Лабораторная работа 4. Возбудители гнойно-воспалительных заболеваний: стафилококки, стрептококки.
Стафилококки могут вызывать оппортунистические, в том числе внутрибольничные инфекции. Наибольшее клиническое значение наряду с «традиционными» видами – Staphylococcus aureus (золотистым), Staphylococcus epidermidis (эпидермальным) и Staphylococcus saprophytics (сапрофитическим) – имеют так называемые коагулазоотрицательные стафилококки (S. haemolyticus, S. lugdunensis, S. schleiferi, S. warneri). Внутрибольничные инфекции часто обусловлены метициллинрезистентными S. aureus (MRSА), имеющими повышенную вирулентность и устойчивость ко многим антимикробным препаратам.
При заболеваниях, вызванных стафилококками, исследуют гной, раневое отделяемое, пунктаты из полостей и абсцессов, материал со слизистых оболочек, кровь, мокроту, мочу, спинномозговую жидкость; в случае пищевых отравлений – рвотные массы, испражнения больных, остатки пищи; при профилактических исследованиях – смывы с инструментов и оборудования, стерилизованные материалы медицинского назначения, воздух.
При открытых гнойных поражениях материал берут ватным тампоном после удаления верхнего слоя гноя, в котором могут находиться непатогенные стафилококки и другие микроорганизмы, попавшие с кожи или из воздуха. При наличии закрытых гнойных очагов делают пункцию и выливают гной из шприца в стерильную пробирку. Отделяемое слизистой оболочки снимают сухим тампоном. Мочу, мокроту собирают в стерильные пробирки и банки. Кровь (5-20 мл), взятую шприцем из локтевой вены, и спинномозговую жидкость с соблюдением правил асептики сеют у постели больного во флакон, содержащий 100-200 мл сахарного бульона (рН 7,2-7,4), или на среду для контроля стерильности. Стафилококки хорошо размножаются и на простых средах, однако лучше использовать обогащенные среды, так как септицемия может быть вызвана не только стафилококками, но и прихотливыми микроорганизмами (стрептококками, анаэробами и др.).
Хотя многочисленные представители рода Streptococcus в норме составляют значительную долю нормальной микрофлоры пищеварительного, дыхательного и генитального тракта, некоторые из них могут вызывать оппортунистические инфекции разной локализации и тяжести: фарингиты, ангины, отиты, пневмонии, скарлатину и другие заболевания дыхательного тракта и JIOP-opганов; рожистое воспаление, флегмоны, нагноения ран и другие заболевания кожи и подкожной клетчатки; послеродовые гнойно-воспалительные осложнения, менингит, сепсис. Тяжелыми осложнениями стрептококковой инфекции являются ревматизм и гломерулонефрит. Наибольшее клиническое значение имеют Streptococcus pyogenes (пиогенный стрептококк, группа А по Лэнсфилд), Streptococcus pneumoniae (пневмококк), Streptococcus agalactiae (β-гемолитические стрептококки группы В), β-гемолитические стрептококки групп С и G. В последнее время доказана этиологическая роль стрептококков группы D (эндокардиты, менингиты), а также ряда «зеленящих» стрептококков, постоянно обитающих на слизистых оболочках (бактериемии, эндокардиты, глубокие абсцессы печени и мозга).
При заболеваниях, вызванных стрептококками, материалом для исследования, в зависимости от локализации и формы инфекции, являются гной, кровь, отделяемое слизистой оболочки, моча, мокрота, спинномозговая жидкость, раневое отделяемое. Берут его так же, как при заболеваниях, вызванных стафилококками. При взятии материала из полости рта ополаскивание не проводят, а интервал после приема пищи должен быть не менее 2 ч. Если материал невозможно доставить в лабораторию в течение 2 ч, его помещают в транспортные среды или среду накопления (сахарный бульон, тиогликолевая среда).
Опрос по теме занятия.
Контрольные вопросы.
1.Указать систематическое положение стафилококков, стрептококков.
2. Дать морфолого-биологическую характеристику указанных выше возбудителей гнойно-воспалительных заболеваний.
3. Знать факторы патогенности этих возбудителей и особенности патогенеза вызываемых ими заболеваний.
4. Знать особенности формирование иммунитета, особенности профилактики при данных инфекциях.
5. Уметь провести лабораторную диагностику инфекций, вызванных этими возбудителями.
6. Знать особенности экологии и эпидемиологии. Задания 1.Провести бактериоскопическое исследование демонстрационных мазков, приготовленных из патологического материала окрашенных по Граму. Сделать заключение и наметить план дальнейшего анализа. 2. Учесть результаты готовых посевов патологического материала на питательные среды: 5% кровяной агар, селективный кровяной агар с добавлением триметоприм-сульфаметоксазола, сахарный бульон, тиогликолевую среду. Описать колонии и отметить наличие или отсутствие гемолиза вокруг них. 3. Приготовить мазки из выросших колоний и окрасить по Граму. 4. Учесть результаты готовых посевов чистых культур. В случае выделения стафилококка:
а) отметить характер роста культуры на среде ЖСА.
б) определить способность продуцировать плазмокоагулазу
в) оценить рост на средах «пестрого ряда» с глюкозой и маннитом в аэробных и анаэробных условиях.
г) учесть и оценить результаты антибиотикограммы с выделенной культурой. 5.Учесть результаты готовых посевов чистых культур. В случае выделения стрептококков.
а) отметить характер роста культуры при 100С,
б) при 450С,
в) при рН 9,6,
г) на средах, содержащих метиленовый синий (0,1%),
д) хлорид натрия (6,5%),
е) желчь (40%),
ж) термоустойчивость при 600С в течение 30 мин.
з) учесть и оценить результаты антибиотикограммы с выделенной культурой.
|