Получение антигенов и использование их для разработки средств диагностики и профилактики вирусных инфекций





НазваниеПолучение антигенов и использование их для разработки средств диагностики и профилактики вирусных инфекций
страница3/8
Дата публикации04.01.2015
Размер0.75 Mb.
ТипАвтореферат
100-bal.ru > Право > Автореферат
1   2   3   4   5   6   7   8

Рис. 5. Получение и изучение антигена вируса кори. (А) - Анализ фракций вируса кори после центрифугирования в градиенте плотности сахарозы в РГА. (Б) - Электрофорез белков вируса кори, шт. Эдмонстон. Дорожка 1- маркеры мол. весов: 205, 116, 97, 84, 66, 55, 45, 36, 29, 24, 20, 14.2, 6.5 кД. Дорожка 2 – белки вируса кори. (В) - Вестерн-блот-анализ. Дорожка 1 – стрип обработан сывороткой человека с клиническом диагнозом корь, подтвержденным лабораторно (разведение 1:500). Дорожка 2 – стрип обработан сывороткой человека, не имеющего антител к вирусу кори (разведение 1:100). Стрелками указаны: белок NP (верхняя) и F (нижняя) вируса кори.

Для получения антигена использовали смесь фракций, собранных с градиента плотности сахарозы после ультрацентрифугирования. Фракции, содержащие очищенный вирус, смешивали с фракциями, содержащими нуклеокапсиды вируса в пропорции 1:3. Используя полученный антиген, были подобраны условия проведения ИФА, оптимизированы концентрации основных компонентов тест-системы и сроки хранения. Оптимальная концентрация антигена составила 5 мкг/мл.

Проверка антигенных свойств штамма NovО/96 выявила существенное сходство с референс-штаммом Эдмонстон и с вакцинным штаммом Л-16 вируса кори (табл. 5). Сыворотки, полученные от 6 иммунизированных очищенным вирусом кори, штамм Эдмонстон, мышей линии BALB/c, и сыворотки, полученные от 6 иммунизированных очищенным вирусом кори, штамм NovО/96, мышей линии BALB/с, были исследованы в ИФА и РТГА. Сыворотки от всех иммунизированных вирусом кори, штамм Эдмонстон, мышей реагировали как со штаммами Эдмонстон и Л-16, так и со штаммом NovО/96. С другой стороны, сыворотки от всех мышей, иммунизированных штаммом NovО/96, реагировали как с самим штаммом NovО/96, так и со штаммами Эдмонстон и Л-16 (см. табл.5).

Таблица 5

Изучение антигенных свойств вируса кори штамм NovO/96

Специфич-ность сыворотки

№ сыворотки

Титр антител (обратные величины)/реакция для определения титра антител /

антиген (штамм), используемый в реакции

РТГА

ИФА

штамм Эдмонстон

штамм

Л-16

штамм

NovО/96

штамм Эдмонстон

штамм

Л-16

Штамм

NovО/96

Сыворотка против вируса кори штамм Эдмонстон

1

32

16

32

640

320

640

2

32

16

16

640

320

320

3

32

16

16

640

320

320

4

32

8

16

640

320

160

5

16

8

8

320

320

160

6

16

8

8

320

160

160

Среднее по группе

25,40

(17,44-36,98)

11,31

(7,6-16,85)

14,25

(8,24-24,65)

508,00

(348,9-739,56)

285,09

(211,84-383,66)

253,98

(140,24-460,0)

Сыворотка против выделенного штамма NovО/96

1

64

32

64

320

320

640

2

64

32

64

320

320

320

3

64

32

64

320

160

320

4

64

32

32

160

160

320

5

32

16

32

160

160

320

6

32

16

16

160

160

320

Среднее по группе

50,8

(34,9-73,96)

25,4

(17,44-36,98)

40,32

(22,26-73,02)

226,27

(151,92-337,03)

201,59

(138,46-293,49)

359,19

(266,9-483,38)

Таким образом, штамм NovО/96 по антигенным свойствам близок к референс-штамму Эдмонстон и к вакцинному штамму Л-16. Исходя из более высокой продуктивности штамма NovO/96 и близости к референс-штамму Эдмонстон и к вакцинному штамму Л-16 по антигенным свойствам, штамм NovO/96 был использован для получения антигена ИФА-тест-системы, которая позволила эффективно выявлять антитела к вирусу кори как у переболевших, так и у вакцинированных лиц.

Лабораторные варианты тест-системы использовали для изучения иммунного статуса различных возрастных групп населения Новосибирска в отношении вируса кори. В период с апреля по октябрь 2003 года с целью определения специфических антител к вирусу кори были собраны образцы сывороток крови 364 здоровых доноров, проживающих на территории Новосибирска и в РТГА, РН и методом ИФА изучено содержание в них антител к вирусу кори (рис. 6 и табл. 6).



Содержание антител в сыворотках (ИФА)



>0.35 МЕ - положительные сыворотки

>0.16 МЕ - слабоположительные сыворотки

0-0.15 МЕ - отрицательные сывороток



Титр антител, определенный в РТГА



>8 - протективный титр антител

>4 - положительные сыворотки

0-4 - отрицательные сыворотки



Титр антител, определенный в РН





> 120 - протективный титр антител

> 8 - положительные сыворотки

< 8 - отрицательные сыворотки

> 48 - расчетный уровень протективных антител

Рис. 6. Изучение иммунного статуса у представителей различных возрастных групп населения Новосибирска в отношении вируса кори. По оси абсцисс: Количество отрицательных и положительных сывороток в воз-растной группе, а также сывороток, содержащих протективные титры антител (%). По оси ординат: Возрастные группы (лет).

Таблица 6

Соотношение совпадения результатов определения антител к вирусу кори в сыворотках крови доноров Новосибирска методами ИФА, РТГА и РН

Возрастная группа доноров

Количество сывороток, положительных в ИФА, РТГА и РН, (%)

Количество сывороток, отрицательных в ИФА, РТГА и РН, (%)

3 – 4 года

62,8

7,1

9 – 10 лет

60,0

4,0

16 – 18 лет

45,0

13,3

20 – 25 лет

38,3

20,0

30 – 35 лет

71,4

15,3

старше 38 лет

77,8

1,4
1   2   3   4   5   6   7   8

Похожие:

Получение антигенов и использование их для разработки средств диагностики и профилактики вирусных инфекций iconТема: патогенные кокки
Овладеть основными методами лабораторной диагностики, терапии и профилактики кокковых инфекций
Получение антигенов и использование их для разработки средств диагностики и профилактики вирусных инфекций iconПаразитарные инфекции у детей
Овладение знаниями, умениями и навыками в области природно-очаговых и паразитарных инфекций у детей, включающими этиологию, эпидемиологию,...
Получение антигенов и использование их для разработки средств диагностики и профилактики вирусных инфекций iconМеждународный Фестиваль Культуры и Искусства Естественные науки Опытно-экспериментальная...
Я решил писать данную работу, чтобы узнать побольше об истории появления тригонометрии, способах решения тригонометрических уравнений...
Получение антигенов и использование их для разработки средств диагностики и профилактики вирусных инфекций iconРазработка и внедрение в медицинскую практику новых методов и средств...
...
Получение антигенов и использование их для разработки средств диагностики и профилактики вирусных инфекций iconНоситель антигенов
Изобретение относится к биотехнологии и иммунологии. Предлагается носитель антигенов в виде липидного комплекса, состоящего из гликозида,...
Получение антигенов и использование их для разработки средств диагностики и профилактики вирусных инфекций iconНекоторые аспекты диагностики tоrch-инфекций в акушерстве
Коханского ул., д. 7, г. Чита, 672038, тел. 31-43-23, факс. (302-2) 31-43-24
Получение антигенов и использование их для разработки средств диагностики и профилактики вирусных инфекций iconИспользование презентации на уроке немецкого языка
Данное методическое пособие предназначено для специалистов системы профилактики правонарушений несовершеннолетних, их реабилитации...
Получение антигенов и использование их для разработки средств диагностики и профилактики вирусных инфекций iconКлинико-эпидемиологическая характеристика парентеральных вирусных...
Работа выполнена в гу нии эпидемиологии и микробиологии им. Н. Ф. Гамалеи рамн г. Москва и на кафедре акушерства и гинекологии гоу...
Получение антигенов и использование их для разработки средств диагностики и профилактики вирусных инфекций iconВыпускная работа по «Основам информационных технологий»
Интерфероны являются многофункциональными компонентами защиты против вирусных и паразитарных инфекций и некоторых опухолей. Они влияют...
Получение антигенов и использование их для разработки средств диагностики и профилактики вирусных инфекций iconМосковский энергетический институт (технический университет)
Целью дисциплины является получение знаний о современных методах радиоизмерений, о возможностях современной контрольно-измерительной...
Получение антигенов и использование их для разработки средств диагностики и профилактики вирусных инфекций iconРотавирусная инфекция у детей: серьезное заболевание
Ротавирус – очень заразная группа вирусных инфекций, чаще всего поражающих детей в возрасте от шести месяцев до двух лет. Основные...
Получение антигенов и использование их для разработки средств диагностики и профилактики вирусных инфекций iconэпидемиологическая характеристика внутрибольничных гепатитов в и...
Институт эпидемиологии и инфекционных болезней им. Л. В. Громашевского амн украины, заведующий лабораторией вирусных гепатитов и...
Получение антигенов и использование их для разработки средств диагностики и профилактики вирусных инфекций iconГородского округа красноуфимск постановление
О внесении изменений в постановление главы городского округа Красноуфимск №43 от 24. 01. 2011 года «Об утверждении комплексного плана...
Получение антигенов и использование их для разработки средств диагностики и профилактики вирусных инфекций iconЭпидемиологические особенности вирусных гепатитоваиев организованных...
Ведущее учреждение гу научно-исследовательский институт полиомиелита и вирусных энцефалитов им. Чумакова М. П. Рамн
Получение антигенов и использование их для разработки средств диагностики и профилактики вирусных инфекций iconРеферат отчета По Государственный контракту №47 от 31. 03. 2008 г....
...
Получение антигенов и использование их для разработки средств диагностики и профилактики вирусных инфекций icon«инфекционные болезни»
...


Школьные материалы


При копировании материала укажите ссылку © 2013
контакты
100-bal.ru
Поиск