в плазме достоверно превосходило таковые значения у больных с флегмонами с распространенностью гнойно-воспалительного процесса на 1 и 2 клетчаточных пространства (р<0,01) (таблица 37). Из полученных данных мы заключили, что в активной фазе гнойно-воспалительного процесса происходит мощный выброс свободных радикалов кислорода и азота, которые могут инактивировать и уничтожать микроорганизмы во внеклеточном пространстве. При этом смещается равновесие вне\внутриклеточная продукция микробицидных радикалов в сторону внеклеточного процесса. В результате образующегося внутриклеточного дефицита радикалов страдает завершенность фагоцитоза и создаются условия для длительной персистенции бактерий внутри фагоцитов. Дисбаланс между вне- и внутриклеточным пулами радикалов более выражен при флегмонах 2 и 3 клетчаточных пространств, что сказывается на активности и эффективности функционирования всей системы неспецифической защиты организма. Рисунок 4 - Внутриклеточная продукция активных форм кислорода нейтрофилами больных с одонтогенными околочелюстными флегмонами в динамике инфекционного процесса, (Rin\RΣ, (%)). Для выявления соотношения в системе «прооксиданты-антиоксиданты», отражающего в конечном итоге степень окислительного стресса и состояние защитных сил организма, исследовали уровень антиоксидантных ферментов лейкоцитов и антиокислительную емкость плазмы крови больных. У пациентов всех подгрупп при поступлении в стационар и после проведения оперативного вмешательства выявлено статистически достоверное увеличение активности каталазы, супероксид дисмутазы (антиоксидантные ферменты), также увеличена антиоксидантная емкость плазмы (таблица 38). Таблица 38 - Показатели антиоксидантной системы у больных с одонтогенными околочелюстными флегмонами (x±m). Показатель Группа больных* Сутки пребывания в стационаре Конт-роль 1 2 5 7 14 Каталаза, ед\г мин 1 2 3 4,5±0,11 4,8±0,11 4,9±0,21 3,5±0,1 3,0±0,11,2 2,8±0,11,2 3,4±0,2 2,9±0,21 2,9±0,11 3,2±0,4 3,0±0,21 3,0±0,11 3,4±0,3 3,5±0,4 3,0±0,11 3,5±0,2 СОД, ед в мг белка 1 2 3 2,5±0,21 2,5±0,31 2,9±0,11 1,0±0,1 0,8±0,21,2 0,7±0,11,2 1,2±0,1 1,0±0,2 0,8±0,11 1,2±0,2 1,0±0,1 0,8±0,11 1,3±0,1 1,2±0,1 0,9±0,11 1,2±0,1 Антиоксидантная активность плазмы, % 1 2 3 60±1,0 64±2,01 67,0±1,51 55±1,5 51±2,01,2 48,5±1,51,2 57±2,0 56±1,02 50,0±1,01 54±2,0 55±1,5 52,0±1,01 57±1,5 57±1,0 55,0±0,51 58,0± 1,5 -1 группа больных с флегмонами 1 клетчаточного пространства; -2 группа больных с флегмонами 2 клетчаточного пространства; 3 группа больных с флегмонами 3 и более клетчаточных пространств 1-p<0,01 – относительно показателей здоровых доноров 2- p<0,05 – относительно показателей предыдущего периода измерения (сутки). У больных с флегмонами одного клетчаточного пространства уже на 2 сутки происходила нормализация всех измеряемых показателей антиоксидантной системы. У больных с флегмонами двух, трех и более клетчаточных пространств, несмотря на интенсивно начатое лечение, на вторые сутки активность обоих ферментов и антиоксидантная емкость плазмы резко падали ниже нормального уровня (p<0,01). Затем в группе больных с флегмонами с поражением двух клетчаточных пространств на десятые–четырнадцатые сутки происходила постепенная нормализация всех измеряемых антиоксидантных параметров. В группе больных с поражением трех и более клетчаточных пространств нормализации активности антиоксидантной системы перед выпиской не происходит, хотя отмечается положительная динамика всех показателей (таблица 38). Таким образом, свободно-радикальный статус фагоцитов больных с флегмонами челюстно-лицевой области характеризуется, во-первых, выраженным дефицитом внутриклеточных радикалов, что приводит к неэффективному внутриклеточному киллингу патогенов и, во-вторых, дисбалансом в системе «прооксиданты-антиоксиданты», проявляющимся в сниженном уровне защитных ферментов, наиболее выраженным на 2-5 сутки у больных с флегмонами двух и более клетчаточных пространств. К моменту выписки больных из стационара основные параметры радикал-формирующей способности нейтрофилов остаются повышенными вне зависимости от подгруппы больных. Наиболее угнетены были фагоцитарные и антиоксидантные показатели у больных с трех и более клетчаточными флегмонами, что необходимо учитывать при лечении больных этой подгруппы. Подгруппа больных с ягодичными абсцессами. У больных с ягодичными абсцессами в остром периоде заболевания оба показателя радикало-формирующей способности нейтрофилов поднимаются выше нормы в острый период (p<0,05) (таблица 39). Таблица 39 - Радикалообразующая способность нейтрофилов больных с ягодичными абсцессами в динамике инфекционного процесса (x±m). Нейтрофилы периферической крови Число пациентов Восстановление цитохрома с, (нМ\мин) Концентрация нитратов и нитритов в 1 мл плазмы, (мкМ) 1* 2 5 7 1 2 5 7 Больные с ягодичными абсцессами 16 4,2 ±0,51 3,0 ±0,31,2 1,5 ±0,22 1,2 ±0,5 45,0 ±10,51 32,0 ±8,51 25,0 ±4,51 14,0 ±5,5 Здоровые доноры 30 1,3 ±0,5 - - - 10,0 ±2,5 - - - *- дни пребывания в стационаре 1-p<0,01 – относительно показателей здоровых доноров 2- p<0,05 – относительно показателей предыдущего периода измерения (сутки). Рисунок 5 - Внутриклеточная продукция активных форм кислорода нейтрофилами больных с хирургическими инфекциями мягких тканей, (Rin\RΣ, (%)). К пятому и особенно к седьмому дню количество супероксидных радикалов понижается и сравнивается с показателями здоровых доноров (р<0,05). Динамика изменений плазменной концентрации нитратов/нитритов совпадает с изменением уровня супероксид аниона в разные периоды инфекционного заболевания. Количество нитратов/нитритов перед выпиской больного из стационара также близко к показателям доноров (таблица 39). Таблица 40 - Показатели активности антиоксидантных ферментов у больных с ягодичными абсцессами в динамике инфекционного процесса, (x±m). Группа Число пациентов Каталаза, ед\г мин СОД, ед\г белка 1 2 5 7 1 2 5 7 Больные с ягодичными абсцессами 16 3,9 ±0,5 3,6 ±0,3 3,5 ±0,4 3,4 ±0,2 1,3 ±0,1 1,2 ±0,2 1,2 ±0,2 1,3 ±0,1 Здоровые доноры 30 3,5 ±0,5 - - - 1,2 ±0,1 - - - 1-p<0,01 – относительно показателей здоровых доноров, 2- p<0,05 – относительно показателей предыдущего периода измерения (сутки). Таблица 41 - Антиоксидантная емкость плазмы крови больных с ягодичными абсцессами в динамике инфекционного процесса (x±m). Группа Число пациентов Антиоксидантная емкость плазмы,% 1* 2 5 7 Больные с ягодичными абсцессами 16 62,0±2,5 56,5±1,5 2 57,0±1,0 57,0±2,5 Здоровые доноры 30 58,0±1,5 - - - * - дни пребывания в стационаре 1-p<0,01 – относительно показателей здоровых доноров 2- p<0,05 – относительно показателей предыдущего периода измерения (сутки). При исследовании внутриклеточной концентрации кислородных радикалов обнаружено, что и в группе больных с ягодичными абсцессами доля внутриклеточных радикалов снижена в нейтрофилах больных по сравнению со здоровыми. Особенно заметен спад генерации внутриклеточных радикалов в течение первых двух дней пребывания больных в стационаре (период разгара воспалительного процесса). К седьмым суткам доля внутриклеточных АФК нормализуется (рисунок 5). Параметры активности антиоксидантной системы в первые сутки выше нормы (p<0,05), однако, последующего спада активности антиоксидантной системы не наблюдалось. Активность каталазы, супероксиддисмутазы приходят в норму уже на вторые сутки, в этот же период нормализуется антиокислительная емкость плазмы крови (таблицы 40,41). Итак, свободно-радикальный статус фагоцитов больных с ягодичными абсцессами характеризуется компенсированной реакцией организма на бактериальное раздражение: повышенный внеклеточный выброс радикалов в острый период воспалительного процесса происходит на фоне адаптационного подъема (в первые сутки) активности антиоксидантной системы, уровень которых нормализуется уже ко вторым суткам. Продукция супероксиданион радикала нейтрофилами и концентрация нитрат\нитритов в плазме крови приходят в норму на 7 сутки. Доля внутриклеточных АФК у больных этой подгруппы снижена более чем в два раза в острый период, но имеет положительную динамику и нормализуется к седьмым суткам. Подгруппа больных с гнойными маститами. Таблица 42 - Радикалообразующая способность нейтрофилов больных с гнойными маститами в динамике инфекционного процесса (x±m). Нейтрофилы периферической крови Число пациентов Восстановление цитохрома с, нМ\мин Концентрация нитратов\нитритов в 1мл плазмы, (мкМ) 1* 2 5 7 14 1* 2 5 7 14 Больные с гнойными маститами 18 9,3± 0,51 8,9± 0,21 7,5± 0,21,3 6,8± 0,31,4 4,5± 0,21,4 95,0± 0,51 85,4± 2,51,3 64,7± 3,51,3 45,2± 6,01,4 37,6± 2,51 Здоровые доноры 30 1,3 ±0,5 - - - - 10,0 ±2,5 - - - - *- дни пребывания в стационаре 1-p<0,01, 2- p<0,05 – относительно показателей здоровых доноров 3- p<0,01, 4- p<0,05 – относительно показателей предыдущего периода измерения (сутки). При исследовании подгруппы больных с гнойными маститами оценивали активность радикал-формируюшей активности нейтрофилов, как показатель интенсивности воспалительного процесса Количество супероксидного радикала внеклеточно секретируемого нейтрофилами в острый период инфекционного процесса увеличено по сравнению с нормой более чем в 9 раз (таблица 42). Плазменная концентрация нитратов\нитритов, как показатель содержания оксида азота увеличена более чем в 8 раз. В ходе стационарного лечения происходит снижение обеих величин радикалоообразования в организме больных, но и перед выпиской параметры остаются повышенными (p<0,01). Количество внутриклеточно генерируемых радикалов снижено во все периоды болезни, перед выпиской также не приходит в норму (p<0,01). В ответ на повышенное образование радикалов в первые сутки заболевания (на пике воспалительного процесса) происходит подъем активности каталазы, супероксиддисмутазы, и суммарного показателя активности антиоксидантной системы – антиокислительной емкости плазмы. Однако на вторые сутки обнаружен спад активности всех параметров антиоксидантной системы (таблица 43). Нормализации этих показателей к моменту выписки не происходит. Таблица 43 - Показатели антиоксидантной системы у больных с гнойными маститами (x±m). Показатель Число больных Сутки пребывания в стационаре Контроль (доноры) 1 2 5 7 14 Каталаза, ед\г мин 18 4,9±0,21 2,5±0,11,3 2,6±0,21 2,9±0,11 3,0±0,12 3,5±0,2 СОД, ед в мг белка 18 2,9±0,11 0,7±0,11,3 0,8±0,11 0,8±0,11 0,9±0,11 1,2±0,1 Антиоксидантная активность плазмы, % 18 67,0±1,51 43,5±1,51,3 48,0±1,01,4 51,0±1,01,4 53,0±1,51 58,0±1,5 *- дни пребывания в стационаре, 1-p<0,01, 2- p<0,05 – относительно показателей здоровых доноров 3- p<0,01, 4- p<0,05 – относительно показателей предыдущего периода измерения (сутки). Таким образом, при исследовании свободно-радикального статуса фагоцитов больных с гнойными лактационными маститами обнаружено изменение уровня всех показателей: снижение активности антиоксидантной системы, фагоцитарной функции нейтрофилов на фоне вдвое сниженной величины внутриклеточной генерации радикалов. На 14 сутки нормализации ни одного из исследованных показателей не происходит. Свободнорадикальный статус фагоцитов больных с генерализованной стафилококковой инфекцией. Больные были разделены на две подгруппы согласно классификации Bone [267,268]. Состояние больных первой подгруппы оценивалось как синдром системного воспалительного ответа (сепсис, ССВО), состояние пациентов второй подгруппы расценивалось как тяжелый сепсис (при присоединении к синдрому системного воспалительного ответа органных дисфункций (см. характеристику больных)). Генерация радикалов фагоцитарными клетками играет защитную роль и направлена на уничтожение инфекционного агента и, как правило, повышается в острую фазу воспаления 269]. Действительно, в обеих подгруппах больных с генерализованной стафилококковой инфекцией, выявлено, что нейтрофилы в подгруппе больных с сепсисом продуцируют более чем в двенадцать раз превосходящие нормальные количества супероксидного аниона, в подгруппе больных с тяжелым сепсисом количество продуцируемого супероксид аниона превосходит нормальный показатель более чем в 15 раз. Уровень нитратов и нитритов в плазме крови выше нормы в 15 (подгруппа больных с сепсисом) и в 18 раз (подгруппа больных с тяжелым сепсисом) (р<0,001) (таблица 44). При сравнении показателей активности радикалформирующей способности нейтрофилов больных разных подгрупп обнаружено, что продукция супероксиданион радикала и оксида азота во второй подгруппе (тяжелый сепсис) достоверно выше (р<0,01). Таблица 44 - Радикалообразующая способность нейтрофилов больных с генерализованной стафилококковой инфекцией в динамике инфекционного процесса (x±m). Нейтрофилы перифер-ической крови Число боль- ных Восстановление цитохрома с, (нМ\мин) Концентрация нитратов и нитритов в 1 мл плазмы, (мкМ) 1 2 7 14 30 1 2 7 14 30 Больные с ССВО 15 12,2 0,31 12,0 0,41 9,3 0,31,3 7,2 0,11,,3 5,1 0,31,3 150,0 10,01 125,0 13,01,3 112,0 11,01 79,0 7,01,3 50,0 14,01,4 Больные с тяжелым сепсисом 10 15,5 0,51 13,5 0,21,3 11,5 0,11,4 9,5 0,21,,4 6,3 0,31,,3 180,0 10,01 142,0 10,01,3 120,0 13,01 90,0 10,01,4 65,0 10,01,3 Здоровые доноры 15 1,3 0,5 - - - - 10,0 3,0 - - - - *- дни пребывания в стационаре 1-p<0,01, 2- p<0,05 – относительно показателей здоровых доноров 3- p<0,01, 4- p<0,05 – относительно показателей предыдущего периода измерения (сутки). К седьмому-четырнадцатому дню показатели активности свободно-радикальных процессов у больных с сепсисом и тяжелым сепсисом снижаются только на 47% и 39%, соответственно. К тридцатому дню происходит: они остаются повышенными на 25% и 32% соответственно. Рисунок 6 - Внутриклеточная продукция активных форм кислорода нейтрофилами больных с генерализованной стафилококковой инфекцией в динамике инфекционного процесса, (Rin\RΣ, (%)). Таблица 45 - Показатели активности супероксид дисмутазы (ед/мг), каталазы (ед/г.мин) лейкоцитов и антиокислительной активности плазмы крови (%) у больных с генерализованной стафилококковой инфекцией (Xm). Показатель Группа больных 1 2 7 14 30 Конт-роль сутки пребывания в стационаре Каталаза, ед\г мин Сепсис 1 подгруппа 7,8 0,31 1,6 0,11,3 1,8 0,11 2,3 0,21,4 2,9 0,21,3 3,5 0,5 Сепсис 2 подгруппа 1,5 0,11 1,2 0,11,3 1,4 0,31 1,9 0,21 1,5 0,11 СОД, ед в мг белка Сепсис 1 подгруппа 3,6 0,21 0,7 0,11,3 0,8 0,11 1,0 0,21 1,0 0,11 1,2 0,1 Сепсис 2 подгруппа 0,9 0,11 0,8 0,31 0,8 0,11 0,9 0,11 0,9 0,11 Антиокси-дантная активность плазмы, % Сепсис 1 подгруппа 79,0 1,51 41,5 1,51,3 43,0 1,01 44,0 1,51 50,0 1,51,4 58,0 1,5 Сепсис 2 подгруппа 30,0 5,51 26,5 5,01 23,0 5,51 27,5 5,51 30,0 5,51 *- дни пребывания в стационаре, 1-p<0,01, 2- p<0,05 – относительно показателей здоровых доноров 3- p<0,01, 4- p<0,05 – относительно показателей предыдущего периода измерения (сутки). В острый период инфекционного процесса доля АФК, генерируемых внутриклеточно, у больных сепсисом составляет всего 2,9±0,5%, у больных с тяжелым сепсисом -2,5±0,5%, при показателе здоровых доноров - 35,5±1,5%. Подтверждением развивающегося оксидативного стресса у больных с генерализованной стафилококковой инфекцией служит изменение уровня антиоксидантных ферментов (каталазы, супероксид дисмутазы). В первой подгруппе больных с генерализованной стафилококковой инфекцией на пике воспаления (при поступлении в стационар) были обнаружены повышенные по сравнению с нормой показатели активности КАТ и СОД, была увеличена также антиоксидантная емкость плазмы (таблица 45). На фоне интенсивно начатого лечения (вторые сутки) активность КАТ, СОД и антиоксидантная емкость плазмы больных с сепсисом резко падали ниже нормального уровня (р<0,01). Затем на пятые, седьмые и на четырнадцатые сутки происходило постепенное увеличение всех измеряемых антиоксидантных параметров, но к 30 суткам ни один из показателей состояния антиоксидантной системы не достигает нормальной величины (р<0,01). Обращают на себя внимание результаты, полученные при оценке антиоксидантных показателей больных с тяжелым сепсисом - резкий спад активности антирадикальной системы обнаружен уже при поступлении в стационар, что говорит о дисбалансе и декомпенсации защитных сил организма (р<0,01). Подобный спад активности антиоксидантной системы в острый период заболевания может быть рассмотрен как один из прогностических признаков особо тяжелого течения генерализованной инфекции. Повышенное образование внеклеточных радикалов сочетается со значительно сниженным внутриклеточным содержанием активных метаболитов кислорода и сниженной общей антиоксидантной емкостью организма, что приводит к неэффективному фагоцитозу стафилококков и повреждению собственных органов и тканей радикалами. На основании всего выше описанного следует, что у больных с различными формами генерализованной инфекции формируются глубокие сдвиги в метаболических процессах организма, сопровождающиеся нарушением функционирования всех его защитных систем, включая фагоцитарную и антиоксидантную. Таким образом, стафилококковая инфекция, в особенности ее генерализованная форма, приводит к значительному дисбалансу свободных радикалов и их ингибиторов в крови. Более того, направление продукции свободных радикалов нейтрофилами становится преимущественно внеклеточным, что не способствует внутриклеточному киллингу, но приводит к воспалительному свободно-радикальному поражению клеток и тканей организма хозяина. Некоторые изменения параметров активности антиоксидантной системы (отсутствие подъема значений каталазы, супероксид дисмутазы и антиокислительной емкости плазмы в острый период) могут служить прогностическими критериями особо тяжелого течения гнойно-воспалительного процесса. Подобное нарушение равновесия в системе «прооксиданты-антиоксиданты» необходимо учитывать и корректировать при проведении лечебных мероприятий и профилактике осложнений при различных формах стафилококковой инфекции.

Похожие:

	Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы		Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы
	Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы		Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы
	Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы		Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы
	Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы		Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы
	Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы		Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы
	Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... В рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы		Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования
	Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования		Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... Санкт-петербургский государственный электротехнический университет «лэти» им. В. И. Ульянова (ленина)
	Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования		Отчет о научно-исследовательской работе в рамках федеральной целевой... Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования