Актуальные вопросы современной науки
Скачать 2.03 Mb.
|
АНАЛИЗ КАЧЕСТВА СТЕРИЛИЗУЮЩИХ АГЕНТОВ И ИХ ВЛИЯНИЕ НА ОБЪЕКТЫ МИКРОРАЗМНОЖЕНИЯ В УСЛОВИЯХ INVITRO НА ПРИМЕРЕ ЗЕМЛЯНИКИ САДОВОЙ (FRAGARIA × ANANASSA (WESTON) DUCHESNE)1 И. А. Навальнева, И. С. Буковцова Лаборатория по клонированию декоративных деревьев, цветов и кустарников цеха по благоустройству и озеленению №1 УНИЦ «Агротехнопарка», Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия имени В.Я. Горина», г. Белгород, Россия, irinanavalneva@rambler.ru, sevatari@rambler.ru ВВЕДЕНИЕ Клональным микроразмножением называют неполовое размножение растений с помощью метода культуры тканей, позволяющее получать растения идентичные исходному. В основе получения таких растений лежит способность соматических клеток растений полностью реализовывать свой потенциал развития, т.е. свойство тотипотентности. Метод клональногомикроразмножения получает все более широкое распространение во всем мире. В большинстве стран эта технология приобрела коммерческий характер [1]. У земляники материал для введения в культуру invitro обычно берут только в конце сентября. Апексы у земляники берут от растущего «уса» [3]. У испытуемых сортов после отделения от материнского растения оставляют отрезки стебля длинной 1см, которые очищают от чешуек и в таком виде подвергают стерилизации. Стерилизацию проводят различными дезинфицирующими агентами (табл. 1) с последующим трехкратным промыванием в стерильной дистиллированной воде [1, 3]. Таблица 1 Стерилизация исходного растительного материала
В связи с тем, что глубина проникновения заражения в апекс чаще всего неизвестна, используют для посадки не чистую меристему, а более крупные части апекса. Поэтому экспланты земляники достигают длины 1,5 мм. При введение используют безгормональную среду Мурасиге-Скуга (МS) [1, 4]. Цель нашей работы произвести сравнительную оценку качества стерилизующих агентов и их влияние на объекты микроразмножение в условиях invitro на примере земляники садовой. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Объектом исследования являются стерильные верхушечные столоны (усы) Fragaria × ananassa (Weston) Duchesne. Были отобраны наиболее востребованные сорта земляники: «ЗенгаЗенгана», «Лорд», «Гигантелла». Исследования по культивированию в условиях invitroпроводили в соответствии с методическими указаниями по культуре ткани и органов в селекции растений [1, 3, 4]. Обработка экспериментальных данных выполнена на основе методов математической статистики по методикам, опубликованным Доспеховым [2]. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Проведенными исследованиями выявлено, что успех введения в культуру тканей определяется эффективностью стерилизации. Как показал сравнительный анализ действия различных стерилизующих агентов, использование хлорсодержащих веществ обеспечивало достаточную стерильность материала. Среди изученных агентов пергидроль 10-12 % обладал наименьшим стерилизующим эффектом, в основном грибная инфицированность эксплантов составляла 92 % (рис. 1-3, табл. 2).
Таблица 2 Влияние различных стерилизующих агентов на обеззараживание материала в условиях invitro
* - поражение дезинфицирующим агентом слишком большое Количество стерильных проростков не превышало 8 %. После обработки эксплантов земляники пергидролем с концентрацией 10-12% растения формировались недоразвитыми и уродливыми. Их длина составляла 1-3 мм. Листочки на проростках были скручены и имели светло-зеленый окраску. Корешок растения имел длину 1-2 мм. Оценка состояния проростка по 5 балльной шкале составляла 2 балла. Растения обладали низкой жизнеспособностью, через 10 дней культивирования проростки загнивали и не могли использоваться для дальнейшей работы. Применение раствора пергидроля с концентрацией примерно 20% обеспечивало больший стерилизующий эффект материала – 60 %. Аномалий в развитии проростков после обработки эксплантов 20%-ым раствором пергидроля не наблюдалось. При этом растения имели хорошо развитую корневую систему с многочисленными боковыми корешками. Длина главного корня составляла 7-8 мм. Утолщенный стебель имел длину 5-6 мм. Проросток был насыщено зеленого цвета. Оценка состояния проростков – 4 баллов. 30%-ый раствор дезэфекта с различным временем экспозиции имел неодинаковый стерилизующий эффект на экспланты. Так было установлено, что наибольшее инфицирование получили пассажи, время обработки которых не превышало 5 мин – 85%. При этом развивающиеся проростки уродливы, листочки не цельные, длина корешков 3-4 мм. Несколько лучше обстоят дела для эксплантов, обрабатывание которых продолжалось 15 мин – 60%, проростки также не жизни способны. После воздействия дезэфекта в течение 60 мин экспланты имели обширные площади повреждения. Даже тщательное удаление поврежденных участков не позволило окончательно от них избавиться и большинство пассажей после посадки на питательную среду очень быстро погибли. Растеньица так же как и в случае с пергидролем не могли использоваться для дальнейшей работы. Наилучшим результат показала стерилизация объектов в течение 30 минут – 35%. При этом растения имели хорошо развитую корневую систему с многочисленными боковыми корешками. Длина главного корня составляла 5-6 мм. Утолщенный стебель имел длину 3-4 мм. Проросток имел насыщенную зеленую окраску. Оценка состояния проростков – 5 баллов Высокий стерилизующий эффект наблюдался так же после обработки материала 0,1%-ым раствором хлоргексидина – 90 %. При его применении общая зараженность растений составляла 10 %. Использование раствора оказывало положительное действие на жизнеспособность проростков. Так, после двух месяцев культивирования растения выглядели сильными. Длина корешка от 2 до 5 см. Стебелек проростка имел ярко-зеленую окраску, длина составила примерно 0,5-3 см (рис. 4-6). Оценка состояния проростков – 5 балла.
Заключение Таким образом, оптимальным стерилизующим агентом для обеспечения стерильности и сохранения высокой жизнеспособности вводимого материала в наших исследованиях был раствор хлоргексидина в концентрации 0,1 %. Литература
ИЗУЧЕНИЕ СВОЙСТВ КОМПЛЕКСНОГО СПИРТОВОГО ЭКСТРАКТА БАРВИНКА РОЗОВОГО, ЛАВРОВИШНИ ЛЕКАРСТВЕННОЙ И МИРТА ОБЫКНОВЕННОГО. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОГО ВЛИЯНИЯ ЭКСТРАКТА НА РЕЦИДИВНЫЙ ПРОЦЕСС У БОЛЬНЫХ ЛИМФОГРАНУЛЕМАТОЗОМ Д. Г. Терещенко1, О. С. Белобородова2, С. И. Избранова3 1Факультет Физической культуры и биологии Кубанского государственного университета», филиал в г. Славянск-на-Кубани; 2МУЗ «3 городская больница Администрации г. Новороссийска»; 3Кафедра Физической культуры и естественно-биологических дисциплин Кубанского государственного университета, филиал в г. Славянск-на-Кубани. Г. Славянск-на-Кубани, Россия. Созданием панацеи от онкологических заболеваний фармацевты заняты с самого начала обнаружения раковых заболеваний. Данная работа направлена на исследование влияния комплексного экстракта Барвинка розового Лавровишни лекарственной и Мирта обыкновенного в комплексной терапии рецидивного процесса лимфомы Ходжкина. Объектом исследования является поведение рецидивного процесса лимфомыпри применении комплексного экстракта. Химическое исследование экстракта проводилось по следующим показателям: Содержания этилового спирта. Определение проводится методом рефрактометрии. Определение кислотности вытяжки. Общую кислотность определяют кислотно-основным титрованием экстракта раствором щелочи.Определение аскорбиновой кислоты. Основано на его реакции с иодом, в присутствии крахмала.Количественное определение глюкозы в экстрактах.Основан метод на измерении объема исследуемого раствора, необходимого для полного восстановления точного объема фелинговой жидкости. Качественное определение витаминовпроводилось на основе качественных реакций. Определялись следующие витамины:А,Е, В2, В6, РР. Определение содержания минеральных веществ. Основано на качественных реакциях на отдельный ион. Определялись следующие минеральные вещества: кальций, медь, железо, алюминий, магний, сера, фтор, хлор. Исследование проводилось в условиях ГБОУ ВПО «Кубанского государственного университета филиала в г. Славянск – на – Кубани». Клиническое исследование на рецидив лимфомы Ходжкина. Количественное применение комплексного экстракта основано на личном самочувствии пациента. Если наблюдалось ухудшение здоровья дозу препарата либо уменьшали, либо прием останавливали. 15 больных лимфогранулематозом принимали экстрактный препарат с 20 капель, и дозу увеличивали каждый день на 5 капель. Эксперимент проводился под наблюдением врача онко-гематолога высшей категории. Отслеживаются каждые 4 дня общий анализ крови с лейкоформулой и содержанием глюкозы, размеры новообразования. Ежедневно контролировалось физическое состояние организма: артериальное давление, шумы сердца, легочный ритм дыхания и размеры селезенки. Клиническое исследование экстракта проводилось в условиях МУЗ «Новороссийский онкологический диспансер» на базе гематологического отделения 3 городской больницы г. Новороссийска. Химическое исследование Содержание этилового спита (по рефрактометру) 76-77 %. Кислотность экстракта 0,46 %. Содержание аскорбиновой кислоты 0,87 мг/кг. Содержание редуцирующих сахаров в пересчете на глюкозу 20,0 мг/л. Обнаружены витамины: А, Е, В2, В6, РР. Обнаружены ионы: Ca2+, Cu2+, Fe2+, Al3+, Mg2+, S2-, F- и Cl- Клиническое исследование на рецидив лимфомы Ходжкина Проводилось в условиях МУЗ «Новороссийский онкологический диспансер» на базе 3 городской больнице города Новороссийска, в гематологическом отделении Таблица 1 Усредненные данные анализа крови с лейкоформулой пациентов
Таблица 2 Средние размеры и характер новообразования лимфомы Ходжкина в процессе применения комплексного экстракта
В процессе применения комплексного экстракта замечено, что содержание белка гемоглобина у всех пациентов остается в пределах нормы, однако, прослеживается незначительное уменьшение его количества. Заметно снижение содержания лейкоцитов до нормы. Уменьшается содержание тромбоцитов, не вызывая тромбоцитопении. Содержание эритроцитов плавно уменьшается, выходит за пределы нормы, вызывая анемию (эритремия). Скорость осаждения эритроцитов (СОЭ) заметно уменьшается, что свидетельствует об ослаблении процесса воспаления (иммунного ответа). Содержание палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов уменьшается до допустимых норм. Содержание эозинофилов уменьшается до допустимых норм. Базофильные форменные элементы не обнаруживались ни у одного из пациентов. Содержание моноцитов увеличивается и доходит до пределов нормы. Содержание лимфоцитов увеличивается и доходит до пределов нормы. Внешние размеры новообразования уменьшаются с продолжительностью применения экстрактного препарата. Уплотненная округлая структура образования со временем плохо визуализируется и прощупывается и наконец,не визуализируется. В процессе приема экстрактного препарата замечено понижение артериального давления до 100/60 – 90/50 и повышенная аритмия сердца. При осмотрах печень у края реберной дуги. Селезенка увеличена незначительно и плохо визуализирована. В процессе приема экстракта проявляется улучшение состояния и угнетение рецидивного процесса. Незначительное ухудшение состояния здоровья связано с ответной реакцией на ядовитые вещества экстракта. В единичном случае проявлялись признаки аллергической реакции, после чего препарат экстракта больше не применялся пациентом. Секция 5. Науки о Земле | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Похожие:
 | Вопросы к экзамену по дисциплине «Теория организации» Международная научно-практическая конференция «Актуальные вопросы современной педагогической науки» |  | Программа дисциплины актуальные проблемы современной науки и журналистика... Актуальные проблемы современной науки. Современные научные концепции дальнейшего развития человечества |
| 1 Сентября ru Международная научно-практическая конференция «Актуальные вопросы современной педагогической науки» | | Отчет о работе Новгородской городской организации профессионального... Международная научно-практическая конференция «Актуальные вопросы современной педагогической науки» |
| Программа дисциплины Международная научно-практическая конференция «Актуальные вопросы современной педагогической науки» | | Москва Актуальные проблемы современной науки гуманитарные науки часть... Актуальные проблемы современной науки: Труды 14-й Международной конференции -конкурса «Актуальные проблемы современной науки». Гуманитарные... |
| Российский государственный торгово Международная научно-практическая конференция «Актуальные вопросы современной педагогической науки» | | Примеры библиографического описания Международная научно-практическая конференция «Актуальные вопросы современной педагогической науки» |
| Положение о виртуальном фестивале Международная научно-практическая конференция «Актуальные вопросы современной педагогической науки» | | Программа учебного курса по биологии, за Международная научно-практическая конференция «Актуальные вопросы современной педагогической науки» |
| Программа вступительных испытаний по биологии Международная научно-практическая конференция «Актуальные вопросы современной педагогической науки» | | А. П. Гайдара кафедра мед подготовки и бжд Международная научно-практическая конференция «Актуальные вопросы современной педагогической науки» |
| Тест Выберите один из 4 вариантов ответа Международная научно-практическая конференция «Актуальные вопросы современной педагогической науки» | | Министерство образования и науки российской федерации приказ от 5... Международная научно-практическая конференция «Актуальные вопросы современной педагогической науки» |
| Эти ресурсы можно разделить на несколько типов Международная научно-практическая конференция «Актуальные вопросы современной педагогической науки» | | «Наука и промышленность Республики Татарстан в годы войны» Международная научно-практическая конференция «Актуальные вопросы современной педагогической науки» |
