Сэндвич-метод иммуноферментного определения hbsAg с помощью рн чувствительных сорбируемых моноклональных антител 14. 03. 09 клиническая иммунология, аллергология
Скачать 291.55 Kb.
|
Таблица 2. Определение HBsAg в сертифицированных образцах сывороток*
* Использовали панель сывороток крови, содержащих и не содержащих HBsAg, производства МБС, г. Новосибирск. ВЫВОДЫ 1. Получена панель гибридомных клеточных линий – продуцентов высокоаффинных моноклональных антител (МКА) к поверхностному антигену вируса гепатита В (HBsAg). 2. Подобрана пара иммобилизуемых и детектирующих моноклональных антител (МКА 18С8 и F4F3, соответственно), использование которых при конструировании нового варианта сэндвич-метода определения HBsAg позволяет достичь высокой чувствительности анализа. 3. Показано, что при рН 2,8, рН 7,5 и рН 9,5 на поверхность полистироловых планшетов сорбируется одинаковое количество МКА 18С8, но адсорбция при рН 2,8 приводит к двукратному увеличению их антигенсвязывающей активности (в сравнении с адсорбцией при рН 7,5) и позволяет в 7-10 раз уменьшить минимальную достоверно определяемую концентрацию HBsAg, доведя её до 0,013 – 0,017 нг/мл. 4. В сконструированном сэндвич-методе белки HBsAg, выделенного из крови, рекомбинантные белки HBsAg субтипов adw и ayw и HBsAg смеси сывороток больных гепатитом В воспринимаются как идентичные субстанции. 5. Анализ панели сертифицированных сывороток больных гепатитом В с использованием сконструированного варианта сэндвич-метода позволяет определять HBsAg серотипов аyw2, аyw3varА, аyw3varB, аdr и аdw. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ 1. Яковлева Д.А. Сэндвич-метод тестирования HBsAg вируса гепатита В и пути увеличения его чувствительности /Яковлева Д.А., Дмитриев А.Д., Шарипова И.Н., Лавров В.Ф. // В сборнике: "Актуальные вопросы эпидемиологии инфекционных заболеваний" (выпуск 9). – Москва. - 2009.- Стр. 360-366. 2. Яковлева Д.А. Использование рН-чувствительных иммобилизованных моноклональных антител для оптимизации иммуноферментного сэндвич-метода определения поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg) / Яковлева Д.А., Дмитриев А.Д., Дмитриев Д.А., Массино Ю.С., Павлова Е.В., Пыренкова И.Ю., Смирнова М.Б., Сегал О.Л., Тараканова Ю.Н., Уланова Т.И., Фартушная О.Н., Шарипова И.Н., Коляскина Г.И., Лавров В.Ф. // Журнал микробиологии эпидемиологии и иммунобиологии. – 2010. - № 2. - Стр. 85-89. 3. Яковлева Д.А. Использование рН-чувствительных иммобилизованных моноклональных антител для оптимизации иммуноферментного сэндвич-метода определения поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg) / Яковлева Д.А., Дмитриев А.Д., В.Ф. Лавров В.Ф. // Тезисы докладов международной конференции "Развитие научных исследований и надзор за инфекционными заболеваниями". - Спб., 2010.- С. 4. Фартушная О.В. Влияние рН сорбции антител на их антигенсвязывающую активность / Фартушная О.В., Тараканова Ю.Н., Яковлева Д.А., Дмитриев А.Д., Лавров В.Ф. // Сборник "Актуальные вопросы эпидемиологии инфекционных заболеваний" (выпуск 10). – Москва. – 2011. - Стр. 531-533. 5. Яковлева Д.А. Повышение биологической активности иммобилизованных антител в иммуноферментных сэндвич-методах путем адсорбции при низких значениях рН / Яковлева Д.А., Тараканова Ю.Н., Дмитриев А.Д., Массино Ю.С., Смирнова М.Б., Сегал О.Л., Фартушная О.В., Коляскина Г.И., Лавров В.Ф., Дмитриев Д.А. // Журнал «Эпидемиология и вакцинопрофилактика» (выпуск 6). – Москва. – 2011. – Стр. 84-89. 1 В упомянутых тест-системах используется метод ИФА и детектирующие антитела, конъюгированные с пероксидазой хрена 2 Коэффициенты кривых от опыта к опыту могли несколько варьировать, однако в серии экспериментов без труда выявлялась "лидирующая" пара. |
Похожие:
 | Клиническая иммунология Клиническая иммунология: Учебно-методическое обеспечение самостоятельной работы / А. А. Савченко. – Красноярск: Сиб федер ун-т, 2011.... | | Клинико-иммунологическая характеристика больных атопическим дерматитом... Учитель истории и обществознания Гусевской средней общеобразовательной школы Бабаева С. В |
| Феноменология иммунного ответа на т-независимые антигены 2-го типа... В этом плане явились мероприятия, проведенные в 9-11 классах «Нет – наркотикам», «Мы за здоровый образ жизни» с приглашением мед... |  | Сравнительная характеристика натуральных киллерных клеток человека... Охватывает те же этапы, что и протокол предложенный Хиллом, но компания предлагает использовать свою среду неизвестного пользователю... |
| Возможности лаборатории Центра крови 1-го мгму имени И. М. Сеченова Обследование доноров: определение hbsAg, антител к вирусу гепатита С, вич, сифилису | | Метод определения биологического возраста по спирографии Белозерова Л. М., Одегова Т. В. Метод определения биологического возраста по спирографии // Клиническая геронтология. 2006. Т. 12,... |
| Иммунология клиническая иммунология Основной целью обучения является усвоение определенной суммы информации по предмету, а также выработка и развитие у студентов умений... | | Иммунология клиническая иммунология Основной целью обучения является усвоение определенной суммы информации по предмету, а также выработка и развитие у студентов умений... |
| Образовательное учреждение высшего профессионального образования Днк-технологий для выявления генов высокой продуктивности и устойчивости к заболеваниям; диагностики болезней животных посредством... | | Методические рекомендации по организации изучения дисциплины 62 Протокол... «Иммунология – клиническая иммунология» состоит в овладении знаниями по изучению иммунной системы организма человека, форм иммунного... |
| Решена ли проблема корректного определения элементов вторичной структуры? Данный метод был использован для того, чтобы ранжировать шесть методов определения вторичной структуры: stride, dssp, secstr, kaksi,... | | Программа факультативной дисциплины «Аллергология и иммунология» Формирование специальных профессиональных знаний и умений в области клинической иммунологии, аллергологии, необходимых для эффективной... |
| Программа факультативной дисциплины «Аллергология и иммунология» Формирование специальных профессиональных знаний и умений в области клинической иммунологии, аллергологии, необходимых для эффективной... | | Рабочей учебной программы по дисциплине общая и клиническая иммунология... |
| Рабочая программа дисциплины дисциплина сд. Р «Клиническая иммунология» Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования | | Программа по формированию навыков безопасного поведения на дорогах... Образовательный стандарт послевузовской профессиональной подготовки врача по специальности «аллергология и иммунология», образовательные... |
