Этиологическая структура сальмонеллеза и эшерихиоза птиц 06. 02. 02 Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология
Скачать 450.61 Kb.
|
| 3.6. Определение серогрупповой принадлежности и адгезивных антигенов E.coli Серогрупповую принадлежность культур E.coli определяли в реакции агглютинации антигена с диагностическими О-коли сыворотками. При определении серогрупповой принадлежности эшерихий агглютинирующими поливалентными и моновалентными сыворотками было идентифицировано 28 изолятов (66,6 %). Среди изолятов, реагирующих с поливалентной сывороткой «группы №1», обнаружены серогруппы О2, О1, О15, О78. К серогруппе О2 отнесены 9 изолятов (32,14 %), к О1 – 6 (21,43 %), к О15 – 7 (25,0 %), к О78 – 6 (21,43 %). При серологической идентификации культур эшерихий, выделенных при бактериологическом исследовании патологического материала и feces сельскохозяйственной птицы породы «Русская белая», 4 изолята (44,5 %) были отнесены к серогруппе О2, 2 изолята (33,3 %) к серогруппе О1; породы «Московская белая» 2 изолята (22,2 %) были отнесены к серогруппе О2, 2 изолята (28,6 %) к серогруппе О15, 2 изолята (33,3 %) к серогруппе О78; «Холмогорской» породы 2 изолята (28,6 %) были отнесены к серогруппе О15. При серологической идентификации изолятов эшерихий, выделенных от синантропных птиц семейства «Голубиные», установлено, что к серогруппе О2 отнесено 3 изолята (33,3 %); к серогруппе О1 – 4 изолята (66,7 %); к серогруппе О15 – 3 изолята (42,9 %); к серогруппе О78 – 4 изолята (66,7 %). Из 42 изолятов E. coli 33,4 % не удалось типировать набором стандартных «О-коли сывороток». Для определения адгезивных антигенов эшерихий использовали агглютинирующие сыворотки К88, К99, 987Р, F41 и А20 в реакции агглютинации (РА) на стекле. Микроорганизмы культивировали на скошенном МПА или агаре Хоттингера для выявления антигенов К88, 987Р, A20 и на среде Минка – для обнаружения антигенов К99, F41. Реакцию учитывали в течение одной минуты при легком покачивании стекла при температуре 18-28 ºС. Контролем служила испытуемая культура, смешанная с каплей физиологического раствора (pH 7,2-7,4) и с каплей кроличьей сыворотки, разведенной 1:10 (для исключения самоагглютинации). Положительная реакция характеризовалась склеиванием бактериальных клеток в зерна или хлопья различной величины и полным или частичным просветлением сыворотки при отсутствии агглютинации в контроле. Реакцию учитывали сначала с комплексной сывороткой и в случае положительной реакции исследовали культуры, выращенные на МПА или среде Хоттингера, с сыворотками К88, 987Р и А20, а культуры со среды Минка – с К99 и F41. При определении адгезивных антигенов изолятов E. coli, выделенных из feces и патологического материала сельскохозяйственной и синантропной птицы, установлено, что из 9 изолятов, отнесенных к серогруппе О2, адгезивными свойствами обладали 4 изолята (О2:K99 – 1, O2:987P – 1, O2:F41 – 1, O2:A20 – 1); из 6 изолятов, отнесенных к серогруппе О1, адгезивными свойствами обладали 3 изолята (O1:A20 – 3); из 7 изолятов, отнесенных к серогруппе О15, адгезивными свойствами обладали 4 изолята (О15:K99 – 1, O15:A20 – 3); из 6 изолятов, отнесенных к серогруппе О78, адгезивными свойствами обладали 4 изолята (O78:K88 – 2, O78:A20 – 2) (табл. 8). Таблица 8 Результаты оценки адгезивных антигенов E. coli
При определении гемолитической активности изолятов E.coli учитывали степень образования на 5%-м кровяном агаре зон просветления среды. Установлено, что характерной β-гемолитической активностью обладали 8,0 % изученных изолятов E. coli. 3.7. Результаты изучения свойств энтеробактерий, доминирующих при желудочно-кишечных болезнях птиц 3.7.1. Изучение антагонистической активности При исследовании межвидового антагонизма использовали общепринятые методы исследования: перпендикулярных штрихов; агаровых блочков, находящихся в центре мембранного фильтра, а также с использованием мембранных фильтров. Суть методики состоит в способности биологически активных веществ, продуцируемых микробами-антагонистами, диффундировать через мембранные фильтры в слой питательной среды. Культуру изучаемого микроорганизма в количестве 0,5 мкл и концентрации 107–108 кл/мл наносили в виде капли в центр мембранного фильтра, помещенного на поверхность плотной питательной среды, и культивировали при оптимальных для данного микроорганизма условиях. Затем мембранные фильтры удаляли с поверхности плотной питательной среды, и на то же место помещали новые мембранные фильтры, на поверхность которых наносили взвесь исследуемых тест-штаммов патогенных бактерий в той же концентрации. Контролем служил рост культур, не подвергшихся воздействию БАВ. После воздействия биологически активных веществ на поверхностях мембранных фильтров выявляли рост культуры бактерий в виде пятна различной плотности и величины. Для определения антагонистической активности микроорганизмов применение мембранных фильтров позволяет проводить количественную оценку степени ингибирования штамма-антагониста, с применением хромогенных сред представляется возможным определять антагонистическую активность микроорганизмов, относящихся к разным систематическим группам. Кроме того, на одной чашке Петри можно проводить исследования антагонистической активности 3-4 штаммов-антагонистов к 9-24 тест-культурам. При изучении антагонистической активности микрорганизмов установлено, что изученные культуры микроорганизмов E. coli угнетали рост S. typhimurium с зоной задержки роста 1,4±0,1 мм; S. enteritidis – 1,6±0,1 мм; C. freundii – 1,5±0,2 мм; P. mirabilis – 0,6±0,1 мм; K. pneumonia – 1,3±0,1 мм (табл. 9). Таблица 9 Результаты изучения антагонистической активности бактерий
Примечание: t - доверительный коэффициент; td – коэффициент достоверности различий средних величин 3.7.2. Изучение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам Чувствительность микроорганизмов к антибиотикам изучали методами серийных разведений, диффузии в агар, а также с использованием микробиологического анализатора «MicroTax». Бактериальную суспензию из 18-часовой культуры готовили в 3-5 мл изотонического раствора 0,9%-ного NaCl по оптическому стандарту мутности "McFarland" 0,5. Подготовленную бактериальную суспензию в количестве 10 мкл переносили в 10 мл среды "Isosensitest". Из среды "Isosensitest" в определенные лунки планшета вносили по 100 мкл бактериальной суспензии, планшет инкубировали в термостате 18-24 ч при 35-37 ºC. Затем производили учет результатов на микробиологическом анализаторе "MicroTax Rider". Антибиотикорезистентность микроорганизмов определяли с помощью методик: «Оценка критической дозы ("Break-point")», «Оценка минимальной ингибирующей концентрации ("МИК")». При отсутствии роста в минимальной и максимальной концентрациях антибиотика микроорганизмы считали чувствительными к препарату. При наличии роста при минимальной концентрации антибиотика чувствительность микроорганизма к препарату являлась промежуточной. Если рост наблюдался при минимальной и максимальной концентрациях антибиотика, микроорганизмы считали устойчивыми к препарату. Минимальной ингибирующей концентрацией считали минимальную концентрацию антибиотика, которая ингибирует рост микроорганизмов. При изучении чувствительности к антибиотикам из 42 изученных изолятов E. coli 9 (21,4 %) были чувствительны к антибиотикам группы цефалоспоринов (цефазолин, цефатоксим); 8 (19,1%) – группы фторхинолонов (офлоксацин, ципрофлоксацин); 7 (16,7 %) – группы аминогликозидов (канамицин, амикацин); 9 (21,4 %) были устойчивы к антибиотикам группы макролидов (эритромицин, олеандомицин); 9 (21,4 %) – к группе природных пенициллинов (оксациллин). Из 24 изолятов сальмонелл 6 (25,0 %) были чувствительны к антибиотикам группы цефалоспоринов (цефазолин, цефатоксим); 5 (20,8 %) – группы фторхинолонов (офлоксацин, ципрофлоксацин); 3 (12,5 %) – группы аминогликозидов (канамицин, амикацин); 6 (25,0 %) – были устойчивы к антибиотикам группы макролидов (эритромицин, олеандомицин); 4 (16,7 %) – группы природных пенициллинов (оксациллин) (табл. 10). Таблица 10 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Похожие:
 | Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология... Рекомендации разработаны авторским коллективом сотрудников фгу «фцтрб-вниви» и Главного управления ветеринарии км рт |  | Лечебная и профилактическая эффективность сахаптина при ассоциированных... Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология |
| ОД. А 03 Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология,... Сагакянц Александр Борисович, кандидат биологических наук, доцент кафедры биохимии и микробиологии биолого-почвенного факультета... | | Пояснительная записка «Микробиология и вирусология» ... |
| Рабочая программа дисциплины «Ветеринарная микробиология и иммунология» | | Рабочая программа дисциплины «Ветеринарная микробиология и микология» Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования |
| «Микробиология, вирусология, иммунология» Национальный государственный Университетфизической культуры, спорта и здоровья имени П. Ф. Лесгафта | | Примерная программа наименование дисциплины микробиология, вирусология... Дисциплина «Микробиология, вирусология» относится к циклу математических, естественнонаучных дисциплин |
| Примерная программа наименование дисциплины микробиология, вирусология... Дисциплина «Микробиология, вирусология» относится к циклу математических, естественнонаучных дисциплин | | Примерная программа наименование дисциплины микробиология, вирусология... Дисциплина «Микробиология, вирусология» относится к циклу математических, естественнонаучных дисциплин |
| Микробиология, вирусология, иммунология ... | | Аннотация рабочей программы дисциплины «Ветеринарная микробиология и микология» «Математический и естественнонаучный цикл» (С2Б11), его вариативная часть связана с такими дисциплинами как неорганической, аналитической... |
| Биология наука о жизни Система понятий и терминов урока: биология, биосфера, экология, фенология, ботаника,зоология, микология, бактериология, вирусология,... | | Учебно-методический комплекс по дисциплине Микробиология и вирусология (название) Учебно-методический комплекс Микробиология и вирусология составлен в соответствии с требованиями Государственного образовательного... |
| Микробиология, вирусология и иммунология Рекомендовано Учебно-методическим объединением по медицинскому и фармацевтическому образованию вузов России в качестве учебного пособия... | | Микробиология, вирусология микробиология полости рта Структуры внутрибольничных инфекций, вызываемых условно-патогенными микробами и оппортунистами |
