Получение антигенов и использование их для разработки средств диагностики и профилактики вирусных инфекций
Скачать 0.75 Mb.
|
Таблица 10 Сравнение эффективности выявления антител к вирусу паротита в сыворотках крови иммунизированных животных
Значения ОП контролей (положительный контроль, отрицательный контроль и контроль конъюгата) соответствовали требованиям, необходимым для учета результатов и указанным в проекте "Инструкции по применению тест-системы иммуноферментной для определения титра антител к вирусу паротита". Определение коэффициента корреляции между методами показало высокую степень корреляционных связей: значения коэффициентов корреляции находились в интервале значений от 0,73 (для сывороток людей) до 0,90 (для сывороток животных). Таким образом, полученный антиген вируса паротита был использован для разработки тест-системы, позволяющей выявлять антитела класса G к вирусу паротита в сыворотке крови человека. Результаты определения титра антител, полученные с использованием разработанной тест-системы, имели высокий коэффициент корреляции с результатами определения титра антител, полученными с использованием «золотого» стандарта – реакции торможения гемагглютинации. Изучение разнообразия вирусов кори и паротита, циркулирующих на территории Западной Сибири. Детальное изучение передачи инфекционного агента особенно важно в вирусологии и эпидемиологии. Анализ изолятов, выделенных в 50-60-е годы XX столетия, показал, что циркуляция Эдмонстон-подобного генотипа А вируса кори, по-видимому, была достаточно широко распространена в мире (Takeda М. et al., 1999). Выделенные в России штаммы Buk 88, Gag 88 и Il 88 (Tikhonova N.T. et al., 1992) и штамм Loss (Jin L. et al., 1996) также относились к генотипу А. Начиная с 1996 года, проведена работа по сбору образцов от больных с клиническим диагнозом корь и генотипированию вируса кори, циркулирующего на территории Новосибирской области. В 1996 году при вспышке кори в детском доме у мальчиков 11 и 13 лет были получены образцы носоглоточных смывов и крови, из которых были выделены изоляты вируса кори Нов1/96 и Нов2/96. Фрагмент, включающий часть M- и F- генов (позиции 4725 - 5015) изолята Нов1/96, был секвенирован. Проведено сравнение нуклеотидной последовательности этого изолята с последовательностями других изолятов вируса кори. Результаты анализа показали генетическое сходство выделенного изолята Нов1/96 с выделенным в России штаммом Buk88 и используемым для вакцинации в России штаммом Л-16 вируса кори (Haider А. et al., 1997). Изолят принадлежал к генотипу А. В 1997 году выделены еще два изолята, отнесенные к генотипу А и один изолят, принадлежащий к генотипу D6, ранее не выявляемый на территории России. Этот изолят был выделен при локальной вспышке заболевания в детском коллективе у мальчика 8 лет с клиническим диагнозом корь. Различий в клиническом проявлении кори у больных, от которых были выделены изоляты с генотипом А, и у больного, от которого был выделен изолят с генотипом D6, отмечено не было. Вирус, вызвавший заболевание у ребенка, был наиболее близок по нуклеотидной последовательности штамму New Jersey.USA/94/1, являющемуся референс-штаммом генотипа D6. В 1998 были генотипированы еще 2 штамма вируса кори, принадлежащие к генотипу А. После этого генотип А вируса кори более не обнаруживался. Слежение за вирусом кори показало, что генотип А был вытеснен генотипом D6. Все 8 штаммов вируса кори, обнаруженные на территории Западной Сибири в срок с 1998 по 2001 гг, относились к генотипу D6. Циркуляция генотипа D6 в Западной Европе была показана ранее: этот генотип был найден в Великобритании в 1992-1995 годах (Jin L. et al., 1997) и в Испании в 1994 (Rima B.K. et al., 1995). Известно, что генотип D6 вызвал вспышку заболевания корью в Бразилии в1997 году, в Аргентине – в 1998 году и в Уругвае – в 1999 (Baumeister E. et al., 2000). Есть предположение, что в РФ этот генотип попал из Европы, где он уже продолжительное время циркулирует. Вирус паротита, как и вирус кори, в генетическом плане является стабильным вирусом с высокой степенью устойчивости к мутациям. Тем не менее, анализ последовательностей геномов различных изолятов, показал, что существует несколько различающихся вариантов вируса паротита – генотипов, которые циркулируют на определенных территориях. Ген SH (мРНК – 316 н.о., кодирует белок 57 а.о.) является самым вариабельным в геноме, и генотипирование штаммов вируса паротита проводится главным образом по этому гену. Филогенетический анализ, проведенный по генам HN и F, практически совпадает с данными, полученными по SH-гену. Начиная с 1994 года, проведена работа по сбору образцов от больных эпидемическим паротитом и генотипированию вируса, циркулирующего на территории Западной Сибири. В период с 12 января по 07 июня 1994 года в поселке Кольцово Новосибирской области была зарегистрирована вспышка заболевания эпидемическим паротитом. Всего за этот срок заболевание было диагностировано у 64 детей и 7 взрослых. Наибольший процент заболевших составили дети до 12 лет (35,8 % – дети 7-8-летнего возраста и 28,0 % – 11-12-летнего возраста). Течение инфекции было типичным: заболевание начиналось с повышения температуры тела до 38 0C, появления припухлости околоушной слюнной железы (как правило, с одной стороны), через 1-2 дня появлялась припухлость и другой околоушной железы, которая исчезала через 8-10 дней после начала заболевания. На основании клинических проявлений и по нарастанию титров противопаротитных антител в парных сыворотках, определенных с помощью РТГА и ИФА, больным был поставлен диагноз – эпидемический паротит. От двух больных были выделены изоляты вируса паротита (табл. 11). Таким образом, был выделен и первично охарактеризован новый штамм вируса паротита, вызвавший вспышку заболевания эпидемическим паротитом в Новосибирской области в 1994 году. Штамм получил название "Драгун" (изоляты “Драгун-1” и “Драгун-2”) и был депонирован в коллекции вирусов ГНЦ ВБ РФ "Вектор" (номер – VB-05). Секвенирование нуклеотидной последовательности показало принадлежность штамма к генотипу С. Полная нуклеотидная последовательность штамма была расшифрована в 2004 году и депонирована в базу данных GenBank (№ AY669145). Таблица 11 Получение и изучение свойств штамма «Драгун» вируса паротита
н.и. - не исследовалось Штамм ПетроНов был выделен от больного (возраст 17 лет) с клиническим диагнозом: эпидемический паротит, средней степени тяжести (табл. 12). Через 3 сут после появления температуры было зарегистрировано резкое увеличение околоушных слюнных желез, озноб, рвота, общая слабость, боли при глотании, головные боли. При осмотре зафиксировано увеличение подчелюстных лимфоузлов до 3,0 х 3,0 см, болезненность околоушных слюнных желез, ригидность затылочных мышц, повышение температуры тела до 39,90С. Таблица 12 Получение и изучение свойств штамма ПетроНов вируса паротита
н.и. - не исследовалось. Для проведения работ по генотипированию выделенного изолята продукт ПЦР, полученный при использовании образца носоглоточного смыва, был секвенирован. Анализ генома вируса показал его принадлежность к генотипу Н (рис. 9).  | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Похожие:
 | Тема: патогенные кокки Овладеть основными методами лабораторной диагностики, терапии и профилактики кокковых инфекций |  | Паразитарные инфекции у детей Овладение знаниями, умениями и навыками в области природно-очаговых и паразитарных инфекций у детей, включающими этиологию, эпидемиологию,... |
| Международный Фестиваль Культуры и Искусства Естественные науки Опытно-экспериментальная... Я решил писать данную работу, чтобы узнать побольше об истории появления тригонометрии, способах решения тригонометрических уравнений... | | Разработка и внедрение в медицинскую практику новых методов и средств... ... |
| Носитель антигенов Изобретение относится к биотехнологии и иммунологии. Предлагается носитель антигенов в виде липидного комплекса, состоящего из гликозида,... | | Некоторые аспекты диагностики tоrch-инфекций в акушерстве Коханского ул., д. 7, г. Чита, 672038, тел. 31-43-23, факс. (302-2) 31-43-24 |
| Использование презентации на уроке немецкого языка Данное методическое пособие предназначено для специалистов системы профилактики правонарушений несовершеннолетних, их реабилитации... | | Клинико-эпидемиологическая характеристика парентеральных вирусных... Работа выполнена в гу нии эпидемиологии и микробиологии им. Н. Ф. Гамалеи рамн г. Москва и на кафедре акушерства и гинекологии гоу... |
| Выпускная работа по «Основам информационных технологий» Интерфероны являются многофункциональными компонентами защиты против вирусных и паразитарных инфекций и некоторых опухолей. Они влияют... | | Московский энергетический институт (технический университет) Целью дисциплины является получение знаний о современных методах радиоизмерений, о возможностях современной контрольно-измерительной... |
| Ротавирусная инфекция у детей: серьезное заболевание Ротавирус – очень заразная группа вирусных инфекций, чаще всего поражающих детей в возрасте от шести месяцев до двух лет. Основные... | | эпидемиологическая характеристика внутрибольничных гепатитов в и... Институт эпидемиологии и инфекционных болезней им. Л. В. Громашевского амн украины, заведующий лабораторией вирусных гепатитов и... |
| Городского округа красноуфимск постановление О внесении изменений в постановление главы городского округа Красноуфимск №43 от 24. 01. 2011 года «Об утверждении комплексного плана... | | Эпидемиологические особенности вирусных гепатитоваиев организованных... Ведущее учреждение гу научно-исследовательский институт полиомиелита и вирусных энцефалитов им. Чумакова М. П. Рамн |
| Реферат отчета По Государственный контракту №47 от 31. 03. 2008 г.... ... | | «инфекционные болезни» ... |
