Этиологическая структура сальмонеллеза и эшерихиоза птиц 06. 02. 02 Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология
Скачать 450.61 Kb.
|
| Условные обозначения: «–» нет роста микроорганизмов Микроорганизмы S. typhimurium и S. enteritidis, образующие сероводород, на среде «ВСА» формировали черные колонии с характерным металлическим блеском; микроорганизмы E. coli и P. vulgaris, не образующие сероводород, формировали светло-зеленые колонии. Микроорганизмы S. enteritidis и S. typhimurium формировали розово-красные колонии на среде «Rambach agar» и черные колонии на среде «XLT-4 agar»; микроорганизмы E. coli формировали на среде «Rambach agar» сине-зеленые колонии, на среде «XLT-4 agar» –желтые колонии; микроорганизмы P. vulgaris формировали на среде «Rambach agar» колонии оранжевого цвета, на среде «XLT-4» – бесцветные колонии. Дифференцирующее действие среды «Rambach agar» основано на том, что входящий в состав среды пропиленгликоль ферментируется сальмонеллами до кислоты, которая, воздействуя на pH-индикаторы, окрашивает колонии в красный цвет. Применение среды позволяло дифференцировать розово-красные колонии сальмонелл от сине-зеленых колоний эшерихий и оранжево-желтых колоний протея. Входящий в состав среды дезоксихолат натрия ингибировал феномен "роения" протея и рост S. aureus. Индикацию сальмонелл на среде «XLT-4 agar» проводили по черной окраске колоний, обусловленной продукцией сероводорода при ферментации лизина и отсутствии или малой интенсивности, ферментации ксилозы, лактозы и сахарозы. На среде «Cromocult Coliform agar» E. coli формировали колонии фиолетового цвета; S. typhimurium, S. enteritidis и P. vulgaris – бесцветные колонии. В целом ростообеспечивающие и ингибирующие свойства изученных питательных сред существенно не отличались, вместе с тем хромогенные среды «Rambach agar», «XLT-4 agar» ,«Cromocult Coliform agar» отличались более выраженными дифференциальными свойствами по сравнению со средами «Висмут-сульфит агар», «Эндо». 3.3. Сравнительная оценка эффективности схем бактериологического исследования на наличие микроорганизмов рода Salmonella и Escherichia Оценка эффективности схем бактериологического исследования на наличие сальмонелл. Исследовали па тологический материал от сельскохозяйственных птиц (n=40); пробы feces сельскохозяйственных, а также синантропных птиц (n=50); охлажденное мясо птицы (n=20). Исследования на наличие сальмонелл проводили по схемам: схема I «Индикация и идентификация сальмонелл с применением среды «ВСА»; схема II – с применением среды «Rambach agar»; схема III – с применением среды «XLT-4 agar». Идентификацию сальмонелл, выделенных из патологического материала, по схеме I проводили на 5-е сутки исследования, из 84 типичных колоний были идентифицированы 10 культур микроорганизмов рода Salmonella, специфичность среды – 11,9 %; по схеме II – на 4-е сутки исследования, из 16 типичных колоний были идентифицированы 10 культур микроорганизмов рода Salmonella, специфичность среды – 62,5 %; по схеме III – на 4-е сутки исследований, из 19 типичных колоний идентифицировано 10 культур микроорганизмов рода Salmonella, специфичность среды – 52,6 %. Идентификацию сальмонелл, выделенных из feces, по схеме I проводили на 4-е сутки исследования, из 38 типичных колоний было идентифицировано 14 культур микроорганизмов рода Salmonella, специфичность среды – 36,8 %; по схеме II – на 4-е сутки исследования, из 19 типичных колоний были идентифицированы 14 культур микроорганизмов рода Salmonella, специфичность среды – 73,7 %; по схеме III – на 4-е сутки исследований, из 21 типичных колоний идентифицировано 14 культур микроорганизмов рода Salmonella, специфичность среды составила – 66,6 %. Идентификацию сальмонелл, выделенных из охлажденного мяса, по схеме I проводили на 4-е сутки исследования, из 15 типичных колоний были идентифицированы 10 культур микроорганизмов рода Salmonella, специфичность среды – 66,6 %; по схеме II – на 4-е сутки исследования, из 12 типичных колоний были идентифицированы 10 культур микроорганизмов рода Salmonella, специфичность среды – 83,3 %; по схеме III – на 4-е сутки исследования, из 13 типичных колоний было идентифицировано 10 культур микроорганизмов рода Salmonella, специфичность среды – 76,9 % (табл. 4). Таблица 4 Сравнительная характеристика эффективности схем бактериологического исследования на наличие микроорганизмов рода Salmonella
Для оценки чувствительности и специфичности иммунохроматографической тест-системы «Singlepath ® Salmonella», принцип действия которой заключается в учете результата наличия возбудителей сальмонеллеза в материале за счет связывания комплекса «антиген-антитело», взвеси культур микроорганизмов S. enteritidis, S. typhimurium, E. coli, содержащие от 10 до 108 бактериальных клеток в 1 мл по стандарту мутности ГИСК им. Л. А.Тарасевича, высевали в лунку тест-планшета. В качестве контроля производили посев культур на среды «Висмут-сульфит агар», «Rambach agar», культивировали в течение 24 ч при 37 °С и учитывали рост характерных колоний. С применением тест-системы «Singlepath ® Salmonella» учет результатов можно проводить как при посеве чистых культур микроорганизмов Salmonella spp., так и смешанных культур микроорганизмов S. enteritidis, S. typhimurium, E. coli в концентрациях от 100 бактериальных клеток в 1 мл суспензии. Объектом исследования служили охлажденные куриные окорочка (n = 20): 1 группа – контаминация культурой S. enteritidis (опыт); 2 группа – контаминация культурой S. typhimurium (опыт); 3 группа – контаминация культурами S. enteritidis и E. сoli (опыт); 4 группа – не контаминированные образцы (контроль). Исследуемые пробы m=25 г, погруженные в пептонную воду в соотношении 1:5, контаминировали взвесью микроорганизмов в концентрациях от 107 до 102 бактериальных клеток в 1 мл суспензии и помещали в термостат при 37 ºС на 24 ч. С использованием тест-пластин «Petrifilm 3M» определяли количество мезофильных аэробных и факультативно анаэробных микроорганизмов (КМАФАнМ), сред «Эндо», «Висмут-сульфит агар», «Rambach agar», «XLT-4», «Cromocult Coliform agar» - наличие бактерий группы кишечных палочек (БГКП) и сальмонелл. Индикацию микроорганизмов Salmonella spp. проводили по трем схемам: схема 1 – среда предобогащения среда обогащения среда ВСА; схема 2 – среда предобогащения среда обогащения среда «Rambach agar» и «XLT-4»; схема 3 – среда предобогащения среда обогащения иммунохроматографическая система «Singlepath ® Salmonella». Установлено, что КМАФАнМ составило: при посеве разведения 103 – 59,20±4,57; 104 – 24,70±5,24; 105– 8,90± 4,23. С применением схемы 1 индикацию сальмонелл осуществляли на 4-е сутки исследования, применение схемы 2 позволяло провести индикацию сальмонелл на 3 сутки исследования. Применение схемы 3 позволяло провести индикацию микроорганизмов Salmonella spp. на 2-е сутки исследований. При учете результатов после внесения 160 мкл прогретой жидкой среды накопления через 20 мин проявлялись 2 красные полоски, что указывало на наличие в пробе сальмонелл. Результаты, полученные с помощью иммунохроматографической тест-системы, подтверждали пересевом проб на плотные дифференциально-диагностические среды. Тест-система позволяла в течение 24 ч при первоначальной концентрации в исследуемом образце от 100 бактериальных клеток Salmonella spp. проводить индикацию и идентификацию возбудителей сальмонеллеза. Оценка эффективности схем бактериологического исследования на наличие эшерихий. Исследования на наличие эшерихий проводили по схемам: схема I «Индикация и идентификация эшерихий с применением среды «Эндо»; схема II с применением среды «Chromocult Coliform agar». Идентификацию эшерихий, выделенных из патологического материала, по схеме I проводили на 7-е сутки исследования, из 78 типичных колоний были идентифицированы 20 культур микроорганизмов рода Escherichia, специфичность среды – 25,6 %; из feces – на 6-е сутки исследования, из 47 типичных колоний были идентифицированы 27 культур микроорганизмов рода Escherichia, специфичность среды – 57,4 %. Идентификацию эшерихий, выделенных из патологического материала, по схеме II проводили на 6-е сутки исследования, из 36 типичных колоний были идентифицированы 20 культур микроорганизмов рода Escherichia, специфичность среды – 55,5 %; из feces птиц – на 5-е сутки исследования, из 34 типичных колоний были идентифицированы 27 культур микроорганизмов рода Escherichia, специфичность среды – 79,4 % (табл. 5). Таблица 5 Сравнительная характеристика схем бактериологического исследования на эшерихиоз
3.4. Результаты оценки кишечных микробиоценозов птиц с синдромом желудочно-кишечных болезней 3.4.1. Количественный и видовой состав бактерий в микробиоценозах кишечника клинически здоровых птиц Для выявления изменений экологического равновесия в биотопе желудочно-кишечного тракта клинически здоровых цыплят проводили бактериологические исследования feces, учитывая количественный и видовой состав энтеробактерий, лактобактерий и бифидобактерий. Количество микроорганизмов (КОЕ) в 1 г рассчитывали путем высева 0,1 мл различных разведений исследуемого материала на чашки Петри с плотными дифференциально-диагностическими питательными средами. Количество выросших колоний эшерихий при посеве пробы feces (m=1,0 г), с последующим высевом на плотные дифференциально-диагностические среды составило при исследовании проб от суточных цыплят: для среды «МПА» – 0, «Эндо» – 0, «Rambach agar» – 0; от цыплят в возрасте 3 суток: «МПА» – 3,98±0,78, «Эндо» – 4,06±0,11, «Rambach agar» – 4,12±0,12; при исследовании цыплят в возрасте 5 суток: «МПА» – 7,61±0,64, «Эндо» – 7,37±0,22, «Rambach agar» – 7,93±0,15; при исследовании цыплят в возрасте 15 суток: «МПА» – 8,71±0,37, «Эндо» – 8,89±0,15, «Rambach agar» – 9,22±0,52. Определение видового состава микроорганизмов на хромогенных средах позволило сократить расход пита тельных сред, стерильной бактериологической посуды и времени проведе ния анализа. Для количественного учета лактобактерий использовали среду «MRS agar», бифидобактерий – «Bifidobacterium agar». Количество лактобактерий в зависимости от возраста цыплят составило: 1 сут. – 4,21±0,31; 3 сут. – 4,94±0,35; 5 сут. – 6,47±0,34; 15 сут. – 9,42±0,38. Количество бифидобактерий составило: 1 сут. – 0; 3 сут. – 5,17±0,41; 5 сут. – 6,78±0,44; 15 сут. – 8,47±0,61. Биохимическую идентификацию выделенных культур энтеробактерий выполняли с применением сред Гисса и набора «API 20E», предназначенного для ускоренной биохимической идентификации 104 таксонов грамотрицательных палочек в течение 18-24 ч. Тест-система состоит из прозрачной полимерной пластинки с 20 микропробирками объемом 0,25 мл, содержащими дегидратированные субстраты для определения 20 биохимических тестов. Результаты учитывали, заполняли бланки с кодами цифрового профиля, идентификацию проводили по кодам или идентификационной таблице. 3.4.2. Количественный и видовой состав бактерий в микробиоценозах кишечника птиц с синдромом желудочно-кишечных болезней При исследовании количественного учета бактерий в микробиоценозах кишечника цыплят с синдромом желудочно-кишечных болезней были выявлены существенные отличия количественного и видового состава микрофлоры кишечника от нормы. Количество эшерихий при исследовании проб feces от суточных цыплят составляло – 3,73±0,18; проб от цыплят в возрасте 3 сут. – 5,54±0,17; проб от цыплят в возрасте 5 сут. – 7,50±0,21. Количество Salmonella enteritidis при исследовании проб feces от суточных цыплят составляло – 2,02±0,12; проб от цыплят в возрасте 3 сут. – 3,41±0,11; проб от цыплят в возрасте 5 сут. – 4,09±0,17. Количество Salmonella typhimurium при исследовании проб feces от суточных цыплят составляло – 1,77±0,45; проб от цыплят в возрасте 3 сут. – 2,74±0,31; проб от цыплят в возрасте 5 сут. – 3,79±0,31. Количество лактобактерий в зависимости от возраста цыплят составило: 1 сут. – 3,17±0,24; 3 сут. – 3,81±0,12; 5 сут. – 4,13±0,17. Количество бифидобактерий составило: 1 сут. – 0; 3 сут. – 4,11±0,13; 5 сут. – 5,42±0,26. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Похожие:
 | Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология... Рекомендации разработаны авторским коллективом сотрудников фгу «фцтрб-вниви» и Главного управления ветеринарии км рт |  | Лечебная и профилактическая эффективность сахаптина при ассоциированных... Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология |
| ОД. А 03 Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология,... Сагакянц Александр Борисович, кандидат биологических наук, доцент кафедры биохимии и микробиологии биолого-почвенного факультета... | | Пояснительная записка «Микробиология и вирусология» ... |
| Рабочая программа дисциплины «Ветеринарная микробиология и иммунология» | | Рабочая программа дисциплины «Ветеринарная микробиология и микология» Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования |
| «Микробиология, вирусология, иммунология» Национальный государственный Университетфизической культуры, спорта и здоровья имени П. Ф. Лесгафта | | Примерная программа наименование дисциплины микробиология, вирусология... Дисциплина «Микробиология, вирусология» относится к циклу математических, естественнонаучных дисциплин |
| Примерная программа наименование дисциплины микробиология, вирусология... Дисциплина «Микробиология, вирусология» относится к циклу математических, естественнонаучных дисциплин | | Примерная программа наименование дисциплины микробиология, вирусология... Дисциплина «Микробиология, вирусология» относится к циклу математических, естественнонаучных дисциплин |
| Микробиология, вирусология, иммунология ... | | Аннотация рабочей программы дисциплины «Ветеринарная микробиология и микология» «Математический и естественнонаучный цикл» (С2Б11), его вариативная часть связана с такими дисциплинами как неорганической, аналитической... |
| Биология наука о жизни Система понятий и терминов урока: биология, биосфера, экология, фенология, ботаника,зоология, микология, бактериология, вирусология,... | | Учебно-методический комплекс по дисциплине Микробиология и вирусология (название) Учебно-методический комплекс Микробиология и вирусология составлен в соответствии с требованиями Государственного образовательного... |
| Микробиология, вирусология и иммунология Рекомендовано Учебно-методическим объединением по медицинскому и фармацевтическому образованию вузов России в качестве учебного пособия... | | Микробиология, вирусология микробиология полости рта Структуры внутрибольничных инфекций, вызываемых условно-патогенными микробами и оппортунистами |
