Российской Федерации Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования

4.2.4 Измерение динамического поверхностного натяжения растворов липазы из поджелудочной железы свиньи в смеси с полидиаллилдиметиламмоний хлоридом Поверхностное натяжение раствора липазы из поджелудочной железы свиньи было измерено в присутствии положительно заряженного полимера полидиаллилдиметиламмоний хлорида (ПАМА) при молярных соотношениях липаза : ПАМА 1:100, 1:10, 1:1, 10:1, 100:1 (рис.18-23). Рисунок 18 - Зависимость поверхностного натяжения раствора полидиаллилдиметиламмоний хлорида от времени существования поверхности. Рисунок 19 - Зависимость поверхностного натяжения смеси липаза : ПАМА 1:1 от времени существования поверхности. Рисунок 20 - Зависимость поверхностного натяжения смеси липаза : ПАМА 1:10 от времени существования поверхности. Рисунок 21 - Зависимость поверхностного натяжения смеси липаза : ПАМА 1:100 от времени существования поверхности. Рисунок 22 - Зависимость поверхностного натяжения смеси липаза : ПАМА 10:1 от времени существования поверхности. Рисунок 23 - Зависимость поверхностного натяжения смеси липаза : ПАМА 100:1 от времени существования поверхности. Из полученных тензиограмм были рассчитаны показатели поверхностного натяжения в динамике. При коротких временах существования поверхности 0,01 и 0,1 с ПН растворов ПАМА и смесей липаза : ПАМА в различных соотношениях близко к ПН воды и незначительно изменяется от 75,73±0,11 до 78,33±0,20 мН/м (эти значения соответствуют ПН воды при данных временах существования поверхности, полученному на приборе BPA-1P). Угол наклона начального участка тензиограмм увеличивается на 3-4 мН∙м-1с1/2 при добавлении ПАМА к раствору липазы. Полидиаллилдиметиламмоний хлорид является поверхностно неактивным соединением, как и все остальные полиэлектролиты, его ПН соответствует динамическому поверхностному натяжению воды, и лишь незначительно ниже при длинных временах существования поверхности. При длинных временах существования поверхности σ4 раствора липазы меньше, чем ПН раствора ПАМА на 27 мН/м. При временах жизни 1 и 100 с различия в σ2 и σ3 смесей липаза : ПАМА еще не видны. ПН изменяется от 70,51±0,35 до 73,45±0,08 мН/м. Самым информативным показателем, также как для смесей липазы с другими полиэлектролитами, оказался параметр динамического поверхностного натяжения - σ4 (рис.24). Поверхностное натяжение снижается на 5 мН/м уже при соотношении 1:10 и еще на 14 мН/м при уменьшении относительной концентрации ПАМА в 10 раз (соотношение 1:1), что может быть объяснено электростатическим взаимодействием между отрицательно заряженной липазой и положительно заряженным полидиаллилдиметиламмоний хлоридом и образованием гидрофобного комплекса, стремящегося на поверхность раздела фаз. При избытке липазы (соотношения липаза : ПАМА 10:1 и 100:1) σ4 близко к ПН чистой липазы. Таким образом, общее снижение σ4 при увеличении содержания фермента от 1:100 до 100:1 для системы липазы с ПАМА составило 22,5 мН/м. Рисунок 24 - Поверхностное натяжение (σ4) комплексов липаза : ПАМА при различных молярных соотношениях. 4.2.5 Измерение динамического поверхностного натяжения растворов липазы из поджелудочной железы свиньи в трехкомпонентном комплексе с полистиролсульфонатом натрия и полидиаллидиметиламмоний хлоридом Поверхностное натяжение раствора липазы из поджелудочной железы свиньи было измерено в трехкомпонентном комплексе. Соотношение липаза : ПСС было равно во всех случаях 1:1, отношение двух полиэлектролитов ПАМА / ПСС варьировалось от 0,3 до 1,0 (рис. 25-27). Рисунок 25 - Зависимость поверхностного натяжения смеси липаза : ПСС : ПАМА (липаза:ПСС 1:1, ПАМА / ПСС = 0,3) от времени существования поверхности Рисунок 26 - Зависимость поверхностного натяжения смеси липаза : ПСС : ПАМА (липаза:ПСС 1:1, ПАМА / ПСС = 0,6) от времени существования поверхности. Рисунок 27 - Зависимость поверхностного натяжения смеси липаза : ПСС : ПАМА (липаза:ПСС 1:1, ПАМА / ПСС = 1) от времени существования поверхности. Таблица 3 - Показатели поверхностного натяжения трехкомпонентного комплекса липаза: ПСС : ПАМА (соотношение липаза:ПСС во всех случаях было 1:1) при различных временах существования поверхности 0,1 с (σ1), 1 с (σ2), 100с (σ3) и 3500 c (σ4), а также углы наклона тензиограмм (λ0, λ1). Отношение ПАМА / ПСС σ0 σ1 σ2 σ3 σ4 λ0 λ1 0 77,32 ±0,07 77,46 ±0,11 71,95 ±0,16 71,52 ±0,15 68,71 ±0,06 10,24 ±0,39 0,39 ±0,07 0,3 77,75 ±0,54 78,16 ±0,45 74,58 ±0,29 73,46 ±0,30 48,23 ±5,00 6,48 ±0,88 2,20 ±0,61 0,6 78,16 ±0,17 78,35 ±0,28 75,25 ±0,17 73,06 ±0,19 43,64 ±1,86 5,57 ±0,51 4,97 ±0,29 1,0 77,90 ±0,07 78,58 ±0,20 75,94 ±0,40 75,34 ±0,55 45,23 ±3,80 4,31 ±0,48 0,84 ±0,28 Рисунок 28 - Поверхностное натяжение (σ4) трехкомпонентного комплекса липаза-ПСС-ПАМА в зависимости от соотношения ПАМА : ПСС. Как и в случае двухкомпонентных комплексов липазы с полистиролсульфонатом натрия и липазы с полидиаллидиметиламмоний хлоридом из всех определенных по полученным тензиограммам показателей (табл. 3) наиболее информативным оказалось значение поверхностного натяжения при длинных временах существования поверхности - σ4 (рис. 28). Добавление к двухкомпонентной смеси липаза : ПСС (1:1) третьего компонента в любой концентрации приводит к резкому снижению поверхностного натяжения на 20-25 мН/м. Параметр ДПН σ4 для смесей липазы с двумя синтетическими полиэлектролитами ПСС и ПАМА лежит в пределах ошибки измерения с σ4, полученным для чистого раствора липазы (42,86±1,18 мН/м). Таким образом, было установлено, что величина изменения динамического поверхностного натяжения σ4 для систем панкреатической липазы с полимерами с увеличением относительного содержания фермента от 1:100 до 100:1 уменьшается в ряду ПАМА≥ПЛ>ПСС≥ПГ>БСА. Построение моделей на основе полученных корреляций между изученными параметрами. 4.3.1 Модельные системы на основе белков, липидов и солей Тензиограммы растворов БСА в концентрациях, близких к концентрациям белка в сыворотке крови животных (30-80 г/л) имеют хорошо выраженные отрицательные значения ПН в области 0,1с (рис. 29). Такие же данные были получены и при измерении ПН методом висящей капли. Этот эффект объясняется влиянием нескомпенсированного электрического заряда адсорбированных молекул белка при низких степенях заполнения поверхности, когда понижение ДПН вследствие адсорбции пренебрежимо мало. Было изучено ДПН растворов БСА при концентрации 30-80 г/л, лецитина в воде при концентрации 1-4 мМ, хлорида натрия при концентрации 120-160 мМ, растворов БСА и соли, БСА и лецитина, лецитина и соли, а также трехкомпонентные смеси этих веществ. Рисунок 29 - Тензиограммы водных растворов БСА. В растворах белка ПН снижается на 4-6% при средних временах существования поверхности. При больших временах ПН достигает значений 55,9-58,4 мН/м, это на 25-30% ниже, чем исходное и на 20% ниже, чем при концентрации белка 10-6 моль/л. Такие значения ПН соответствуют равновесным значениям в растворах с низкой концентрацией БСА. Значения углов наклона начального и конечного участка кривой отличаются между собой в 1,5-2 раза, такое относительно небольшое различие связано с повышением значений ПН при коротких временах. В растворах с концентрацией БСА 30-80 г/л значения ПН при одинаковых временах существования поверхности отличаются незначительно. По данным ряда авторов только при концентрации глобулярных белков менее 1-10 г/л (зависит от pH и добавок электролитов) последние присутствуют в растворе в виде отдельных молекул. При более высоких концентрациях белка происходит ассоциация их молекул в объеме, вследствие чего на поверхности способны адсорбироваться только неассоциированные молекулы, концентрация которых в растворах с большой концентрацией белка примерно постоянна. Этим и объясняется такое слабое влияние концентрации БСА на динамическое поверхностное натяжение растворов. Таблица 4 - ДПН водных растворов БСА. БСA, г/л σ1 мН/м σ2 мН/м σ3 мН/м λ0 мН∙м-1с1/2 λ1 мН∙м-1 с1/2 30 71,56±0,16 69,1±0,2 58,4±0,2 6,51±0,12 13,3±0,3 40 71,9±0,3 67,2±0,2 56,7±0,2 6,1±0,2 13,82±0,12 50 70,9±0,3 67,03±0,19 57,1±0,3 7,32±0,12 11,51±0,12 60 70,1±0,3 67,5±0,3 55,9±0,3 5,43±0,12 15,42±0,13 70 71,9±0,2 66,3±0,3 56,6±0,3 5,6±0,2 12,7±0,2 80 73,9±0,2 68,3±0,3 56,25±0,18 7,12±0,13 15,92±0,12

Похожие:

	Российской Федерации Федеральное государственное бюджетное образовательное... М., Розенштейн М. М., Серпунин Г. Г., Авдеева Е. В., Шеховцев Л. Н., Уманский С. А. Калининград: Федеральное государственное бюджетное...		Рабочие программы учебных дисциплин (модулей) министерство образования... Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования
	Правительство Российской Федерации Государственное образовательное... Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования		Федеральное агентство по образованию государственное образовательное... Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Ставропольская государственная медицинская академия»...
	Методические указания Новокузнецк 2012 Министерство образования и... Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования		Правила оформления дипломных работ Министерство образования и науки... Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования
	Программа дисциплины «Сценарный трейдинг» Правительство Российской... Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования		Программа учебной практики министерство образования и науки российской... Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования
	Министерство образования и науки российской федерации федеральное... Негосударственное образовательное частное учреждение высшего профессионального образования		Российской федерации высший арбитражный суд российской федерации Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования
	Министерство образования и науки российской федерации федеральное... Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования		Министерство образования и науки российской федерации федеральное... Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования
	Министерство образования и науки Российской Федерации Федеральное... Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования		Российской Федерации Федеральное государственное бюджетное образовательное... Российской Федерации Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение
	Министерство образования и науки российской федерации федеральное... Государственное автономное образовательное учреждение дополнительного профессионального образования (повышения квалификации) специалистов...		Российской федерации Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования