Чувствительность микроорганизмов к антибиотикам
Антибактериальный препарат
|
Чувствительность микроорганизма
|
Escherichia coli
|
Salmonella enteritidis
|
Salmonella typhimurium
|
I*
|
II*
|
I*
|
II*
|
I*
|
II*
|
Цефазолин
|
10,5
|
-
|
18,2
|
-
|
7,7
|
-
|
Цефатоксим
|
10,9
|
-
|
18,2
|
-
|
7,7
|
-
|
Офлоксацин
|
8,3
|
-
|
9,1
|
-
|
15,4
|
-
|
Ципрофлоксацин
|
10,8
|
-
|
9,1
|
-
|
7,7
|
-
|
Канамицин
|
7,8
|
-
|
9,1
|
-
|
-
|
-
|
Амикацин
|
8,9
|
-
|
9,1
|
-
|
7,7
|
-
|
Эритромицин
|
-
|
16,3
|
-
|
9,1
|
-
|
15,4
|
Олеандомицин
|
-
|
5,1
|
-
|
18,2
|
-
|
7,7
|
Оксациллин
|
-
|
21,4
|
-
|
-
|
-
|
7,7
|
Примечание: I* – % чувствительных микроорганизмов; II* – % устойчивых микроорганизмов
3.7.3. Изучение чувствительности микроорганизмов
к дезинфицирующим средствам
При оценке чувствительности микроорганизмов к дезинфицирующему средству «Дезант» (1,6,3,8-диметано-1,3,6,8-тетраазациклодекан), наряду с общепринятым методом диффузии в агар, нами были апробированы «Дип-слайды», предназначенные для бактериологического исследования поверхностей. При исследовании полимерную пластину слайда, покрытую плотной питательной средой, плотно прижимали к поверхности, а затем помещали в контейнер и культивировали при 37 °С 18-24 ч. Дезинфекция признавалась удовлетвори тельной, если зона задержки роста микроорганизмов вокруг лунок с дезинфицирующим препаратом составляла более 10 мм, во всех исследованных смывах и «Дип-слайдах» отсутствовал рост микроорганизмов S.typhimurium, S.enteritidis, E. coli. Применение «Дип-слайдов» «Oxoid», покрытых агаризированой средой и предназначенных для контроля качества дезинфекции поверхностей, позволяла выявлять уровень контаминации патогенными и условно-патогенными микроорганизмами семейства Enterobacteriaceae (табл. 11).
Таблица 11
Результаты изучения чувствительности микроорганизмов
к дезинфицирующему препарату «Дезант»
Вид микроорганизмов, № штамма
(источник выделения)
|
Метод исследования
|
Диффузия в агар
(зона задержки роста, мм)
|
Дип-слайды «Oxoid» (степень контаминации)
|
Концентрация препарата, %
|
2,0
|
2,5
|
3,0
|
2,0
|
2,5
|
3,0
|
S.typhimurium №5715 (референтный штамм)
|
13,70±2,31
|
15,20±1,76
|
16,90±2,33
|
++
|
-
|
-
|
S.typhimurium
(feces птицы)
|
14,30±1,83
|
15,00±2,30
|
16,20±1,89
|
++
|
-
|
-
|
S.typhimurium
(п/м)
|
13,90±2,17
|
14,80±3,10
|
15,70±2,44
|
++
|
-
|
-
|
S.enteritidis №204 (референтный штамм)
|
14,20±2,55
|
15,10±1,78
|
16,20±1,34
|
++
|
-
|
-
|
S.enteritidis
(feces птицы)
|
14,40±2,11
|
15,70±1,74
|
16,80±1,85
|
-
|
-
|
-
|
S.enteritidis
(патматериал птицы)
|
15,40±1,88
|
16,50±2,03
|
17,30±1,36
|
-
|
-
|
-
|
E.coli О115 №580
(референтный штамм)
|
15,70±1,19
|
16,40±1,84
|
17,80±1,86
|
++
|
-
|
-
|
E.coli О1
(feces птицы)
|
15,20±2,43
|
16,50±2,32
|
17,80±2,11
|
-
|
-
|
-
|
E.coli О2
(feces птицы)
|
16,90±2,62
|
17,40±1,24
|
18,30±1,55
|
-
|
-
|
-
|
E.coli О15
(feces птицы)
|
15,70±2,31
|
16,20±1,57
|
17,40±1,65
|
-
|
-
|
-
|
E.coli О78
(feces птицы)
|
14,70±1,77
|
15,70±2,21
|
16,80±2,32
|
++
|
-
|
-
|
Примечание: «-», «++» отсутствие контаминации, слабая контаминация соответственно
На основании результатов исследований установлено, что при желудочно-кишечных болезнях птицы в микробиоценозе желудочно-кишечного тракта доминируют культуры микроорганизмов, отнесенные к видам: Escherichia coli – 41,2 %; Salmonella typhimurium – 12,8 %; Salmonella enteritidis – 10,7 %. Этиологическая структура сальмонеллеза представлена видами: S. typhimurium (54,2 %); S. enteritidis (45,8 %); эшерихиоза, серогруппами – О2 (32,14 %), О15 (25,0 %), О1 (21,43 %), О78 (21,43 %), соответственно. При определении адгезивных антигенов установлено, что из 9 изолятов E. coli, отнесенных к серогруппе О2, адгезивными свойствами обладали 4 изолята (K99, 987P, F41, A20); из 7 изолятов, отнесенных к серогруппе О15, – 4 изолята (K99, A20); из 6 изолятов, отнесенных к серогруппе О1, – 3 изолята (A20); из 6 изолятов, отнесенных к серогруппе О78, – 4 изолята (K88, A20).
ВЫВОДЫ
1. На основе сравнительной оценки и подбора эффективных дифференциально-диагностических питательных сред и тест-систем из патологического материала и feces при желудочно-кишечных болезнях птиц выделено и идентифицировано 102 культуры микроорганизмов, отнесенных к видам: Escherichia coli – 41,2 %; Salmonella typhimurium – 12,8 %; Salmonella enteritidis – 10,7 %; Staphylococcus aureus – 11,8 %; Enterococcus faecalis – 10,7 %; Proteus vulgaris – 7,9 %; Enterococcus faecium – 4,9 %.
2. При серологической идентификации 24 изолятов микроорганизмов рода Salmonella, выделенных из патологического материала и feces птицы, 11 изолятов (45,8 %) были отнесены к Salmonella enteritidis, 13 (54,2 %) – Salmonella typhimurium.
3. При определении серогрупповой принадлежности 42 изолятов E. coli, выделенных из патологического материала и feces, к серогруппе О2 отнесены 9 изолятов (32,14 %), О15 – 7 (25,0 %), О1 – 6 (21,43 %), О78 – 6 (21,43 %), 33,4 % изолятов не удалось типировать стандартным набором «О-коли сывороток».
4. При определении адгезивных антигенов микроорганизмов, выделенных из feces и патологического материала птиц, из 9 изолятов E. coli серогруппы О2 адгезивными свойствами обладали 4 культуры микроорганизмов: О2:K99 – 1, O2:987P – 1, O2:F41 – 1, O2:A20 – 1; из 7 изолятов серогруппы О15 – 4 изолята: О15:K99 – 1, O15:A20 – 3; из 6 изолятов серогруппы О1 - 3 культуры: O1:A20 – 3; из 6 изолятов серогруппы О78 – 4 изолята: O78:K88 – 2, O78:A20 – 2.
5. Установлено, что использование сред «Rambach agar», «XLT-4 agar», «Cromocult Coliform agar» позволяет с высокой специфичностью и в ускоренные сроки проводить индикацию и идентификацию сальмонелл и эшерихий.
6. Установлено, что применение иммунохроматографической тест-системы «Singlepath ® Salmonella» позволяет в течение 24 ч с учетом обогащения при первоначальной концентрации в исследуемом образце от 100 бактериальных клеток проводить индикацию микроорганизмов рода Salmonella.
7. Установлено, что из 42 изолятов E. coli 9 (21,4 %) были чувствительными к антибиотикам группы цефалоспоринов (цефазолин, цефатоксим); 8 (19,1 %) – группы фторхинолонов (офлоксацин, ципрофлоксацин); 7 (16,7 %) – группы аминогликозидов (канамицин, амикацин); 9 (21,4 %) – были устойчивы к антибиотикам группы макролидов (эритромицин, олеандомицин); 9 (21,4 %) – группы природных пенициллинов (оксациллин).
8. Установлено, что из 24 изолятов микроорганизмов рода Salmonella 6 (25,0 %) были чувствительны к антибиотикам группы цефалоспоринов (цефазолин, цефатоксим); 5 (20,8 %) – группы фторхинолонов (офлоксацин, ципрофлоксацин); 3 (12,5 %) – группы аминогликозидов (канамицин, амикацин); 6 (25,0 %) – были устойчивы к антибиотикам группы макролидов (эритромицин, олеандомицин); 4 (16,7 %) – группы природных пенициллинов (оксациллин)
9. Применение «Дип-слайдов» «Oxoid», покрытых агаризированой средой и предназначенных для контроля качества дезинфекции поверхностей, позволяет выявлять уровень контаминации патогенными и условно-патогенными микроорганизмами семейства Enterobacteriaceae.
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
Использование сред «Rambach agar», «XLT-4 agar», «Cromocult Coliform agar» при бактериологической диагностике сальмонеллеза и эшерихиоза позволяет при первичной идентификации дифференцировать колонии сальмонелл и эшерихий от таксономически сходных видов энтеробактерий.
Для использования в научно-исследовательских учреждениях разработаны и изданы «Методические рекомендации по определению антагонистической активности микроорганизмов», утвержденные секцией «Ветеринарная санитария, гигиена и экология» отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии (протокол № 8 от 22 июня 2010 года).
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ
Плитов И.С. Сравнительная характеристика питательных сред для количественно-качественного учета энтеробактерий при дисбактериозе кишечника птиц // Экологически безопасные ресурсосберегающие технологии и переработки сельскохозяйственного сырья и производства продуктов питания : Материалы Международной научной конференции студентов и молодых ученых. – М. : МГУПБ, 2009. – С. 287-288.
Плитов И.С. Определение чувствительности энтеробактерий к антибиотикам и дезинфицирующим средствам // Ветеринария. – 2010. – № 12. – С. 42–45.
Шурахова. Ю.Н. Этиологическая структура бактериальных болезней птиц по данным отчетов ветлабораторий Российской Фе дерации за 2009 год // Ю.Н. Шурахова, И.С. Плитов, M.B. Калмыков, О.Н. Виткова // VI международный ветеринарный конгресс по пти цеводству. – М., 2010. – С. 102-103.
Ленченко Е.М. Сравнительная характеристика дифференциально-диагностических питательных сред для индикации возбудителей сальмонеллеза птиц // Е.М. Ленченко, И.С. Плитов // Аграрная наука. – 2011. – №3. – С. 26-28.
Плитов И.С. Антагонистическая активность микроорганизмов при эшерихиозе птиц // Ветеринария. – 2011. – № 9. – С. 30-32.
Плитов И.С. Индикация патогенных бактерий, циркулирующих в птицеводческих хозяйствах // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. – 2011. – №1 (5). – С. 63-65.
Подписано в печать 26.04.2012. Усл. печ.л. 1,5. Тираж 100 экз. Заказ
МГУПП, 109316, Москва, ул. Талалихина, 33.
ООО «Франтера». 109316, Москва, ул. Талалихина, 33. |
